广东省自然科学基金(06300897)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：孙敬锋吴信忠毕相东更多>>
- 相关机构：天津农学院浙江大学华南师范大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 间接ELISA技术检测近江牡蛎病原—类立克次体被引量：2
- 2009年
- 以近江牡蛎病原—类立克次体为抗原,制备鼠抗血清,利用辣根过氧化酶标记的羊抗鼠血清(HRP-IgG)为酶标二抗,建立了检测近江牡蛎类立克次体的间接ELISA快速检测方法。结果表明,应用间接ELISA技术检测近江牡蛎类立克次体有较高的灵敏度,最低的检测量为50 ng的全菌抗原蛋白量。同时交叉反应试验表明该方法具有较高的特异性。利用建立的间接ELISA技术,对50份自然患病的近江牡蛎鳃组织进行类立克次体检测,阳性率为89%。
- 孙敬锋毕相东吴信忠
- 关键词：ELISA技术近江牡蛎类立克次体
- 泛影葡胺密度梯度离心法纯化近江牡蛎类立克次体
- 2008年
- 用国产泛影葡胺做介质,通过差速离心和密度梯度离心从患病近江牡蛎的鳃、外套膜、肝胰腺组织中纯化类立克次体。纯化的类立克次体在透射电镜下观察,20%～25%和25%～30%之间的条带为纯净的类立克次体,大多数呈球形、椭球形,偶见哑铃状(处于二分裂阶段)。纯化的类立克次体细胞形态完整,在光滑的细胞壁外围有一层疏松的粘液层,而且多个类立克次体常聚集在一起。利用API ZYM半定量法对类立克次体进行酶谱分析,检测到了11种酶,包括碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、酯酶(C4)、类脂酯酶(C8)、亮氨酸芳胺酶、萘酚AS-BI-磷酸水解酶、β-半乳糖苷酶、N-乙酰葡萄糖胺酶、β-果糖酶、β-糖醛酸苷酶和缬氨酸芳胺酶。本实验证明,国产泛影葡胺是直接从患病贝类组织中纯化类立克次体的良好介质。
- 孙敬锋吴信忠
- 关键词：泛影葡胺类立克次体纯化近江牡蛎酶谱分析
