博士科研启动基金(XJ201109)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：邹多宏朱思姮周健何家才徐丽更多>>
- 相关机构：安徽医科大学安徽医科大学附属口腔医院蚌埠医学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 突变型HIF-1α慢病毒载体的构建及其在常氧条件下的抗降解作用被引量：3
- 2012年
- 目的构建点突变型低氧诱导因子-1α(HIF-1α)慢病毒载体,并检测其在常氧条件下的抗降解作用。方法根据人的HIF-1α基因(NM_001530),对其全长编码区序列进行如下定点突变:803位天冬酰胺突变成丙氨酸,564位脯氨酸突变成丙氨酸,402位脯氨酸突变成丙氨酸。设计并合成3对引物用以导入变异点。PCR扩增序列片段,然后将目的基因PCR产物连接到载体pEGFP-N1上,构建真核表达载体pEGFP-N1-mutant/HIF-1α。PacI和AscI酶切鉴定后,用LR重组系统将目的序列重组到慢病毒载体plenti6.3V5-DEST上,构建慢病毒载体Lenti-MT(突变型HIF-1α)及Lenti-WT(野生型HIF-1α)。将Lenti-MT、Lenti-WT及Lenti-LacZ(对照组)转染293T细胞后,采用qPCR检测目的基因的表达。转染后的细胞在低氧条件下(2%O2)培养48 h,然后常氧条件下培养48 h,采用Western blot检测HIF-1α蛋白在不同氧浓度条件下的表达情况。结果与WT测序结果对比表明MT已被完成。酶切结果证明已成功构建pEGFP-N1-mutant/HIF-1α。qPCR结果显示Lenti-MT组目的基因表达高于Lenti-WT组,且差异具有统计学意义。低氧条件下,HIF-1α在WT组和MT组中的蛋白表达差异无统计学意义。但常氧条件下培养48 h后,WT组目的蛋白的表达显著下降,而MT组变化不大。上述结果表明MT具有明显的抗降解作用。结论成功构建了突变型HIF-1α,慢病毒载体在常氧条件下,Lenti-MT具有显著的抗降解作用。
- 王彦梅何家才邹多宏朱思姮
- 关键词：低氧诱导因子-1Α基因突变慢病毒载体
- 口腔临床医学硕士研究生就业问题的调查与分析
- 2012年
- 目的在分析近5年安徽医科大学口腔医学院口腔临床医学硕士毕业生就业状况的基础上，调查在读硕士生对未来就业的选择及心理压力的变化，了解其变化趋势，为开展硕士生就业指导提供依据。方法汇总口腔医学院近5年（2006—2010年）毕业的口腔临床医学硕士就业状况，对66名在读口腔临床医学硕士生（2008—2010级）进行了就业选择及心理压力的匿名问卷调查。结果毕业生近5年在省级三甲医院的就业率下降明显，而在市级三甲医院就业率逐年上涨。在读硕士生希望到市级三甲医院工作的人数减少，愿意到非三甲医院工作及继续读博的人数在增加。学生普遍存在心理压力且不能有效释放。结论随着口腔临床医学硕士毕业生就业形势的变化，在读硕士生对未来就业的选择及心理压力也发生了相应的变化。了解这些变化，可以有针对性地提出解决问题的有效途径；同时在口腔临床医学硕士生的培养方式及就业指导方面也需相应调整。
- 邹多宏朱思姮张凯韩伟何家才周健
- 关键词：口腔临床医学硕士研究生就业问题
- 干细胞因子在大鼠下颌骨缺损修复中的表达研究被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨在SD大鼠下颌骨临界性骨缺损(critical size bone defect,CSD)与自愈性骨缺损修复过程中,各时相点干细胞因子(stem cell factor,SCF)的表达情况。方法:①分别在36只SD大鼠双侧下颌骨的下颌角部制造临界性骨缺损(直径5 mm)和自愈性骨缺损(直径2 mm)模型,实验动物分为6组,在术后第1、3、5、7、14、21天分别处死;②利用免疫组织化学方法检测骨缺损区各时相点SCF的表达情况;③利用Western印迹法检测骨缺损区各时相点SCF存在与否,并进行半定量分析。结果:成功构建了大鼠双侧下颌骨的临界性骨缺损和自愈性骨缺损模型。免疫组织化学结果显示,骨缺损愈合的各时相点SCF均有较高的表达,但SCF在临界性骨缺损组各时相点的表达,均低于自愈性骨缺损组。结论:SCF在骨缺损修复中发挥重要的作用。
- 徐丽朱思姮邹多宏窦晓晨周健
- 关键词：干细胞生长因子
- 定量时间空间控制在生长因子促血管形成中的作用被引量：1
- 2016年
- 低血性疾病危害性大,致死、致残率高,已成为临床医学面临的难题之一,而血运重建对低血性疾病有明显疗效。血管发生和成熟需要多种血管生长因子在特定的时间空间和质量浓度下共同作用,正常的脉管系统需要血管内皮生长因子(VEGF)表达在时间和空间上的精确控制。在不同的时间和特定的微环境下,同一种生长因子的质量浓度亦不相同,也起着不同的作用,例如转化生长因子-β1、VEGF受体和低氧诱导因子等。在血管生成和组织功能重建过程中,血管新生的方向性受内皮细胞和平滑肌细胞定向迁移的影响,分支形态发生也受VEGF空间梯度的高度调节,体现出VEGF表达的空间分布特性。血管生长因子的时间空间控制需建立组织内细胞因子的定量标准,从而精确地控制损伤组织部位血管形成;寻找合适的传递系统,使组织内生长因子达到特定的部位。了解血管生长因子的时间、空间特性对新生血管的构建具有重要的作用,合理利用血管生长因子的这一特性,将为治疗血管性疾病提供更多的选择。
- 徐孟丹邹多宏
- 关键词：血管生长因子血管生成
- 点突变型HIF-1α诱导犬骨髓基质干细胞骨向分化的研究
- 2012年
- 目的:检测点突变型HIF-1α对犬骨髓基质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)骨向分化的作用。方法:采用LR重组系统构建慢病毒载体Lenti-WT(wild HIF-1α)、Lenti-MT(mutant HIF-1α)及对照组Lenti-LacZ。分别用Lenti-LacZ、Lenti-WT及Lenti-MT转染犬BMSCs,以LacZ组为对照,成功转染后,分别在0、1、4、7、14及21 d提取总RNA和蛋白质,通过RT-PCR和Western印迹检测目的基因在体外常氧条件下对BMSCs成骨因子表达的调控。将带有目的基因的BMSCs按2×105/孔接种至6孔板,分别于14 d和21 d,运用茜素红染色(alizarin red-S staining,ARS)检测其钙结节的表达。采用SPSS10.0软件包对数据进行统计学分析。结果:当MOI=9时,BMSCs的转染效率达90%以上。目的基因转染后第4天,BMSCs的成骨因子在mRNA和蛋白水平表达显著提高,14～21 d时达到高峰,并维持在高表达状态(P<0.05)。ARS结果表明,目的基因在常氧条件下可诱导BMSCs向成骨方向分化。结论:体外常氧条件下,突变型HIF-1α能够稳定表达且保持高度活性,Lenti-MT可显著提高犬BMSCs的成骨活性。
- 俞建英朱思姮邹多宏
- 关键词：HIF-1ΑBMSCS骨生成
