国家自然科学基金(81271088)
- 作品数：9 被引量：30H指数：4
- 相关作者：向明亮沈晨凌吴皓马衍胡海霞更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属新华医院上海交通大学北京大学第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CD44基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的构建CD44基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并在下咽癌FaDu细胞株上鉴定其沉默效率,为研究目的基因沉默后下咽癌肿瘤细胞致瘤性的改变提供稳定可靠的载体。方法针对目的基因CD44mRNA的序列,按照RNA干扰序列的设计原则,设计、合成4个CD44基因特异性小分子干扰iRNA(small interference RNA,siRNA)靶点,将其合成短发卡hRNA(short hairpin RNA,shRNA)并退火成双链DNA,与慢病毒载体重组形成shRNA表达载体,利用PCR和测序鉴定获取正确克隆。将筛选出的最有效重组载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞并测定病毒滴度。随后将其感染下咽癌FaDu细胞株细胞,采用Real-time PCR检测靶基因的沉默效率。结果对LV-CD44-shRNA载体进行双酶切鉴定,证实短发夹RNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入序列正确,CD44基因RNA干扰重组慢病毒载体经293T细胞成功包装后,其病毒滴度为8E+8TU/ml。RNA干扰下咽癌FaDu细胞CD44基因后,CD44 mRNA水平显著下降,干扰效率大于70%。结论成功构建了CD44基因的shRNA慢病毒表达载体,能够在细胞水平有效沉默靶基因,为CD44基因沉默后下咽癌肿瘤细胞生物学改变的研究打下了较坚实的基础。
- 沈晨凌向明亮聂琛胡海霞马衍吴皓
- 关键词：下咽癌CD44RNA干扰慢病毒
- 听觉剥夺后中枢交叉模式重组与人工耳蜗植入术后皮层重构被引量：3
- 2018年
- 听觉神经系统的发育在出生后有一快速增长时期，若在这期间没有得到足够的感觉（听觉）刺激，则会对听觉中枢的发育和发展产生严重的负面影响。如果在关键期不能解除听觉剥夺的话，听觉及视觉皮层将会发生交叉模式重组和皮层功能重新定位。植入人工耳蜗后，特别是在低龄期的干预，可使听觉传导通路和皮层得到刺激和兴奋，持续的信号输入可使大脑皮层发生重构，适应和重建听觉功能。通过多重感觉模式的协同效果，可使言语和语言能力得到发展。
- 魏朝刚刘玉和金昕
- 关键词：听觉丧失听觉皮质神经元可塑性耳蜗植入术
- 腮腺基底细胞腺瘤22例临床病例分析被引量：7
- 2015年
- 目的分析腮腺基底细胞腺瘤的发病情况、临床表现以及手术疗效,寻找其特点,以期与其他腮腺良性肿瘤相鉴别。方法回顾分析本科2000年10月～2013年4月经术后病理确诊且资料保存完整的22例腮腺基底细胞腺瘤患者的临床资料。结果 22例患者中,男性10例、女性12例;中位年龄56岁。双侧发病1例。主要临床表现为无痛性渐大肿块,多见于耳垂下区,其中累及腮腺深叶9例。肿瘤大小为1～4 cm,平均为（2.00±0.84）cm。影像学征象为以均质为主的实质性、边界清、圆形肿块。22例患者均接受手术治疗,按肿瘤部位不同,手术方式为腮腺浅叶切除术或腮腺全切除术。术后随访0.5～11年,出现轻度面神经功能受损者4例,HBⅡ级,其中3例半年后恢复为HBⅠ级,未见其他并发症。随访过程中所有患者均未见肿瘤复发或恶变。结论腮腺基底细胞腺瘤临床少见,临床表现及影像学检查对其鉴别诊断有一定帮助,确诊须依靠病理结果。手术切除可获得较好疗效,预后良好。
- 张维文吕静荣向明亮
- 关键词：腮腺基底细胞腺瘤
- 儿童分化型甲状腺癌29例临床病例分析被引量：9
- 2015年
- 目的 分析儿童分化型甲状腺癌的临床表现、治疗方法及其结果,探讨其最佳治疗方式.方法 对上海交通大学医学院附属新华医院耳鼻咽喉头颈外科1998年1月-2014年7月收治的14岁以下的29例儿童分化型甲状腺癌的临床表现、治疗方法及其结果等进行回顾性分析.结果 29例患儿中,以“发现颈部肿块”为主诉者27例;单侧甲状腺癌16例,双侧甲状腺癌13例;甲状腺实质性肿块伴多发点状钙化者21例（72.4％）;颈淋巴结肿大者24例（82.8％）,其中仅患侧肿大者9例（37.5％）,双侧均肿大者15例（62.5％）.我院初治患儿20例中,T2及其以上者18例,颈淋巴结肿大者16例.行甲状腺患侧腺叶＋峡部切除术者2例,甲状腺全切除术者18例,其中1例气管壁受肿瘤侵犯者同时行气管部分切除术;同时行颈清扫术者16例.在外院接受过原发灶手术的9例患儿中,术后出现颈淋巴结肿大者8例,伴发肺转移者6例;行颈清扫术5例,残留甲状腺切除术＋颈清扫术4例.术后行^131I治疗者总共27例.术后随访率100％,随访时间平均6年10个月（0.5 ～16.0年）,无死亡病例发生,亦无复发、局部及远处转移.结论 儿童分化型甲状腺癌侵犯性明显强于成人,甲状腺全切除术＋颈清扫术辅以术后^131I治疗可作为其基本治疗方案.
- 王龙昊向明亮叶斌胡海霞沈晨凌马衍焦宇吴皓
- 关键词：甲状腺肿瘤甲状腺切除术颈淋巴结清扫术儿童
- Efr3a敲减减轻耳蜗螺旋神经元退化变性的研究
- 目的:探索Efr3a基因敲减能否减轻小鼠耳蜗螺旋神经元及耳蜗神经末梢的退化变性,并初步探索其作用机制。方法:首先以8-10周Efr3a基因敲减(Efr3a KD)及其同窝野生型(WT)小鼠为研究对象,采用卡那霉素联合呋塞...
- 胡海霞
- 关键词：螺旋神经元神经营养因子
- 文献传递
- CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞分子标志物的价值被引量：4
- 2013年
- 目的探讨CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞分子标记物的价值。方法应用流式细胞仪检测下咽癌FADU细胞系中CD44的表达;采用免疫磁珠分选技术(MACS)分选CD44+细胞,并用流式细胞仪检测其纯度;运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测CD44+、CD44-细胞的体外增殖能力,将相同数量级(1×106、1×105)的CD44+、CD44-细胞分别注射于雄性非肥胖糖尿病型/重症联合免疫缺陷(non-obese diabetic/severe combined immunodefi ciency,NOD/SCID)小鼠皮下,观察其体内致瘤能力的差异。结果下咽癌FADU细胞系中CD44+细胞占(21.1±1.56)%,免疫磁珠分选后的CD44+细胞纯度达(99.4±0.29)%。体外增殖能力研究显示CD44+细胞增殖速度明显快于CD44-细胞。NOD/SCID鼠体内致瘤实验结果显示:1×105CD44+细胞致瘤率为12.5%(1/8),1×105 CD4 4-细胞致瘤率为0(0/8);1×106 CD44+细胞致瘤率为100%(8/8),1×106 CD4 4-细胞致瘤率为5 0%(4/8);相同数量级的CD44+与CD44-两组细胞致瘤率差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,CD44+细胞组比CD44-细胞组更早成瘤,潜伏期明显缩短。CD44+细胞组所致肿瘤体积平均为(2017.81±538.50)mm3,而CD44-细胞组所致肿瘤体积平均为(1153.25±503.18)mm3,两组差异具有统计学意义(t=2.67,P<0.05)。结论下咽癌肿瘤中CD44+细胞比CD44-细胞具有更强的体外增殖能力和体内致瘤能力,提示肿瘤干细胞可能存在于CD44+肿瘤细胞内,CD44可作为筛选下咽癌肿瘤干细胞的一个重要分子标记物。
- 沈晨凌向明亮聂琛胡海霞马衍吴皓
- 关键词：肿瘤干细胞分子标记物CD44下咽癌
- 支持细胞在内耳发育及耳蜗毛细胞损伤后的作用
- 2015年
- 耳蜗毛细胞损伤后如何再生及恢复其听功能是现今耳科学研究的热点问题之一。目前国内外的研究热点为调控参与内耳毛细胞调控的基因、干细胞移植、生长因子诱导、内耳前体细胞向毛细胞分化等。对于螺旋器中支持细胞在内耳发育、耳蜗毛细胞损伤后保持听觉上皮完整以及毛细胞再生中的作用关注较少。本文就支持细胞在内耳发育、毛细胞损伤后的作用等研究做一综述。
- 叶斌向明亮
- 关键词：CELLS
- 采用改良L型切口行甲状腺癌颈清扫术被引量：1
- 2014年
- 目的探索更加美观隐蔽的甲状腺癌颈清扫术手术切口。方法将2009年1月~2012年12月在我院接受颈清扫术的72例甲状腺癌颈淋巴结转移患者采用改良L型切口进行手术。其中22例患者行甲状腺全切术+患侧I~Ⅵ区颈清扫术;另50例患者单纯行颈清扫术,清扫范围主要为I^V区淋巴结。颈清扫切口行于斜方肌表面发际前缘自乳突尖后向下行至锁骨上约1.5cm处循皮纹横行向前至颈前中部或与原甲状腺手术切口相连。其中根治性颈清扫术4例,功能性颈清扫术68例。结果72例患者共行83侧颈清扫术,均行改良L型切口。手术过程均顺利,术野暴露满意,手术时间为128~196min,平均145.3±23.8min。共11例患者出现术后并发症,其中颈部积液6例、副神经损伤3例、乳糜漏2例。无皮瓣坏死、切口感染等并发症发生。术后患者颈部切口瘢痕隐蔽,外观影响小。术后随访6个月~4年,淋巴结复发率为0.0%。结论采用改良L型切口行颈清扫术暴露满意,手术并发症少,术后切口隐蔽,是甲状腺癌颈清扫术一种较为理想的手术入路。
- 胡海霞向明亮吴皓聂琛沈晨凌马衍吕静荣
- 关键词：切口甲状腺癌颈淋巴结清扫术
- 卡那霉素联合呋塞米致聋小鼠耳蜗螺旋神经节细胞的退化变性及其EFR3A蛋白的表达被引量：4
- 2014年
- 目的 观察小鼠耳毒性药物损伤毛细胞后耳蜗螺旋神经节细胞的退化变性以及该过程中EFR3A蛋白的表达变化.方法 48只8周龄C57BL/6J小鼠采用卡那霉素联合呋塞米单次注射给药破坏耳蜗毛细胞,给药后1、5、15、30、60 d时采用免疫荧光染色、半薄切片甲苯胺蓝染色以及透射电镜等手段观察耳蜗毛细胞损伤和螺旋神经节的退化变性程度,同时通过免疫荧光和蛋白印迹等技术检测螺旋神经节细胞退化变性过程中EFR3A蛋白的表达变化.结果 联合应用卡那霉素和呋塞米可明显损伤C57BL/6J小鼠耳蜗毛细胞,毛细胞破坏后,螺旋神经节细胞出现退化变性.螺旋神经节细胞超微结构的损伤改变最早开始于给药后5d,其数量下降开始于给药后15 d.与对照组相比,EFR3A蛋白表达的明显增强出现在给药后5d,给药后15 d时其表达下降并接近正常,之后未再出现明显变化.结论 小鼠耳蜗毛细胞损伤后螺旋神经节细胞发生退化变性,其EFR3A蛋白表达升高,两者在时间上高度重合,提示EFR3A蛋白在耳蜗毛细胞破坏后螺旋神经节细胞的退化变性过程中可能发挥一定作用.
- 聂琛向明亮沈晨凌胡海霞叶斌吴皓
- 关键词：螺旋神经节神经变性膜蛋白质类小鼠
- 儿童甲状腺癌诊断治疗进展被引量：1
- 2017年
- 近年来儿童甲状腺癌发病率有明显增加趋势。与成人甲状腺癌相比，儿童甲状腺癌不易早期发现，局部侵袭性强，更易发生颈部淋巴结转移和远处转移，其原发灶的手术治疗方式则争论较大。本文拟对儿童甲状腺癌的病因、诊断、治疗以及预后方面的研究进展予以综述。
- 王龙昊向明亮
- 关键词：甲状腺肿瘤儿童
