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miRNA-324-3p及其靶基因WNT2B在鼻咽癌组织中的表达及临床意义被引量：3: 2014年; 目的:探讨miRNA-324-3p及其靶基因WNT2B在鼻咽癌组织中的表达和临床意义。方法:qRTPCR技术检测miRNA-324-3p、WNT2BmRNA的相对表达量,Western blot技术检测WNT2B蛋白在39例鼻咽癌组织及21例鼻咽非肿瘤上皮组织中的表达,分析其表达水平与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果:在鼻咽癌组织中miRNA-324-3p的相对表达量显著下调(P<0.01),WNT2BmRNA和蛋白的相对表达量则显著上调(均P<0.01)。鼻咽癌组织中miRNA-324-3p与WNT2BmRNA及蛋白的表达呈负相关,WNT2BmRNA与蛋白的表达呈正相关(均P<0.05)。miRNA-324-3p、WNT2BmRNA及蛋白的表达均与鼻咽癌患者T分级、临床分期及淋巴结转移密切相关(均P<0.05),而与患者的性别、年龄无明显相关性(均P>0.05)。结论:鼻咽癌组织中miRNA-324-3p的表达下调,WNT2B的表达上调,两者可能存在相互关系,共同介导鼻咽癌的发生、发展。; 刘超李果刘勇粟忠武任舒灵邓腾波田勇泉邱元正; 关键词：鼻咽肿瘤基因

EphA2经p38MAPK通路调控头颈部鳞状细胞癌血管内皮生长因子表达的研究被引量：1: 2013年; 目的阐明促红细胞生成素产生肝细胞受体A2（erythropoietin—producing hepatocellular receptor，EphA2）蛋白可经p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen—activated protein kinase，p38MAPK）信号通路调控头颈部鳞状细胞癌血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达。方法采用脂质体2000将EphA2蛋白过表达载体pEGFP—N1-EphA2和空白载体pEGFP—N1分别转染头颈鳞状细胞癌Tu686细胞，酶联免疫吸附法检测EphA2蛋白上调后VEGF蛋白的表达，Westernblot法检测p38MAPK信号通路有无激活；进一步利用不同浓度（0、5、10μmol／L）小分子抑制剂SB203580特异性阻断p38MAPK通路，酶联免疫吸附法检测VEGF蛋白的表达改变有无逆转。结果Tu686细胞EphA2蛋白上调后，VEGF蛋白在空白载体组和亲本细胞组中的表达（x±s）分别为（400．99±33．50）pg／ml和（385．30±33．50）pg／ml，而在实验组中的表达显著升高为（535．31±45．71）pg／ml，差异有统计学意义（F=17．091，P〈0．01）；同时，实验组Tu686细胞磷酸化p38MAPK的表达上调。不同浓度（0、5、10p,mol／L）SB203580作用EphA2蛋白过表达的Tu686细胞后，磷酸化p38MAPK的表达则被梯度抑制，且VEGF蛋白的表达逐渐降低，分别为（643．75±52．00）pg／ml、（513．52±54．05）pg／ml、（302．85±13．93）pg／ml，三组间差异有统计学意义（F=45．761，P〈0．01）。结论EphA2蛋白对p38MAPK信号通路具有调控作用，并经该通路影响VEGF蛋白的表达。; 刘勇谭浩蕾李果余长云粟忠武任舒灵朱刚才邱元正田勇泉张欣; 关键词：EPHA2 鳞状细胞 P38丝裂原活化蛋白激酶类血管化血管内皮生长因子A

MTDH促进头颈鳞癌细胞放疗抵抗的实验研究被引量：3: 2017年; 目的探讨星形胶质细胞上调基因1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1,又称MTDH)对头颈部鳞状细胞癌(简称头颈鳞癌)放疗抵抗的影响。方法 Western blotting检测放射线照射后头颈鳞癌细胞MTDH蛋白表达的改变。通过脂质体转染的MTDH c DNA和慢病毒介导的MTDH shRNA,分别在不同头颈鳞癌细胞中过表达和抑制MTDH,平板集落形成实验检测头颈鳞癌细胞放疗抵抗能力的改变,细胞免疫荧光染色检测DNA双链损伤指标γH2AX的表达。结果 MTDH在头颈鳞癌细胞中的表达随着放射性照射剂量的增加和时间的延长逐渐升高。在CNE-2细胞中过表达MTDH,其体外集落形成能力增强;相反,在Tu686细胞中抑制MTDH的表达,其体外集落形成能力减弱。同时,细胞免疫荧光显示Tu686细胞在MTDH抑制后,其DNA双链损伤指标γH2AX的表达增加,表明DNA双链损伤修复过程受阻。结论 MTDH能促进头颈鳞癌细胞放疗抵抗的形成,与其对DNA双链损伤修复的调控作用相关。; 周小娟张叠阔李果敬前程刘超佘笠邱元正张欣黄东海张俊杰刘勇; 关键词：头颈部鳞状细胞癌 MTDH

泛素在伴颈淋巴结转移的喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义: 2013年; 目的:检测伴(N+)和不伴(N-)颈部淋巴结转移的喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中泛素的表达情况,探讨其与LSCC颈部淋巴结转移及其他病理参数的相关性。方法:通过免疫组织化学技术结合中国体视学图像分析系统检测泛素在19例LSCC(N+)与20例LSCC(N-)组织的表达水平并作t检验、方差分析、ROC曲线等统计学分析。结果:泛素在LSCC(N+)与LSCC(N-)中的表达差异有统计学意义(P<0.01);其表达水平与是否伴颈部淋巴结转移有关,与年龄、烟酒嗜好史、临床分期、原发部位等均无关。结论:泛素在LSCC(N+)中的表达明显上调,提示其可能是参与LSCC发生淋巴结转移的重要分子之一。; 蔡耿明朱刚才刘勇余长云谭浩蕾邱元正张欣黄东海; 关键词：喉鳞状细胞癌泛素淋巴结转移

放射线照射诱导鼻咽癌细胞上皮-间质转化的作用研究被引量：10: 2013年; 目的体外实验探讨放射线照射对鼻咽癌细胞上皮-间质转化的影响。方法采用梯度递增放射线照射筛选构建鼻咽癌CNE-2放疗抵抗细胞（CNE-2withradioresistance，CNE-2-Rs），并通过CCKH8法、克隆形成实验、流式细胞术验证CNE-2-Rs细胞的放疗抵抗性。显微镜下观察照射过程中，CNE-2细胞的形态学改变；Westernblot检测不同照射时期CNE-2细胞上皮细胞标志物钙黏蛋白和间质细胞标志物波形蛋白的表达情况。结果CCK-8结果表明，CNE-2-Rs细胞在同-时间点（第4天）不同照射剂量（4、6、8Gy）以及同-照射剂量（4Gy）不同时间点（2～5d）下的存活率均高于其亲本细胞（P值均〈0．05）；4Gy放射线照射前细胞增殖能力基本-致，放射线照射后CNE-2增殖能力明显低于CNE-2-Rs；CNE-2-Rs细胞放射线处理后，集落形成能力强于亲本细胞（P值均〈0．05）；拟合多靶单击模型和线性二次模型细胞存活曲线，结果表明，平均致死剂量（meanlethaldose，D0）、准阈剂量（quasi—thresholddose，Dq）、2Gy细胞存活分数（survivalfraction，SF2）和平均灭活剂量（meaninactivationdose，MID）增加，α和α/β值减少（P值均〈0．05）；CNE-2-Rs细胞接受4Gy射线后，相对于CNE-2细胞出现s期、G2期细胞比例增多（P值均〈0．05）。CNE-2-Rs细胞在形态上出现呈梭形、伪足伸出和细胞间连接变松散等上皮-间质转化形态学改变。照射总剂量达24Gy后，CNE-2细胞钙黏蛋白表达下调和波形蛋白表达升高（P值均〈0．01）。结论鼻咽癌细胞在放射线照射过程中出现典型的上皮-间质转化形态学及分子标志物改变，提示上皮-间质转化可能在鼻咽癌放疗抵抗中发挥了重要作用。; 李果刘勇粟忠武任舒灵刘超田勇泉邱元正; 关键词：上皮间质转化辐射耐受性

星形胶质细胞上调基因1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义被引量：4: 2013年; 目的检测星形胶质细胞上涮基因1（AEG-1）在喉鳞状细胞癌（鳞癌）组织中的表达，并探讨其表达与喉鳞癌临床病理特征和预后之间的关系。方法逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定AEG-1mRNA在13对配对喉鳞癌及癌旁黏膜组织中的表达。同时，免疫组织化学技术检测AEG-1蛋白在88例喉鳞癌及15例癌旁黏膜组织中的表达，并统计分析其表达水平与临床病理特征及预后的关系。结果AEG-1蛋白在15例癌旁黏膜组织中仅呈阴性或弱阳性表达；AEG-1mRNA在喉鳞癌组织中的相对表达量较癌旁黏膜显著升高（0．81±0．17比0．23±0．10；t=10．337，P〈0．01）；88例喉鳞癌组织中，AEG-1蛋白的阳性表达率为87．5％（77／88）。且AEG-1蛋白表达水平与喉鳞癌患者T分期（X^2=6．289，P=0．018）、临床分期（X^2=11．049，P〈0．01）、转移（X^2=20．859，P〈0．01）及术后复发（X^2=13．459，P〈0．01）密切相关。生存分析显示AEG-1蛋白高表达组与低表达组患者5年总生存率分别为35．9％与86．4％，差异具有统计学意义（X^2=23．409，P〈0．01）；多因素分析示AEG-1蛋白表达水平为喉鳞癌患者预后的独立影响因素（P=0．016）。结论AEG-1蛋白可能在喉鳞癌的发生、发展中发挥了重要作用，对喉鳞癌患者的预后具有评估价值。; 刘勇李果粟忠武邱元正张欣余长云周小娟任舒灵黄东海田勇泉; 关键词：喉肿瘤鳞状细胞肿瘤转移

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国家自然科学基金(81202128)

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