国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS4631)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：王晓丰唐建清薛晖丁正峰夏爱军更多>>
- 相关机构：江苏省淡水水产研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 草鱼呼肠孤病毒RT-PCR检测方法的建立及临床应用被引量：4
- 2012年
- 为了解草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)的感染流行情况及早期临床诊断的需要,研究并建立了该病毒的RT-PCR检测方法。根据GenBank中GCRV VP6蛋白基因保守序列设计引物,以GCRV弱毒疫苗株GCHV-892总RNA为模板,RT-PCR反应扩增出712 bp的目的条带,并对PCR反应体系和反应程序进行了优化,测定了该方法的敏感性和特异性。敏感性试验结果表明以含VP6蛋白基因的重组质粒为模板,该PCR方法的最低检测限为102copies.μL-1,特异性试验表明该引物仅能扩增GCRV核酸,而与白斑综合征病毒(WSSV)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、病毒性神经坏死病毒(VNNV)无交叉反应性。应用所建立的RT-PCR方法检测了7份疑似出血病草鱼病样,3份病料获得了阳性扩增,随机挑选其中的1份阳性样品经克隆后测序,结果显示与GenBank中已知序列最高有99%的相似性。
- 王晓丰薛晖丁正峰丁正峰唐建清
- 关键词：草鱼出血病呼肠孤病毒RT-PCR
