山东省自然科学基金(ZR2011HL047)
- 作品数：3 被引量：9H指数：1
- 相关作者：史立宏王海超张月超雷丽恰陈海蓉更多>>
- 相关机构：潍坊医学院潍坊市第二人民医院青岛大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金潍坊市科学技术发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 稳定表达siRNA-ARK5基因的胃癌SGC-7901细胞系的构建
- 2013年
- 目的构建稳定表达siRNA-ARK5基因的人胃癌SGC-7901细胞系,为研究ARK5在胃癌发生发展中的作用与机制奠定基础。方法把pGCsilencerU6/GFP/Neo-RNAi-ARK5重组质粒通过脂质体转染胃癌SGC-7901细胞,利用不同浓度的G418筛选获得稳定转染细胞株,挑取单克隆细胞系进行培养,应用荧光显微镜和RT-PCR技术确定是否获得了ARK5基因被稳定抑制的单克隆细胞系。结果成功挑取的4株单克隆细胞中2株细胞的ARK5基因的表达被显著抑制。结论通过siRNA干扰技术成功构建了稳定表达siRNA-ARK5基因的胃癌SGC-7901细胞系,为研究ARK5在胃癌发生发展中的作用与机制奠定了基础。
- 李文花王海超雷丽恰张月超史立宏张宝刚
- 关键词：胃癌SIRNA
- 氟芬那酸丁酯软膏治疗面部单纯糠疹40例疗效观察
- 2014年
- 目前单纯糠疹发病机制尚不完全清楚，可能与日晒和皮肤干燥有关，笔者于2011年2~10月对本科门诊确诊的80例单纯糠疹患者进行研究，现报道如下。
- 郜玉玲史立宏史同新陈海蓉李春霞
- 关键词：单纯糠疹氟芬那酸丁酯软膏疗效观察面部发病机制皮肤干燥
- SP13786通过CAFs外泌体抑制Stat3-EMT影响肺腺癌细胞A549的迁移侵袭被引量：9
- 2021年
- 背景与目的成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)是肿瘤相关成纤维细胞(cancerassociated fibroblasts,CAFs)的表面标志物之一,与CAFs的恶性表征关系密切,SP13786是FAP的特异性小分子抑制剂。本研究探讨SP13786作用于CAFs后,CAFs外泌体(exosomes,exo)对A549细胞迁移、侵袭的影响与机制。方法原代提取CAFs和癌旁成纤维细胞(peri-tumer fibroblasts,PTFs);MTT实验检测不同浓度SP13786对CAFs增殖的影响;聚合物沉淀法提取PTFs-exo、CAFs-exo以及CAFs+SP13786-exo。将A549细胞设对照组、PTFs组、CAFs组及CAFs+SP13786组并分别以等体积的DMEM、PTFs-exo、CAFs-exo及CAFs+SP13786-exo孵育细胞。激光共聚焦实验检测A549细胞摄取外泌体的情况;免疫荧光、免疫组化和Western blot方法检测α平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、FAP在PTFs和CAFs中的表达及E-cadherin、N-cadherin、Slug、Stat3、P-Stat3在各组A549细胞中的表达;划痕实验和Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力。结果免疫荧光、免疫组化和Western blot结果均显示α-SMA、FAP在CAFs中高表达,在PTFs中低表达(P<0.05),表明从肺腺癌组织和癌旁组织中分别成功获得了CAFs和PTFs。MTT实验测得SP13786对于CAFs细胞的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)约为3.3 nmol/L。免疫组化和Western blot结果显示与CAFs组相比,CAFs+SP13786组的α-SMA与FAP的表达显著降低(P<0.05),说明抑制FAP可以显著降低CAFs的恶性表征。激光共聚焦结果显示外泌体能够被A549细胞所摄取。划痕实验与Transwell实验显示SP13786可抑制CAFs-exo对A549细胞迁移和侵袭的促进作用(P<0.05)。与CAFs组比较,SP13786组A549细胞E-cadherin表达增多,N-cadherin与Slug表达降低(P<0.05);免疫荧光与Western blot显示SP13786组A549细胞的P-Stat3较CAFs组明显降低(P<0.05),而总Stat3无显著差异。Stat3的特异性抑制剂WP1066明显抑制CAFs组A549细胞上皮间质转化(epithelia
- 王淑淑崔镓钰张凯佳谷金华郑远航张宝刚史立宏
- 关键词：肺腺癌肿瘤相关成纤维细胞成纤维细胞活化蛋白外泌体EMTSTAT3
