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国家自然科学基金(30200109)

作品数:8 被引量:20H指数:2
相关作者:洪梅宋善俊黄瑞滨胡豫魏文宁更多>>
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文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 3篇生物学

主题

  • 5篇同型半胱氨酸
  • 5篇细胞
  • 5篇氨酸
  • 5篇半胱氨酸
  • 4篇血管
  • 4篇血管平滑肌
  • 4篇平滑肌
  • 3篇蛋白
  • 3篇血管平滑肌细...
  • 3篇同型半胱氨酸...
  • 3篇平滑肌细胞
  • 3篇肌细胞
  • 2篇凝血
  • 2篇凝血致活酶
  • 2篇细胞组
  • 2篇细胞组织
  • 2篇细胞组织因子
  • 2篇联蛋白
  • 2篇膜联蛋白
  • 2篇基因

机构

  • 7篇华中科技大学

作者

  • 7篇洪梅
  • 6篇宋善俊
  • 5篇黄瑞滨
  • 4篇胡豫
  • 3篇魏文宁
  • 2篇宋毅峰
  • 2篇仲任
  • 2篇李军
  • 1篇姚军霞
  • 1篇陈涛
  • 1篇王定淼

传媒

  • 2篇血栓与止血学
  • 1篇中华心血管病...
  • 1篇临床心血管病...
  • 1篇临床血液学杂...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇广西医科大学...
  • 1篇Journa...

年份

  • 2篇2009
  • 2篇2007
  • 2篇2006
  • 2篇2004
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
膜联蛋白A5抑制同型半胱氨酸诱导的血管平滑肌细胞组织因子的表达和活化被引量:2
2009年
目的研究膜联蛋白A5(Annexin A5)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)组织因子表达和活化的抑制作用。方法采用组织贴块法培养人脐动脉VSMC,应用α-肌动蛋白(actin)免疫组化法鉴定细胞。将不同浓度(10、100、500、1000μmol/L)的Hcy与VSMC孵育,在用Annexin A5(50μg/ml)或组织因子的单抗(10μg/ml)干预的条件下,流式细胞技术(FCM)检测VSMC的组织因子细胞膜表达,FX生成反应检测VSMC细胞培养液组织因子活性,Western blot检测VSMC的组织因子表达。结果用PBS作为对照的VSMC细胞膜表面有低水平的TF表达,阳性率为(4.01±2.11)%。Hcy作用4h后,100μmol/L即可诱导VSMCTF蛋白表达升高,阳性率为(14.01±3.72)%,1000μmol/L时达高峰,阳性率为(37.67±4.96)%。与PBS对照组细胞相比,Hcy能显著诱导细胞TF的表达。用100μmol/L的Hcy作用VSMC,加入Annexin A5或TF的单抗后,在4、8、16h均能有效抑制TF的细胞膜表达和培养液中TF活性。不同浓度的Annexin A5能显著抑制Hcy诱导的VSMCTF蛋白的表达。结论Annexin A5能抑制Hcy诱导的VSMC组织因子的表达和活化,对此作用过程的深入研究,可能为防治冠状动脉粥样斑块血栓的形成和发展提供新的契机。
李军陈涛王定淼宋毅峰洪梅
关键词:血管膜联蛋白A5半胱氨酸凝血致活酶
Expression and Location of Intracellular Tissue Factor in Atherosclerosis Stable Plaque of ApoE^(-/-) Mice
2009年
In the ApoE- /-mouse model of atherosclerosis(AS)stable plaque,the expression and location of intracellular tissue factor(TF)in the cellular components of AS stable plaque were investigated in order to explore the cellular mechanism of AS thrombosis.Pathological changes of the stable plaque were observed under a microscope.The expression of TF protein was examined in aortic stable plaque of mice by using immunohistochemistry.Color image planimetric system was used to analyze the histological components of the stable plaque and the TF distribution.Under the confocal microscope,the intracellular TF location in the stable plaque of mice was observed.The results showed the cellular area was the major part of stable plaque(67.36%±6.52%,P<0.01).The percentage of total area occupied by cellular area was significantly larger than atheromatous gruel and acellular area(P<0.01).Macrophages and smooth muscle cells(SMC)were major cells in the cellular area.The percentage of total area occupied by SMC was significantly larger than by macrophages (P<0.01).Multiple linear regression analysis showed there was a positive correlation between TF area and SMC area(r=0.616,P=0.008),and no correlation was found between TF area and macrophage area(r=0.437,P=0.08).Pictures of color image planimetric analysis of TF and SMC were merged to highlight areas with co-localization(yellow),it was concluded that the process could be a cell-mediated TF expression in the stable plaque.SMC may be the major source of TF in AS without plaque rupture.
李军陈涛王定淼宋毅峰洪梅
关键词:载脂蛋白E
同型半胱氨酸诱导血管平滑肌细胞组织因子表达增强被引量:10
2007年
目的:研究同型半胱氨酸(Hcy)诱导人血管平滑肌细胞(VSMCs)组织因子(TF)表达的作用,及其对核转录因子(NF-κB)活性和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法:培养人脐动脉VSMCs,将不同浓度的Hcy和/或NF-κB抑制剂PDTC与VSMCs孵育不同时间,用RT-PCR方法检测TF mRNA表达,用Western blotting检测核NF-κB水平,用流式细胞术(FCM)检测细胞表面TF蛋白水平和iNOS水平。结果:10μmol/LHcy作用4h,TF表达开始升高,500μmol/L达峰值,Hcy能显著诱导VSMCs表达TF mRNA;对照组VSMCs细胞膜表面有低水平的TF蛋白表达,10μmol/LHcy作用4h即可诱导VSMCs表达TF蛋白,500μmol/L达高峰,Hcy能显著诱导VSMCs表达TF;500μmol/LHcy作用1h,细胞核NF-κB水平明显升高,Hcy可诱导VSMCsNF-κB活化;NF-κB抑制剂PDTC可明显抑制Hcy对TF mRNA和细胞TF表达的诱导作用;单独Hcy作用不能诱导VSMCs表达iNOS。结论:Hcy能显著诱导VSMCs表达TF,增强VSMCs的NF-κB活化,从而介导TF基因表达和蛋白合成,通过NF-κB介导VSMCs表达TF可能是Hcy导致AS、血栓形成的重要机制。
洪梅黄瑞滨姚军霞魏文宁胡豫宋善俊
关键词:高半胱氨酸血管平滑肌细胞凝血致活酶
同型半胱氨酸对人血管平滑肌细胞增殖与细胞凋亡的影响
2006年
目的观察同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及凋亡的影响。方法采用组织贴块法体外培养人VSMCs,将不同浓度Hcy与VSMCs孵育不同时间,应用MTT法检测VSMCs细胞增殖、流式细胞术(FCM)检测VSMCs细胞凋亡。结果体外培养的人VSMCs在终浓度为500μmol/L Hcy的培养液中孵育0h、6h、12h、24h、48h后的A值分别为0.504±0.053、0.586±0.043、0.625±0.031、0.683±0.087、0.812±0.147,细胞凋亡率分别为2.39%±0.47%、2.45%±0.96%、7.58%±2.02%、13.37%±4.71%、17.69%±3.13%,表明Hcy呈时间依赖性诱导人VSMCs细胞增殖和细胞凋亡;在终浓度分别为0、100、200、500、1000μmol/L Hcy的培养液中孵育24h后的A值分别为0.549±0.067、0.616±0.121、0.644±0.095、0.685±0.139、0.846±0.142,细胞凋亡率分别为2.68%±0.23%、2.79%±0.89%、8.45%±2.41%、13.41%±4.98%、17.75%±5.56%,表明Hcy呈浓度依赖性诱导人VSMCs细胞增殖和细胞凋亡。结论Hcy可以诱导VSMCs增殖和细胞凋亡。
黄瑞滨洪梅魏文宁胡豫宋善俊
关键词:同型半胱氨酸血管平滑肌细胞增殖凋亡
同型半胱氨酸诱导人血管平滑肌细胞组织因子的表达被引量:2
2006年
目的研究同型半胱氨酸(Hcy)诱导人血管平滑肌细胞(VSMCs)表达组织因子(TF)的作用。方法采用组织贴块法培养人脐动脉 VSMCs,应用α-actin 免疫组化法鉴定细胞;将不同浓度的 Hcy 与 VSMCs 孵育,采用半定量 RT-PCR 检测细胞 TF mRNA 表达,流式细胞技术(FCM)检测细胞表面 TF 蛋白水平。结果终浓度分别为0、10、100、 500、1000μmol/L 的 Hcy 作用4 h,Hcy 浓度为10μmol/L 时,TF 表达开始升高,500μmol/L 达峰值,Hcy 呈剂量依赖性诱导 VSMCs 表达 TF mRNA;100μmol/L Hcy 作用0、1、2、3、4、8、24 h,2 h 时 TF 表达明显增加,8 h 达峰值,24 h 表达回到基础水平,Hcy 呈时间依赖性诱导 VSMCs 表达 TF mRNA;VSMCs 细胞膜表面有低水平的 TF 蛋白表达,终浓度分别为0、 10、100、500、1000μmol/L Hcy 作用4 h,10μmol/L 即可诱导 VSMCs 表达 TF 蛋白,1000μmol/L 达高峰,Hcy 呈剂量依赖性诱导 VSMCs 表达 TF 蛋白;终浓度为100μmol/L Hcy 作用0、1、2、4、8、16、24 h,2 h 时 TF 开始表达升高,Hcy 呈时间依赖性诱导 VSMCs 表达 TF 蛋白。结论 Hcy 呈时间依赖性和剂量依赖性诱导 VSMCs 表达 TF,可能是 Hcy 导致 AS 和冠心病等疾病发生发展的重要机制。
洪梅黄瑞滨魏文宁胡豫宋善俊
关键词:同型半胱氨酸血管平滑肌细胞基因表达
膜联蛋白V真核表达载体的构建
2004年
目的 :构建人膜联蛋白 V基因真核表达载体 ,探讨人膜联蛋白 V的生理功能。方法 :PCR方法扩增含 Eco RI及 Bam HI酶切位点的膜联蛋白 V基因序列 ,对真核表达载体 pc DNA 3.1 (- )和膜联蛋白 V基因扩增产物进行双酶切 ,用连接酶将二者连接并转化到大肠杆菌 BL 2 1 ,重组质粒经测序鉴定 ,称为 pc DNA3.1 (- ) Ax V。结果 :酶切琼脂糖电泳分析 pc DNA3.1 (- )Ax V中含有膜联蛋白 V基因 ,序列分析表明与文献报道的序列完全一致。结论 :成功地构建了人膜联蛋白 V基因的真核表达载体 。
黄瑞滨洪梅仲任宋善俊
关键词:膜联蛋白V基因真核表达载体
同型半胱氨酸对人单核细胞组织因子表达的影响被引量:2
2004年
目的 :探讨同型半胱氨酸 (HC)是否诱导人外周血单核细胞 (Mn)表达组织因子 (TF) ,并且观察叶酸对其作用的影响。方法 :将Mn暴露于不同浓度HC、叶酸一定时间后 ,采用RT PCR、流式细胞术和WesternBlot检测其TF表达。结果 :HC可以诱导Mn表达TF ,并且呈时间和剂量依赖性 ,而且这种诱导作用不能被叶酸抑制。结论 :HC可以诱导Mn表达TF ,从而在血栓形成中起重要作用。
黄瑞滨洪梅仲任宋善俊
关键词:半胱氨酸单核细胞
ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变中稳定斑块组织因子的表达被引量:5
2007年
目的:研究稳定斑块组织因子(TF)活化表达及在血栓形成中的作用。方法:建立ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变的动物模型,一期凝固法检测小鼠血浆TF特异性的促凝活性,光镜和电镜观察稳定斑块病变,免疫组化SP法检测小鼠稳定斑块TF的蛋白表达,原位杂交法检测小鼠稳定斑块TF mRNA表达。结果:ApoE-/-小鼠血浆促凝活性显著增加(P<0.01),并随着诱发斑块时间的延长呈上升趋势,抗TF单抗能显著抑制血浆促凝活性(P<0.01);实验小鼠的病变为稳定斑块,电镜下,ApoE-/-小鼠可见完整的血管内皮细胞,在内皮完整的血管内有血小板的聚集;不同狭窄程度的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变部位TF的表达差异有统计学意义(P<0.01),TF的表达随着粥样硬化病变的进展而增强,TFmRNA与TF蛋白表达一致。结论:TF可能通过活化和释放启动凝血过程,导致血栓的形成;TF不仅是粥样硬化导致动脉损伤的结果,还可能是促进动脉粥样硬化病变的重要原因。
洪梅宋毅峰李军胡豫宋善俊
关键词:动脉粥样硬化血栓形成
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