广东省自然科学基金(10151008901000140)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
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- 抑制细胞骨架改建对流体剪切力作用下成骨细胞增殖与分化影响研究被引量：5
- 2011年
- 目的探讨RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切力(FSS)下成骨细胞增殖和分化的影响。方法对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰两种处理后,进行FSS加载或不加载。分别应用噻唑蓝(MTT)比色法观测细胞增殖、检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性、采用流式细胞仪检测细胞周期,并进行统计分析。结果在无FSS加载条件下,单纯应用RNA干扰方法抑制细胞骨架改建,并不能促进成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(3.600±0.447)%与(3.420±0.217)%,t=-0.810,P>0.05]、成骨细胞增殖性能(0.208±0.724与0.211±0.044,t=0.251,P>0.05)及ALP活性(0.095±0.001与0.090±0.020,t=-1.857,P>0.05)增高;FSS能使成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(11.110±3.840)%>(3.420±0.217)%,t=-4.460,P<0.05]、成骨细胞的增殖性能(0.336±0.029>0.211±0.044,t=-13.878,P<0.05)及ALP的活性(0.110±0.010>0.090±0.012,t=-7.937,P<0.05)增高;RNA干扰处理可显著提高FSS下的细胞周期中处于S期的细胞百分比[(25.140±3.329)%>(3.600±0.447)%,t=-14.339,P<0.05]、成骨细胞增殖性能(0.480±0.953>0.208±0.724,t=-13.454,P<0.05)及ALP活性(0.140±0.006>0.095±0.001,t=-7.384,P<0.05)。抑制细胞骨架改建与FSS作用两因素对提高成骨细胞的细胞周期中处于S期的细胞百分比(F=240.125,P<0.05)、成骨细胞增殖性能(F=44.550,P<0.05)及ALP活性(F=13.798,P<0.05)存在正交互作用。结论采用RNA干扰抑制细胞骨架改建,可以促进FSS作用下成骨细胞的增殖和分化。
- 邵敏锋徐亚娟向映辉李友瑞张艺平陈睿付强
- 关键词：流体剪切力细胞骨架成骨细胞RNA干扰
- 抑制细胞骨架改建对流体剪切应力下成骨细胞胞外信号调节激酶激活的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切应力（fluid shears tress，FSS）下原代成骨细胞胞外信号调节激酶（extraeellular signal-regulated kinase，ERKl／2）激活的影响。方法酶消化法原代培养BALB／c小鼠成骨细胞，分别进行RNA干扰（干扰＋加载组）和阴性RNA干扰（单纯加载组），并加载0、5、15、30、60min1．2Pa的FSS，检测胞质中磷酸化ERKl／2（phosphorylation—ERKl／2，P—ERK）和ERKl／2的变化情况，并对结果进行组问双因素方差分析和组内单因素方差分析。结果单纯加载组加载0、5、15、30、60minFSS后成骨细胞P—ERK／ERK比值差异有统计学意义（分别为0．0474-0．031、0．253±0．137、0．390±0．155、0．613±0．123、0．6804-0．108）（P〈0．01）。对P．ERK／ERK比值而言，RNA干扰因素与FSS加载因素间存在交互效应（P〈0．叭）。干扰＋加载组FSS作用5和15min时，P—ERK／ERK比值（分别为0．623±0．129和0．623±0．064），与0min（0．440±0．032）差异有统计学意义（P〈0．05）；加载30min时P—ERK／ERK比值（0．333±0．086）降到基线水平；加载60min时，P-ERK／ERK比值（0．667±0．064）再次显著升高并达高峰，与0min差异有统计学意义（P〈0．01）。结论FSS可快速激活原代成骨细胞ERKl／2途径；RNA干扰抑制细胞骨架改建可加速FSS介导的ERKl／2途径的激活，从而提高成骨细胞ERKl／2对FSS的敏感性。
- 向映辉宋扬杨志陈晓丹付强邵敏锋
- 关键词：细胞骨架剪应力胞外信号调节激酶
