山东省科技发展计划项目(2004GG2205116)
- 作品数：20 被引量：294H指数：10
- 相关作者：王印庚荣小军廖梅杰张正张春云更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所新疆农业大学中国海洋大学更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目山东省农业良种工程项目青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 中草药对刺参腐皮综合征病原菌的体外抑菌试验被引量：22
- 2009年
- 用改良二倍稀释法和抑菌圈法测定了24种单方中草药和9种复方中草药对刺参腐皮综合征4种重要病原菌灿烂弧菌、假交替单胞菌、哈维氏弧菌和恶臭假单胞菌的体外抑菌活性。结果显示,不同中草药对特定病原菌抑菌效果差异较大,单方中草药最低抑菌浓度(MIC)为1.56mg/ml,中草药水煎剂H-5和H-9对假交替单胞菌的抑菌圈最大,达22mm。单方中草药中穿心莲、大青叶、金银花和川芎4种中草药对4株病原菌抑菌效果最好,其水煎剂对4株病原菌平均抑菌浓度分别为6.25、7.81、5.86和3.52mg/ml;平均抑菌圈直径分别是17.5、11.3、14.0和11.5mm。将筛选的4种单方中草药组成9种复方,复方MIC和抑菌圈均显著好于单方,最低MIC降低到0.20mg/ml。其中复方HC-G和HC-D抑菌浓度最低,效果最好,平均抑菌浓度分别降低为0.54和0.64mg/ml;平均抑菌圈直径分别为15.3mm和16.3mm。试验结果显示,复方最佳配比为穿心莲、大青叶、金银花和川芎=2∶1∶3∶2。该复方可为生产高效专用中草药,以替代抗生素,为刺参健康养殖提供技术保障。
- 王印庚冷敏陈霞荣小军廖梅杰
- 关键词：刺参海水养殖腐皮综合征中草药抑菌浓度
- 刺参育苗系统中的敌害生物--玻璃海鞘的药物杀除试验被引量：8
- 2009年
- 10种渔药对玻璃海鞘Ciona intestinalis的急性毒性试验结果表明,硫酸锌(≤3mg/L)、碳酸氢钠(≤2.5%)、茶皂素(≤6.7ml/L)、氯氰菊酯(≤0.2ml/L)、精制敌百虫粉(≤4mg/L)、敌百虫.辛硫磷粉(≤3mg/L)和高锰酸钾(≤5mg/L)对玻璃海鞘无致死作用。在24h内,硫酸铜浓度≥1mg/L、灭鞘灵(MQL)浓度≥5mg/L和自制大蒜素复方药物灭鞘散(MQS)≥15mg/L时,对玻璃海鞘有100%的致死作用,其24h的LC50值分别为0.58、3.33和10.80mg/L。硫酸铜浓度≥1mg/L时,稚参在3h内吐肠率达80%以上,对刺参能造成严重的生理伤害。因此,硫酸铜不适合在生产实践中使用。MQS浓度为20mg/L或MQL浓度为10mg/L对稚参的毒性实验表明,药物浸泡稚参96h仍活动正常,对生存没有任何影响。因此,MQS和MQL可视为刺参养殖系统中杀灭玻璃海鞘的有效药物,分别采用15mg/L和5mg/L的浓度,药浴24h后换水即可完成。
- 周书珩王印庚李胜忠荣小军李娟陈霞
- 关键词：刺参养殖玻璃海鞘敌害生物毒理半致死浓度
- 刺参的趋光性以及对附着基颜色的感应行为被引量：20
- 2009年
- 为了探讨刺参的趋光特性和附着基颜色对其行为反应的影响,分别用平均趋光率(mean phototactic rate,MPR)和平均聚集率(mean attractive rate,MAR)统计分析了刺参在100、50、10、5和1lx共5档强度的光照和7种颜色的附着基(红色、灰色、黄色、蓝色、白色、黑色和绿色)下的行为反应差异。结果表明:在水平光场内,光源照度为100、50和10lx时,光照度较强区与光照度较低区之间的MPR均存在显著差异(P(0.05),而光源照度为5和1lx时,各区域之间的MPR无显著差异;不同颜色附着基实验时,刺参在黑暗和自然光照条件下,同种颜色附着基的MAR无显著差异(P>0.05);在相同光照条件下,黑色和灰色附着基的MAR明显优于其他颜色的附着基,与蓝色、黄色及不放置附着基的MAR差异极显著(P<0.01),不同颜色附着基的MAR由大到小排列为黑色>灰色>红色>绿色>白色>蓝色>黄色。表明刺参的趋光性随着光照强度的增加而减小,呈负趋光性;平均聚集率较高的3种颜色的附着基是黑色、灰色和红色。
- 张辉王印庚荣小军曹善茂陈霞
- 关键词：刺参趋光特性附着基行为生态学
- 秋、冬季节刺参养殖池塘浮游细菌数量变化规律的研究被引量：6
- 2010年
- 应用平板稀释涂布培养计数法和荧光显微镜计数法,对秋、冬季(2008年9月～2009年2月)刺参养殖池塘水体中的浮游细菌数量变化规律进行了分析。结果表明,吖啶橙染色直接计数法(AODC)测得细菌总数的变化范围是1.0×106～2.1×107个/ml,活菌直接计数法(DVC)测得活菌总数的变化范围是4.0×105～5.7×106个/ml。异养细菌平板计数法(HPC)测得异养细菌数量为0.6×102～1.7×105CFU/ml。TCBS平板培养的弧菌数量在6.6×103CFU/ml以下。从时间分布看,刺参养殖池塘水体中浮游细菌数量最高值出现在10月份,最低值出现在1月份,秋季细菌数量显著高于冬季(P<0.01)。从空间分布看,水体底层细菌数量显著高于表层(P<0.05)。利用SPSS13.0软件对所得到的数据进行统计分析表明,同一样品不同计数方法获得的细菌总数数值之间存在显著的相关性(P<0.01)。
- 李彬荣小军姜卓廖梅杰王印庚薛太山李华
- 关键词：刺参浮游细菌DVCHPC
- 养殖刺参腐皮综合征2种致病菌间接荧光抗体快速检测方法被引量：7
- 2010年
- 以养殖刺参(Apostichopus japonicus)腐皮综合征的2种致病菌:灿烂弧菌(Vibrio splendidus)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)为抗原,分别制备兔抗血清。以载玻片为介质,建立了2种病原菌的间接荧光抗体检测技术(IFAT)。交叉反应、阻断试验和吸收试验结果均表明本方法特异性强。对人工感染实验中的养殖水体及发病刺参溃烂组织检测,可以检出水体和患病刺参溃烂组织中的相应病原菌,病原菌被染成明亮的黄绿色,检测灵敏度2.4×104cell/mL。冰冻切片检测结果显示,在刺参肿胀嘴部与溃烂肌肉处有大量染成黄绿色的细菌颗粒。结果表明:采用IFAT可以对刺参腐皮综合征2种致病菌进行准确快速的检测。该方法的建立对刺参腐皮综合征的流行病学调查及快速诊断具有重要意义。
- 王印庚谢建军荣小军廖梅杰张正
- 关键词：刺参腐皮综合征灿烂弧菌假交替单胞菌
- 应用PCR方法检测刺参腐皮综合征病原--灿烂弧菌被引量：19
- 2008年
- 腐皮综合征是近年来刺参养殖最主要的疾病,导致刺参大批死亡和惨重的经济损失。根据其主要致病原灿烂弧菌(Vibrio splendidus)的16S^23S间隔区序列,设计特异性引物,利用PCR技术,从纯化的V.splendidus DNA中成功地扩增出产物大小为177bp的DNA片断,并对此方法的灵敏度和特异性进行了研究。结果表明,PCR技术对V.splendidus DNA的检测灵敏度为0.5pg,并且对灿烂弧菌的DNA呈现特异性,而与其他细菌V.fluvialis、V.anguillarum、V.alginolyticus、Aeromonas hydrophila、V.harveyi、V.parahaemolyticus、V.vulnificus的DNA均无交叉反应。应用PCR技术对人工感染的以及取自青岛、烟台和威海的腐皮综合征发病海参进行检测,其检出率均为100%。研究结果表明,PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可成功用于快速检测养殖刺参腐皮综合征原灿烂弧菌。在国内,该方法应用于刺参腐皮综合征的检测尚属首次,它将为刺参腐皮综合征的快速诊断及防治提供又一新的方法。
- 张凤萍王印庚李胜忠荣小军廖梅杰张正
- 关键词：刺参腐皮综合征灿烂弧菌PCR
- 仿刺参幼体烂胃病及其致病原鉴定被引量：34
- 2006年
- 山东、辽宁两省在仿刺参（Apostichopus japonicus）苗种培育期间的5-7月，耳状幼体易发生一种以胃壁增厚、萎缩、溃烂为主要特征的“烂胃病”。从患烂胃病的耳状幼体中分离到1株细菌LW-1，人工回接感染实验证实其具有较强的致病性，并与自然发病症状相同。通过API半自动化鉴定和常规的生理生化试验的结果表明，LW-1具有弧菌属的特征，其表型特征与灿烂弧菌（Vibrio splendidus）相似。对该菌株16S rRNA基因序列分析和构建系统发生树。结果显示，菌株LW-1与灿烂弧菌的亲缘关系最近，相似率达到99．8％。菌株LW-1可鉴定为灿烂弧菌，并视为耳状幼体烂胃病的致病原之一。通过对多起仿刺参苗期烂胃病的调查研究表明，烂胃病病原也具有多样性和复杂性，并与投喂老化腐败的单胞藻饵料有关。
- 王印庚孙素凤荣小军
- 关键词：仿刺参灿烂弧菌RRNA
- 一株引起刺参“腐皮综合征”的蜡样芽孢杆菌被引量：34
- 2009年
- 对实验室暂养发病的刺参(Apostichopus japonicus)进行了微生物学分析,从所有患病个体的病灶组织分离得到了1株具绝对优势的细菌,经回接感染试验证实它对刺参具有较强的致病性。通过形态学、生理生化指标测定和16SrDNA序列分析,该菌被初步鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。蜡样芽孢杆菌通常被视为益生菌,广泛应用于畜禽养殖,水产养殖上也有使用。鉴于蜡样芽孢杆菌能导致刺参"腐皮综合征"的发生,建议在刺参养殖环境中应慎用该菌制剂。
- 骆艺文郝志凯王印庚曲江波
- 关键词：刺参腐皮综合征蜡样芽孢杆菌
- 低温期养殖刺参腐皮综合征的发生与环境因子间的关系被引量：6
- 2011年
- 为研究低温期养殖刺参腐皮综合征的发生与环境因子之间的关系,2006年1～5月在青岛周边地区3个养殖场刺参腐皮综合征发生的早期,采用异养菌总数TSB平板计数法、弧菌TCBS平板计数法对发病池塘的水质和池塘中异养菌总数和弧菌总数的数量与分布以及刺参肠道中的异养菌总数和弧菌总数进行了研究,同时比较研究了刺参病灶组织中优势菌与池塘环境及刺参肠道中优势菌的相关性。结果表明:发病池塘水体中细菌的数量较少,但底层水体中细菌总数普遍多于表层,水体中的优势菌与刺参病灶组织中的优势菌相关性不大;池塘表层底泥和刺参肠道中异养菌总数较多,弧菌总数较少,其优势菌与刺参病灶组织优势菌具有一致性。刺参腐皮综合征的发生与池塘水体分层引起的水质恶化和底泥中异养菌的数量密切相关。
- 黄华伟王印庚陈霞张凤萍
- 关键词：刺参腐皮综合征水质
- 注射一株灭活气单胞菌苗对刺参部分免疫因子的影响被引量：6
- 2009年
- 从患有"腐皮综合征"的刺参(Apostichopus japonicas Liao)病灶处分离出1株优势菌株,经形态学、生理生化分析以及16S rDNA分子生物学方法鉴定其为气单胞菌属(Aeromonas)的1个种;人工感染试验证明,该菌株对刺参有一定毒力。将其制备成甲醛灭活菌苗后对健康刺参进行体腔注射,测定灭活气单胞菌苗对刺参部分免疫指标的影响,同时将生理盐水注射组作为对照。结果表明,注射菌苗浓度3.9×108CFU/mL组刺参血清中溶菌酶活力在注射后6h达到峰值,而4.7×107CFU/mL注射组的活力在注射后24h达到最高值;实验组的溶菌酶活力显著高于对照组(P<0.05)。在3.9×108CFU/mL组中,碱性磷酸酶活力于48h达到最高值;而4.7×107CFU/mL组在96h达到最高值,实验组的碱性磷酸酶活力显著高于对照组(P<0.05)。相比之下,注射菌苗对血清的超氧化物歧化酶活力影响却不显著。总体上,该菌苗在一定程度上可以刺激刺参机体产生强的免疫应激反应。注射高浓度菌苗时,溶菌酶、碱性磷酸酶活力达峰所用时间较短而且显著,但其酶活力升高持续时间较短。
- 周晓苏王印庚荣小军廖梅杰李娟陈霞
- 关键词：刺参腐皮综合征气单胞菌灭活菌苗免疫指标
