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婴幼儿血管瘤内皮细胞的体外培养及冻存: 2008年; 目的研究婴幼儿血管瘤内皮细胞的体外分离培养及进行冷冻保存，探讨建立血管瘤内皮细胞库的可能性。方法应用胶原酶消化结合免疫磁珠法分离获得血管瘤内皮细胞，以含20％胎牛血清的EGM-2培养液进行培养。vWF免疫荧光染色鉴定所培养内皮细胞及其纯度。按慢冻速融原则对血管瘤细胞进行液氮冻存、复苏，比较未冻存和复苏血管瘤内皮细胞的活力、形态、增殖能力、低密度脂蛋白摄取能力以及细胞凋亡率。结果CD31免疫磁珠阳性分选获得高纯度的原代血管瘤内皮细胞，复苏后细胞存活率约为未冻存细胞的94．8％，二组细胞形态学无明显差异，生长曲线相似，增殖能力差异无统计学意义，冻存内皮细胞的凋亡率较未冻存细胞高，但无统计学意义。结论胶原酶消化结合免疫磁珠法能获得高纯度的血管瘤内皮细胞，冻存的血管瘤内皮细胞复苏后仍保持较高的活力及体外增殖能力，为血管瘤的后续实验研究提供了稳定的细胞来源。; 马刚林晓曦金云波李伟王维胡晓洁陈辉杨川王炜曹谊林; 关键词：血管瘤内皮细胞细胞培养技术

婴幼儿血管瘤内皮细胞的分离、培养及鉴定被引量：5: 2008年; 目的建立一个稳定的婴幼儿血管瘤内皮细胞体外培养体系。方法增生期血管瘤标本经胶原酶消化，CD31-免疫磁珠分选纯化细胞，接种于纤维蛋白铺层的培养皿；分别行细胞形态学观察、细胞生长曲线的测定、培养细胞免疫荧光鉴定、低密度脂蛋白吸收试验。结果从血管瘤组织分离纯化出CD31^＋细胞，4h开始贴壁，细胞呈梭形，7～10d生长融合呈铺路石状，CD31-免疫磁珠黏附于细胞上。血管瘤内皮细胞CD31、vWF表达阳性，可摄取低密度脂蛋白。结论我们建立的婴幼儿血管瘤内皮细胞的分离培养方法，可获得血管瘤内皮细胞，并为血管瘤增生消退机制的研究奠定了细胞学基础。; 马刚林晓曦金云波李伟王维胡晓洁陈辉许志成王炜杨川; 关键词：血管瘤细胞培养免疫磁珠

鲜红斑痣内皮细胞的分离培养及鉴定: 2008年; 目的探讨从鲜红斑痣分离培养内皮细胞的方法。方法鲜红斑痣标本经胶原酶消化，CD31-免疫磁珠分选纯化细胞，接种于纤维连接蛋白铺层的培养皿；分别进行细胞形态学观察、细胞生长曲线的测定、培养细胞免疫荧光鉴定、低密度脂蛋白吸收试验。结果从鲜红斑痣组织分离纯化出CD31^＋细胞，在纤维连接蛋白铺层上6h开始贴壁，细胞呈梭形，7d生长融合呈铺路石状，CD31-免疫磁珠黏附于细胞上。鲜红斑痣内皮细胞CD31、vWF表达阳性，可摄取低密度脂蛋白。结论建立鲜红斑痣内皮细胞的分离培养方法。; 马刚林晓曦金云波李伟王维胡晓洁陈辉杨川王炜; 关键词：内皮细胞细胞

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国家自然科学基金(30400470)