黑龙江省研究生创新科研项目(YJSCX2008-064HLJ)
- 作品数:1 被引量:20H指数:1
- 相关作者:高树仁王士磊更多>>
- 相关机构:黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金:黑龙江省研究生创新科研项目黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 正交设计优化玉米SSR-PCR反应体系的研究被引量:20
- 2009年
- 为建立适宜玉米SSR-PCR的反应体系和扩增程序,利用正交设计L16(45)表,对反应体系的模板DNA、dNTPs、Primers、Taq DNA聚合酶的浓度进行4因素4水平优化筛选和扩增程序的优化,确立了最优反应体系和扩增程序。即在10μL体系中,模板DNA 20 ng,1×PCR buffer,dNTPs62.5 pmol/μL,Primers0.25 pmol/μL,Taq DNA polymerase 0.5U。反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性45s,60℃退火45s,72℃延伸1min,32个循环;72℃延伸5min,4℃保存。使用300对SSR引物对重组近交系的两亲本扩增,筛选出条带清晰,有差异的引物94对,用于基因连锁图谱构建和QTL定位。
- 王士磊李玉鹏高树仁
- 关键词:玉米正交设计