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国家重点基础研究发展计划(2011CB964804)

作品数:10 被引量:12H指数:2
相关作者:岳文裴雪涛南雪陈琳周军年更多>>
相关机构:军事医学科学院中国食品药品检定研究院中南大学更多>>
发文基金:国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 4篇生物学

主题

  • 10篇细胞
  • 3篇祖细胞
  • 3篇分化
  • 2篇单个核细胞
  • 2篇增殖
  • 2篇谱系
  • 2篇脐带
  • 2篇脐带血
  • 2篇重编程
  • 2篇细胞谱系
  • 2篇核细胞
  • 2篇红系
  • 2篇红系祖细胞
  • 2篇干细胞
  • 2篇肝癌
  • 1篇动力学观察
  • 1篇多能性
  • 1篇循环血
  • 1篇乙酯
  • 1篇造血

机构

  • 7篇军事医学科学...
  • 1篇中南大学
  • 1篇中国食品药品...
  • 1篇军事医学科学...

作者

  • 7篇裴雪涛
  • 7篇岳文
  • 6篇南雪
  • 4篇周军年
  • 4篇陈琳
  • 3篇曾泉
  • 2篇王静雪
  • 2篇李艳华
  • 2篇谢小燕
  • 2篇李思霆
  • 2篇习佳飞
  • 2篇吕洋
  • 1篇许英晨
  • 1篇房芳
  • 1篇袁红丰
  • 1篇李思婷
  • 1篇张文成
  • 1篇刘一鸣
  • 1篇管利东
  • 1篇管兆轩

传媒

  • 3篇生物技术通讯
  • 3篇Scienc...
  • 2篇中华血液学杂...
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇中国科学:生...

年份

  • 1篇2016
  • 3篇2014
  • 6篇2013
10 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
脐带血造血干/祖细胞体外分化为不同阶段红系祖细胞的动力学观察被引量:1
2013年
目的:探讨体外培养脐带血单个核细胞定向诱导分化为不同阶段红系祖细胞的动力学变化情况。方法:用0.5%甲基纤维素沉降脐带血红细胞及人淋巴细胞分离液密度梯度离心法得到单个核细胞,在含EPO、SCF、IGF-1等细胞因子的无血清培养体系中诱导其定向分化为红系祖细胞,观察细胞增殖、存活率、细胞集落形成情况,并检测不同阶段细胞红系特异性表面标志CD71和CD235a的表达。结果:随着培养时间的延长,细胞数逐渐增多,14 d细胞可扩增140倍左右,收集诱导后的细胞进行瑞氏吉姆萨染色,可见大量红系祖细胞,诱导后的细胞集落形成能力强,形成的克隆大部分为红系集落。诱导过程中,14 d前CD71、CD235a的表达逐渐增高。按细胞表面标志表达的不同可将诱导的细胞分为4群,分别对应红系祖细胞的不同阶段;随着诱导天数的增加,各时间点细胞对应的早期红系祖细胞群(P2、P3)比例逐渐下降,中晚期红系祖细胞群(P4、P5)的比例逐渐上升。结论:无血清培养基添加细胞因子组合的红系诱导培养体系可较好地诱导扩增红系祖细胞,流式分选可获得相对均一而处于不同分化阶段的红系祖细胞群体。获得了红系祖细胞体外分化的动力学数据,为今后进一步优化红系诱导分化体系获得均一的红系祖细胞奠定了基础,并对未来利用干细胞制备均一的红系祖细胞应用于临床治疗有一定的指导作用。
王金明习佳飞曲洺逸王静雪刘一鸣陈琳谢小燕李艳华南雪岳文裴雪涛
关键词:脐带血红系祖细胞单个核细胞细胞动力学
miR-155对肝癌细胞增殖的影响被引量:1
2014年
目的:在肝癌细胞系中过表达miR-155,研究其对肝癌细胞增殖的影响。方法:将pc DNA3.0-miR-155表达载体瞬时转染Huh7.5.1及Hcclm3肝癌细胞系,通过实时定量PCR技术对miR-155在转录水平的表达进行检测,采用CCK8法及克隆形成实验检测miR-155过表达后对Huh7.5.1及Hcclm3肝癌细胞系增殖的影响。结果:转染细胞后72 h,经实时定量PCR检测,Huh7.5.1及Hcclm3肝癌细胞中成熟miR-155的表达分别上调约431及16倍(P<0.01),说明其能有效高表达;CCK8法及克隆形成实验结果显示,miR-155能够明显促进肝癌细胞增殖(P<0.01)。结论:pc DNA3.0-miR-155转染Huh7.5.1及Hcclm3肝癌细胞系后能高效表达成熟miR-155,同时证明过表达miR-155能使肝癌细胞的增殖受到非常明显的促进。
南雪曾泉吕洋姚海雷陈琳岳文裴雪涛
关键词:MIR-155肝癌细胞增殖MIR-155
肝癌肿瘤干细胞的分离鉴定及差异性小分子RNA筛选被引量:1
2013年
旨在分离并鉴定肝癌肿瘤干细胞,并对其异常表达的microRNA进行了初步筛选。首先利用流式细胞术及免疫荧光技术分别在肝癌细胞系及肝癌组织标本中确认了CD90+细胞的存在;随后利用免疫磁珠分选技术从肝癌细胞系MHCC97-H中分离出了CD90+细胞,化疗药物耐药性实验表明,CD90+细胞具有明显的化疗药物耐受能力;两次裸鼠皮下成瘤性实验也表明CD90+细胞具有较强的成瘤能力,而CD90-细胞不具备成瘤能力。上述实验充分说明:CD90+细胞具有肝癌肿瘤干细胞特性。因此利用该细胞模型进行了肝癌肿瘤干细胞CD90+细胞和非肝癌肿瘤干细胞CD90-细胞之间差异表达的microRNA的检测,结果表明,CD90+细胞与CD90-细胞之间共有92个microRNAs的表达存在差异性,其中在CD90+细胞中高表达的microRNAs有52个;在CD90-细胞中高表达的microRNAs有40个。
许英晨管利东周军年曾泉袁红丰李思霆管兆轩何丽娟南雪陈琳岳文裴雪涛
关键词:肝癌肿瘤干细胞CD90小分子RNA
细胞谱系重编程研究进展
2013年
重编程研究是近年来干细胞与再生医学领域中里程碑式的研究突破,打破了人胚胎干细胞研究带来的伦理桎梏,为再生医学临床应用带来了一片新天地.但诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)制作过程繁琐,重编程效率偏低,且仍需如同胚胎干细胞一样,经过步步诱导分化而获得目的细胞,最关键的是,目的细胞的安全性问题仍亟待解决.谱系重编程,在广义的角度上来说,至少从1987年即已展开,20世纪末引发成体干细胞研究热潮的"可塑性"研究也可归为谱系重编程研究,在iPS重编程研究的推动下,谱系重编程技术正在蓬勃发展,并被再生医学研究者给予了厚望,尤其是在可预见的将来,其在个体化治疗上具有的优势将不可比拟.
周军年岳文裴雪涛
关键词:转分化去分化
CAPE promotes the expansion of human umbilical cord blood-derived hematopoietic stem and progenitor cells in vitro被引量:2
2014年
Due to the low number of collectable stem cells from single umbilical cord blood(UCB)unit,their initial uses were limited to pediatric therapies.Clinical applications of UCB hematopoietic stem and progenitor cells(HSPCs)would become feasible if there were a culture method that can effectively expand HSPCs while maintaining their self-renewal capacity.In recent years,numerous attempts have been made to expand human UCB HSPCs in vitro.In this study,we report that caffeic acid phenethyl ester(CAPE),a small molecule from honeybee extract,can promote in vitro expansion of HSPCs.Treatment with CAPE increased the percentage of HSPCs in cultured mononuclear cells.Importantly,culture of CD34+HSPCs with CAPE resulted in a significant increase in total colony-forming units and high proliferative potential colony-forming units.Burst-forming unit-erythroid was the mostly affected colony type,which increased more than 3.7-fold in 1μg mL 1CAPE treatment group when compared to the controls.CAPE appears to induce HSPC expansion by upregulating the expression of SCF and HIF1-α.Our data suggest that CAPE may become a potent medium supplement for in vitro HSPC expansion.
LIU YiMingZHANG BoWenZHANG JingWANG SiHanYAO HaiLeiHE LiJuanCHEN LinYUE WenLI YanHuaPEI XueTao
关键词:CAPE体外扩增祖细胞脐带血自我更新能力咖啡酸苯乙酯
主动脉-性腺-中肾区、卵黄囊和循环血来源的CD41^+细胞分化潜能比较
2013年
目的比较小鼠胚胎不同造血组织来源的CD41^+细胞向造血、间质、内皮细胞分化的潜能。方法取小鼠胚胎孕11d主动脉-性腺-中肾(AGM)区、卵黄囊(YS)和循环血(CB)来源的造血细胞经流式细胞术分选获得CD41^+细胞,并检测CD41^+细胞中CD45和c.kit的表达;采用IL-3、骨形态发生蛋白4(BMP-4)预处理半固体培养法评估CD41^+细胞造血分化潜能的差异;采用荧光免疫法检测CD41^+细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA,间质细胞标志)的表达;采用向内皮细胞分化诱导的培养条件观察其内皮分化潜能。结果在AGM区、YS、CB来源的CD4l^+细胞中,CD45^+细胞比例分别为51.9%、45.8%、22.2%,c-kit^+细胞比例分别为40.0%、39.6%、36.2%。在IL-3刺激后,与未刺激组相比AGM、YS、CB来源的CD41’细胞总的造血细胞集落形成数量均显著增加[(14.1=k1.9)对(1.2+0.2);(32.4士1.1)对(18.4士2.2);(41.84-0.9)对(10.44-1.8)](P〈0.01)。BMP-4刺激后,与未刺激组相比:AGM、YS来源的CD41’细胞生成CFU-Mix的数量下降[(0.54-0.6)对(3.2士0.8);(1.3+0.7)对(7.4土1.7)](P〈0.01);但CB来源的CD41^+细胞生成CFU.Mix的数量无明显变化[(2.54-0.5)对(3.94-1.5)](P〉0.01)。AGM、YS来源的CD41^+细胞高表达α-SMA,但CB来源的CD41^+细胞低表达d-SMA。结论小鼠胚胎不同造血组织来源的CD41^+细胞在免疫表型、造血细胞集落形成及细胞因子刺激应答方面存在明显差异。
李思霆周军年陈海旭谢一帆贺文艳南雪岳文刘兵裴雪涛
关键词:白细胞介素3CD41
From stem cells to red blood cells:how far away from the clinical application?被引量:5
2014年
The generation of red blood cells(RBCs)from stem cells provides a solution for deficiencies in blood transfusion.Currently,primary hematopoietic stem cells,embryonic stem cells and induced pluripotent stem cells have shown the potential to produce fully mature RBCs.Here,we discuss the advantages,induction protocols,progress and possible clinical applications of stem cells in RBC production.
XIE XiaoYanLI YanHuaPEI XueTao
关键词:造血干细胞胚胎干细胞红血细胞多能性
脐血单个核细胞来源红系祖细胞的诱导扩增及保存的研究被引量:2
2016年
目的探索含多种细胞因子无血清培养基诱导脐血单个核细胞体外分化为红系祖细胞效率及红系祖细胞的保存方法。方法利用羟乙基淀粉沉降脐血中红细胞,人淋巴细胞分离液(Ficoll)分离单个核细胞,采用含FMS样酪氨酸激酶3配体、干细胞生长因子、胰岛素样生长因子1、重组人红细胞生成素的无血清培养基进行体外诱导脐血单个核细胞向红系祖细胞分化,并将诱导的红系祖细胞用不同的冻存液进行冷冻保存,观察红系祖细胞诱导、分化能力和红系祖细胞冷冻保存效果。结果随着诱导时间延长,细胞总数明显增多,培养14d红系祖细胞扩增约110倍,存活率为(88.92±0.95)%,红系祖细胞特异性标志CD71+细胞占(86.77±9.11)%,CD71/CD235a细胞占(64.47±16.67)%。诱导10d多为中幼红细胞,可见血红蛋白表达的阳性细胞;诱导14d开始出现晚幼红细胞,细胞沉淀呈红色。诱导7d红系集落数为326.00±97.96,高于诱导前(61.60±20.03)。10%二甲基亚砜(DMSO)+2%人血清白蛋白保存细胞复苏后红系祖细胞存活率、回收率分别为(90.32±1.80)%、(93.66±1.87)%,将50%自体脐血浆与10%DMSO、2%人血清白蛋白联用可获得更好的保护效果。结论该无血清培养基可高效诱导、扩增红系祖细胞,10%DMSO+2%人血清白蛋白+50%自体脐血血浆可很好保存红系祖细胞。
陈琳谢小燕习佳飞吕洋田宇刘大庆岳文李艳华南雪李思婷范增裴雪涛
关键词:胎血红系祖细胞冷冻保存单个核细胞
Advances in cell lineage reprogramming被引量:1
2013年
As a milestone breakthrough of stem cell and regenerative medicine in recent years,somatic cell reprogramming has opened up new applications of regenerative medicine by breaking through the ethical shackles of embryonic stem cells.However,induced pluripotent stem(iPS) cells are prepared with a complicated protocol that results in a low reprogramming rate.To obtain differentiated target cells,iPS cells and embryonic stem cells still need to be induced using step-by-step procedures.The safety of induced target cells from iPS cells is currently a further concerning matter.More broadly conceived is lineage reprogramming that has been investigated since 1987.Adult stem cell plasticity,which triggered interest in stem cell research at the end of the last century,can also be included in the scope of lineage reprogramming.With the promotion of iPS cell research,lineage reprogramming is now considered as one of the most promising fields in regenerative medicine,will hopefully lead to customized,personalized therapeutic options for patients in the future.
ZHOU JunNianYUE WenPEI XueTao
关键词:细胞谱系重编程IPS靶细胞
人造血转录因子GATA-1的克隆、表达及其对间质细胞的生物学作用
2013年
目的:构建人GATA-1全长过表达载体,对其进行过表达,并初步探讨其在人非造血细胞(人脐静脉内皮细胞、人成纤维细胞)中的生物学作用。方法:以人脐带血cDNA为模板,采用高保真PCR获得GATA-1的CDS序列,连接至pGEM-T Easy载体,构建pBPLV-GATA1慢病毒表达质粒,并对上述载体进行NheⅠ、XbaⅠ双酶切和测序鉴定,鉴定正确后,在293T细胞中进行慢病毒包装,浓缩病毒后,对我们原代分离培养的人脐静脉内皮细胞和成纤维细胞进行慢病毒感染,采用流式分选对阳性目的细胞进行纯化,阳性细胞扩增后进行Western印迹鉴定;以人包皮成纤维细胞(HFF)为研究对象,在光学及荧光显微镜下观察细胞形态变化情况,CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞表面标志表达情况。结果:双酶切和测序结果表明克隆了1242 bp的人GATA-1全长CDS序列,经Western印迹检测,GATA-1在293T细胞中获得瞬时表达;获得了人GATA-1稳转细胞株,对稳转细胞株的检测表明,GATA-1对HFF细胞增殖具有一定的抑制作用,但对HFF细胞形态及细胞表面标志CD90、CD29的表达无明显影响。结论:构建了人GATA-1慢病毒表达载体及其稳转细胞株,GATA-1蛋白对间质细胞的增殖有一定的抑制作用。
南雪曾泉王静雪张文成房芳王思涵岳文周军年裴雪涛
关键词:GATA-1间质细胞增殖
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