国家自然科学基金(30400373)
- 作品数：6 被引量：30H指数：4
- 相关作者：贾蓓黄文祥黄爱龙李崇智刘成伟更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学自贡市第四人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 带GFP的启动子鉴定质粒的构建及在HCV启动子鉴定中的应用
- 2005年
- 目的:利用已有质粒构建带GFP报告基因的启动子鉴定质粒,并用此质粒鉴定丙型肝炎病毒5非翻译区(HCV 5'- UTR)启动基因表达的活性。方法:用限制性内切酶将质粒pEGFP-N1上的EGFP基因片断切下,与用相同酶切去除荧光素酶基因片断的PGL3 enhancer质粒大片断连接,得到带GFP的启动子鉴定质粒pEGFP enhancer HCV 5’-UTR片断用PCR方法获得,插入pEGFP enhancer的多克隆区,构建HCV 5’-UTR驱动GFP表达质粒。应用脂质体转染技术转染HepG2细胞并观察荧光。结果:成功构建带GFP报告基因的启动子鉴定质粒,并在此基础上构建了HCV 5’-UTR启动GFP表达的质粒。前者转染HepG2细胞后,几乎无GFP表达,而后者观察到较强的绿色荧光。结论:该实验构建的带GFP报告基因的启动子鉴定质粒本底表达低,可用于真核启动子的鉴定。HCV 5’-UTR可以启动报告基因的表达。
- 陈维贤张君张娟张秉祥唐霓黄爱龙
- 关键词：启动子丙型肝炎病毒绿色荧光蛋白
- 细菌多药外排系统及其研究方法的进展(英文)被引量：6
- 2007年
- 位于细菌细胞膜上的多药外排泵可将多种结构无关药物排出,本文综述了细菌主要外排泵包括初级和次级转运系统的分子生物学特征及外排蛋白结构与药物识别和转运上的关系;同时总结了对外排蛋白进行结构与功能关系研究的主要的方法,包括定点诱变、螺旋空间排列和结晶等。
- 贾蓓黄文祥黄爱龙
- 关键词：细菌外排泵多药耐药研究方法
- 金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因qacA的流行病学研究被引量：7
- 2009年
- 目的了解重庆医科大学附一院近年临床分离的金葡菌中,耐消毒剂基因qacA的流行情况,从而指导临床抗菌药物、消毒剂的合理使用。方法选取有代表性的1价和2价化合物,检测126株金葡菌的MIC,阳性株用PCR法检测qacA基因型,采用CLSI推荐的30μg头孢西丁纸片法进行MRSA鉴定。结果临床分离的126株金葡菌中,12株qacA基因型呈阳性(阳性率为9.5%),52株为MRSA(其中qacA基因阳性率为17.3%)。结论临床分离的金葡菌中,qacA基因携带率较高。
- 周庭权黄文祥贾蓓章成
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
- 金葡菌主动外排蛋白QacAα-螺旋13氨基酸的功能研究被引量：4
- 2009年
- 目的评价金葡菌多药耐药主动外排蛋白QacAα-螺旋13位于细胞膜侧的氨基酸对于底物转运的重要性。方法用半胱氨酸定点诱变的方法突变E407,S408,M409,Y410,D411和L412,测序确定突变后,测定最低抑菌浓度(MIC)和进行运输试验比较突变前后细菌转运功能的变化。结果MIC分析表明突变株E407,Y410和D411耐药性显著降低,运输实验结果与MIC结果一致,提示这3株突变株失去对底物的转运能力。结论QacA蛋白α-螺旋13上的3个氨基酸可能与底物的结合和转运功能密切相关。
- 贾蓓魏晓宇常李军黄文祥黄爱龙
- 关键词：金葡菌
- 临床常见革兰阴性细菌的分布及耐药性分析被引量：12
- 2008年
- 目的了解院内革兰阴性细菌的分布及耐药性特点。方法收集本院2004年7月～2006年7月各类临床标本分离出的革兰阴性细菌，采用K-B纸片琼脂扩散法进行药敏试验，分析其临床分布及耐药性。结果共分离出1271株革兰阴性细菌，以大肠埃希菌、克雷伯菌属和铜绿假单胞菌为主要病原菌，标本主要分布于痰、咽拭子和尿液中，病区主要集中于ICU室、神经外科和肺科。超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）在大肠埃希菌、克雷伯菌属和变形杆菌属的检出率分别为38．4％、31．7％和25．5％。亚胺培南和美罗培南对肠杆菌科细菌、产ESBLs菌株和不动杆菌属的抗菌活性最强，耐药率为0-5．6％，铜绿假单胞菌对两药的耐药率为29．8％和27．2％；嗜麦芽窄食单胞菌对两药物高度耐受，耐药率均为95．7％，但对环丙沙星、头孢哌酮／舒巴坦和替卡西林／克拉维酸较敏感。结论大肠埃希菌、克雷伯菌属和铜绿假单胞菌为本院最常见革兰阴性细菌，亚胺培南和美罗培南对除嗜麦芽窄食单胞菌外的其他革兰阴性细菌具有较好的抗菌活性，其他抗菌药物的抗菌活性相对较低。
- 刘成伟李文桂贾蓓郑行萍李崇智余登高
- 关键词：革兰阴性细菌耐药性
- Role of TMS5： staphylococcal multidrug-efflux protein QacA被引量：1
- 2008年
- 背景：QacA，调停的一个主要出口商到许多 antiseptics 和 disinfectants 的葡萄球菌 aureus 的 multidrug 抵抗，拥有 14 个 alpha 螺旋状的 transmembrane 片断(TMS ) 的拓扑学。我们的学习试图决定氨基酸残余的重要性和拓扑学在并且 flanking TMS5 的细胞质的结束。方法：指导地点的傻瓜发育不全被用来变异 5 残余包括 L146， A147， V148， W149 和 S150，进半胱氨酸。最小的禁止的集中(MIC ) 和运输试金与或没有 N-ethylmaleimide (NEM ) 被执行分析这些异种的功能。结果：所有异种显示出可比较的蛋白质表示层次。MIC 分析建议变异的 W149C 显示出低抵抗层次到这些药，但是在 L146， A147， V148，和 S150C 的变化在抵抗水平上有很少或没有效果。并且 fluorimetric 运输试金的结果与 MIC 分析的那些一致，那是说， W149C 不允许运输到要测试的底层，当另外的异种保留了重要运输能力时。有 Fluorescein-NEM 的不同变异的蛋白质的反应表明变异的 L146C 与 NEM 是高度反应的；W149C 和 S150C 异种是中等反应的；A147C 是恰好反应的， V148C 没显示出反应。结论：学习识别了那残余 W149 和位于接口的 S150 水：是的类脂化合物连接机能上地重要的残余，可能在底层绑定和 QacA 的易位包含了。
- JIA BeiZHOU Ting-quanHUANG Ai-longHUANG Wen-xiang
- 关键词：葡萄球菌药物过敏
