您的位置： 专家智库 > >

国家自然科学基金(30970625)

作品数：8 被引量：5H指数：1
相关作者：吴传芳秦岭田平平杨洁黄迎彬更多>>
相关机构：四川大学成都华高瑞甜科技有限公司更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 8篇生物学

主题

  • 5篇蛋白
  • 4篇免疫
  • 3篇转录
  • 2篇蛋白相互作用
  • 2篇转录调控
  • 2篇相互作用
  • 2篇免疫共沉淀
  • 2篇RNA
  • 2篇SINE
  • 2篇P-TEFB
  • 1篇蛋白纯化
  • 1篇蛋白复合体
  • 1篇蛋白激酶
  • 1篇蛋白激酶C
  • 1篇亚基
  • 1篇遗传学
  • 1篇银染
  • 1篇印迹
  • 1篇原核表达
  • 1篇人源

机构

  • 8篇四川大学
  • 5篇成都华高瑞甜...

作者

  • 8篇吴传芳
  • 5篇秦岭
  • 4篇田平平
  • 3篇杨洁
  • 2篇任浙丹
  • 2篇陈斌
  • 2篇赵长宏
  • 2篇黄迎彬
  • 1篇兰洋
  • 1篇于春雷
  • 1篇雷霆钧
  • 1篇刘涛

传媒

  • 8篇四川大学学报...

年份

  • 4篇2014
  • 2篇2013
  • 2篇2011
共 8 条 记 录，以下是 1-8
全选 清除 导出
排序方式：
胚胎干细胞中DPPA2和DPPA4蛋白相互作用的研究
2013年
本文分别构建了小鼠胚胎干细胞的带FLAG多肽标签的DPPA和带HA多肽标签的DPPA4蛋白真核表达载体.将该质粒转入小鼠成纤维细胞HEK293中进行细胞体内表达,并利用免疫印记和免疫共沉淀技术证明了DPPA2和DPPA4蛋白在细胞内可以相互作用.因此,提出了在胚胎干细胞的自我更新和分化等过程中,DPPA2和DPPA4蛋白相互作用的结论.
杨洁雷霆钧田平平吴传芳欧阳劲秦岭
关键词：胚胎干细胞免疫印记免疫共沉淀
Star-PAP蛋白的纯化分析及其限定性因子的分离
2014年
克隆并构建了Star-PAP的表达载体,然后将该载体转染HEK293细胞,经纯化得到了重组的Star-PAP蛋白.以细胞总RNA和体外转录的U6snRNA为底物,对纯化到的Star-PAP的TUTase活性进行了分析.结果显示重组的Star-PAP能够对细胞总RNA以及U6snRNA进行体外尿苷化修饰,表明纯化到的Star-PAP具有良好的TUTase活性.此外,使用HPLC分离得到了具有U6snRNA底物特异性的细胞核组分.该组分除了含有StarPAP外,还含有一种未知蛋白,该未知蛋白可能就是赋予Star-PAP底物特异性的限定性因子.
于春雷田平平吴传芳欧阳劲秦岭
关键词：SNRNATUTASE
HEXIM1蛋白与Alu SINE RNA相互作用的研究被引量：1
2014年
为了探讨Alu SINE RNA和HEXIM1蛋白之间是否存在相互作用.本实验构建了带有FLAG标签的HEXIM1真核表达载体,转染人胚肾293(HEK293)细胞,做anti-FLAG的RNA免疫共沉淀(RIP)后运用免疫印记和逆转录PCR(reverse transcription PCR,RTPCR)等方法检测.证明了Alu SINE RNA和HEXIM1蛋白之间存在相互作用,表明Alu SINE RNA和HEXIM1蛋白共同影响基因转录调控,以及细胞在应对外界刺激时能及时在基因水平做出有效反应的可能.
田平平吴传芳欧阳劲秦岭
关键词：ALUSINERNA免疫印迹基因转录调控
HEK293细胞中CDK10蛋白复合体的分离纯化被引量：1
2013年
通过半定量RT-PCR(reverse transcriptase PCR)检测了CDK10在人胚胎肾细胞(HEK293)、人宫颈癌细胞(HeLa)、人乳腺癌细胞(MCF7)中的表达水平,克隆并构建了全长CDK10基因的真核表达质粒.在HEK293中筛选得到了稳定表达CDK10-Flag的细胞系,大规模培养该细胞系,分离细胞核、细胞质提取物,在非变性条件下利用anti-Flag抗体免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP),银染及蛋白质免疫印迹检测结果表明分离到CDK10蛋白及与其可能结合的其它蛋白,为质谱(Mass Spectrum,MS)鉴定提供材料.
赵长宏陈斌吴传芳欧阳劲秦岭
关键词：蛋白纯化银染
果蝇P-TEFb与人源P-TEFb组成亚基间相互作用的研究被引量：1
2014年
本实验克隆了果蝇与人源P-TEFb(positive transcription elongation factor)组成亚基CycT、CDK9C末端分别带有Flag、HA标签的真核表达质粒,并在293细胞中验证了克隆所得质粒的有效表达.使用免疫共沉淀方法证实了两个种属P-TEFb组成亚基间结构的相似性;借助HIV-luciferase与Rellina的双荧光报告系统证实了两个种属P-TEFb组成亚基间功能上的相似性.
陈斌吴传芳欧阳劲秦岭
关键词：P-TEFBFLAG免疫共沉淀
甲基化CpG结合结构域蛋白的原核表达及应用
2014年
本文构建了甲基化CpG结合结构域(MBD)蛋白的原核表达质粒,并表达了GSTMBD融合蛋白,采用GST柱对该融合蛋白进行纯化.体外pull-down实验发现,GST-MBD融合蛋白能够与小鼠胚胎成纤维细胞MEF中oct4基因的启动子DNA结合,验证了该蛋白的体外生物活性.利用相同的实验方法,发现GST-MBD融合蛋白能够与MEF细胞中inhbb基因的启动子区结合,而不能与小鼠胚胎干细胞R1中的inhbb基因的启动子区DNA结合,同时采用半定量PCR方法检测到inhbb基因在R1细胞中高表达,而在MEF细胞中不表达,表明inhbb基因受到DNA甲基化的调控.
刘涛兰洋吴传芳
关键词：表观遗传学
蛋白激酶C对转录延伸正调节因子b(P-TEFb)的影响被引量：1
2011年
本文探讨了PKC的4种亚型α、βⅡ、γ和λ对P-TEFb各蛋白组分的表达影响.成功构建了带有HA标签的pcDNA3.1-PKC的各亚型真核表达载体,并转染HEK293细胞株,用Western bolt检测其表达情况,发现这四种PKC亚型在细胞中表达良好。将PKCβⅡ或者PKCλ转染进入HEK293细胞株,发现其可使CDK9和Cyclin T蛋白表达量升高;但在细胞中高表达PKCα和PKCγ,对P-TEFb各组分表达量没有影响.表明PKC可通过提高P-TEFb的组分表达量,从而上调某些基因的表达.
任浙丹黄迎彬杨洁赵长宏田平平吴传芳
关键词：转录调控
B2 SINE RNA和HEXIM1蛋白相互作用的研究被引量：1
2011年
构建了带FLAG多肽标签的hHEXIM1(HMBA-inducible protein 1)蛋白真核表达载体,在人胚胎肾细胞(human embryonic kidney 293 cells,HEK293 cells)中检测蛋白表达正确后,将该质粒转入小鼠的成纤维细胞(NIH3T3细胞)中,进行anti-FLAG的免疫沉淀(im-munoprecipitation,IP)实验.之后用半定量逆转录PCR(reverse transcriptase PCR,RT-PCR)的方法证明了hHEXIM1蛋白是可以和B2 SINE RNA相互作用的.并由此提出了关于B2SINE RNA和HEXIM1蛋白共同参与调控基因表达调控的新假设.
黄迎彬任浙丹杨洁吴传芳
关键词：B2RNA免疫沉淀逆转录PCR相互作用
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0