国家自然科学基金(30200134)
- 作品数：5 被引量：7H指数：1
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- BMP-2和地塞米松对成人成骨细胞增殖和分化的影响被引量：5
- 2005年
- 目的 观察不同浓度骨形态发生蛋白 2 (bonemorphogeneticprotein 2 ,BMP 2 )和地塞米松 (dexamathasone,DEX)对体外培养的人成骨细胞增殖、分化的影响。方法 成人髂骨松质骨胰蛋白酶消化后获得成骨细胞进行培养 ,用倒置显微镜进行活体观察并做碱性磷酸酶 (ALP)、骨钙素 (OCN)、Ⅰ型及Ⅲ型胶原染色观察成骨细胞生物学特征。培养的细胞加入不同浓度BMP 2(1、10、10 0、10 0 0ng/ml)和DEX(10 8、10 7、10 6mol/L)作用 4 8h后 ,用MTT法检测细胞增殖 ,同时测定细胞裂解液中ALP活性和OCN含量。结果 体外培养的成人成骨细胞可合成碱性磷酸酶、骨钙素、Ⅰ型胶原 ,并形成钙化结节。 3个浓度的DEX在 4 8h后均能刺激成骨细胞的增殖 ,增加成骨细胞ALP活性和OCN含量 ,4个浓度BMP 2在 4 8h后对成骨细胞无增殖作用 ,但都能增加ALP活性和OCN含量。结论 地塞米松促进体外培养的成人成骨细胞增殖和分化 ;短期作用下 ,BMP 2对成骨细胞的增殖无明显作用 。
- 温学红郭若霖程瑞芳张福江谈志龙叶伟胜王学谦
- 关键词：BMP-2人成骨细胞地塞米松DEXALP活体观察
- 从骨髓和脐血造血干细胞中诱导成骨样细胞
- 2006年
- 郭若霖贾雷鸣程瑞芳温学红谈志龙王学谦
- 关键词：脐血造血干细胞成骨样细胞骨髓腔CD34^+细胞体外培养扩增
- 从脐血和骨髓中诱导成骨样细胞的体外研究
- 2004年
- 目的:探讨脐血和骨髓单个核细胞(monocytes,MNC)体外培养过程中的生长特性及诱导贴壁细胞向成骨细胞分化。方法:分离脐血和骨髓MNC,按培养基不同分成3组:分别为MesencultTM无血清培养基。CellGRO培养基+100mL/L胎牛血清。DMEM/F12培养基+100mL/LFBS。体外培养以获得贴壁细胞。观察不同培养条件下细胞扩增的效果。获得的贴壁细胞培养基中加入地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸,诱导细胞向成骨细胞分化。检测诱导后细胞成骨细胞标志物碱性磷酸酶、I型胶原和骨钙素的表达。结果:脐血和骨髓MNC在含有血清的培养基中可以获得更多的贴壁细胞。骨髓MNC贴壁细胞形态均一,呈典型的成纤维细胞样,而脐血贴壁细胞未获得典型的成纤维细胞样细胞,混有大量的圆形细胞。骨髓中获得的细胞可以持续传代10代以上仍保持良好的增殖状态;脐血贴壁细胞最多可以传代2次,细胞总数和纤维样细胞均逐代减少。诱导后的脐血和骨髓细胞均呈碱性磷酸酶阳性,免疫组化染色显示I型胶原和骨钙素表达阳性。结论:骨髓MNC体外培养可以获得典型的间充质干细胞且可以持续多代扩增,向成骨细胞诱导后,形态和标志物检测都呈典型的成骨细胞样。脐血MNC体外培养可获得贴壁细胞,但不呈间充质干细胞样,向成骨细胞诱导后,虽形态与成骨细胞不相似。
- 郭若霖温学红程瑞芳王学谦
- 关键词：胎血骨髓成骨细胞
- 人骨形成蛋白2和地塞米松对不同来源成骨细胞的作用被引量：1
- 2004年
- 目的 :观察不同浓度的人骨形成蛋白2(BMP_2)和地塞米松 (DEX)对3种来源成骨细胞的作用 ,并比较其特性。方法 :体外培养胰酶消化法所得的正常成人的成骨细胞、成骨样细胞系和由骨髓单个核细胞 (MNC)经DEX诱导7d后所得的成骨细胞 ,经不同浓度的BMP_2和DEX处理 ,观察细胞形态 ,并进行MTT试验和测定细胞裂解液的碱性磷酸酶 (ALP)。结果 :对正常成人的成骨细胞 ,BMP_2处理48h ,72h对第4代和第8代的细胞无明显促增殖和分化作用 ;DEX作用48h和72h促第4代细胞增殖且表达ALP明显增加 ,DEX浓度为10-8 mol/L时其促增殖和分化的效果最佳 ,DEX对第8代细胞无明显作用。对成骨样细胞系BMP_2促增殖作用不明显 ,DEX处理48 ,72h后明显促其增殖 ;BMP_2及DEX作用72h后ALP表达明显增加 ,当作用于源自骨髓MNC的成骨细胞48 ,72h均促其增殖和分化。结论
- 程瑞芳郭若霖温学红谈志龙王学谦
- 关键词：人骨形成蛋白2地塞米松成骨细胞体外培养
- 骨髓间充质干细胞经不同时间成骨细胞诱导后细胞性质比较被引量：1
- 2005年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞经成骨细胞诱导不同时间后的细胞性质。方法成人骨髓分离单个核细胞(MNC),体外培养获得间充质干细胞(MSC),传至第4代后加入地塞米松(DEX)、抗坏血酸和β-甘油磷酸,诱导成骨分化。诱导7d和14d后的细胞与正常成人成骨细胞分别加入不同浓度骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和DEX,48h后检测细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素(OCN)的含量。结果BMP-2和DEX对诱导7d后的细胞有明显的刺激增殖和ALP活性的作用;对诱导14d后的细胞,BMP-2和DEX都不能刺激细胞增殖和ALP活性,但OCN含量明显增加。正常成人成骨细胞对BMP-2和DEX作用的反应与诱导14d的成骨样细胞基本一致,但其OCN绝对含量明显高于MSC来源的成骨细胞。结论骨髓MSC向成骨诱导7d和14d后细胞分化程度不同。诱导时间在MSC的成骨分化中是一个非常关键的因素,但其机制和最佳诱导时间尚需进一步研究。诱导14d后的MSC的成骨活性低于正常成人成骨细胞。
- 郭若霖贾雷鸣温学红程瑞芳胡永成张福江谈志龙王学谦
- 关键词：间充质干细胞成骨细胞
