烟台市科学技术发展计划项目(2008142-28)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：孙成铭张丽平姚声涛赵宇朱元方更多>>
- 相关机构：烟台毓璜顶医院哈尔滨医科大学遵义医院更多>>
- 发文基金：烟台市科学技术发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CCAAT增强子结合蛋白α对急性粒细胞白血病HL60细胞分化和凋亡的影响
- 2010年
- 目的探讨CCAAT增强子结合蛋白α（C／EBPα）在体内和体外对急性粒细胞白血病HL60细胞分化和凋亡的影响及其可能机制。方法将C／EBPα表达质粒pEGFP—C，EBPα经阳离子脂质体介导转染HL60细胞，用G418筛选出C/EBPα稳定表达细胞株为转染组；以转染pEGFP空载质粒HL60细胞为空载体组；未处理的HL60细胞为对照组。瑞氏染色观察细胞形态学变化；噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖抑制率；流式细胞术分析凋亡；RT—PCR及免疫印迹法（Westernblot）检测c—myc基因的表达。20只BALB／c裸鼠按完全随机法分为3组：转染组7只、空载体组7只、对照组6只。将3组细胞分别皮下注射相应各组小鼠形成皮下瘤，20d后处死小鼠，测量肿瘤质量及大小，TUNEL法检测皮下瘤组织细胞凋亡率。结果筛选到C/EBPα基因稳定表达的细胞株pEGFP-C／EBPα—HL60，细胞出现明显分化。对照组、空载体组和转染组细胞的凋亡率分别为（5．4±1．4）％、（5．0±1．3）％、（21．9±4．5）％，转染组细胞的凋亡率显著高于对照组和空载体组（均P〈0．05）。RT—PCR及免疫印迹显示C／EBPα明显抑制c－mycmRNA和蛋白的表达（均P〈0．05）。对照组、空载体组和转染组细胞接种小鼠形成皮下瘤，其质量分别为（5．35±1．12）g、（5．12±31）g和（3．26±0．72）g，瘤体大小分别为（25±4）mm、（18±3）mm和（11±2）mm，转染组瘤体质量及瘤体大小明显低于对照组和空载体组（均P〈0．05）。与对照组和空载体组比较，转染组皮下瘤组织细胞凋亡率明显增加（均P〈0．05）。结论C/BPα在HL60细胞中具有促进细胞凋亡和抑制细胞增殖的能力，显示C／EBPα在急性粒细胞白血病中是一种肿瘤抑制因子。
- 孙成铭李少君牟晓东赵琪杜江东赵欣
- 关键词：HL-60细胞细胞凋亡细胞增殖
- FOXO3a转录因子对白血病HL60细胞增殖和凋亡的影响研究被引量：1
- 2011年
- 目的:研究转录因子FOXO3a对急性粒细胞白血病HL60细胞株增殖、凋亡的影响及可能的分子机制。方法:将FOXO3a表达质粒pcDNA3.1-FOXO3a及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染HL60细胞,用G418筛选出FOXO3a稳定表达细胞株。台盼蓝拒染法和MTT法检测HL60细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡,RT-PCR及Western blot方法检测基因Bim和bcl-2的表达。结果:筛选到稳定表达FOXO3a基因的细胞株HL60/FOXO3a细胞,与空载体转染组(HL60/empty)及未处理对照组(HL60/untreated)细胞相比,转染组FOXO3a明显抑制HL60细胞生长与增殖,导致G1期阻滞,细胞凋亡明显增加。RT-PCR及Western blot显示FOXO3a明显上调Bim基因的mRNA和蛋白表达,而抑制bcl-2基因mRNA和蛋白的表达。结论:FOXO3a转录因子能抑制HL60细胞的生长和增殖,并诱导其发生凋亡,其机制可能是通过对凋亡相关基因的调控并阻止细胞周期进程来实现的。
- 陈佳琳张丽平孙成铭姚声涛朱元方赵宇
- 关键词：转录因子增殖凋亡细胞周期白血病
