国家自然科学基金(81170414)
- 作品数：9 被引量：22H指数：2
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- 肝肺综合征大鼠血清对肺微血管内皮细胞caveolin-1及VE-cadherin蛋白表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 评价肝肺综合征大鼠血清对肺微血管内皮细胞（PMVECs）微囊蛋白1（caveolin-1）及血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）表达的影响.方法 健康SD大鼠40只,雌雄不拘,3-4月龄,体重220- 250 g,随机取20只采用慢性胆管结扎法制备大鼠肝肺综合征模型,另外20只行假手术.另取正常大鼠原代培养、纯化及鉴定PMVECs.PMVECs接种于内皮细胞专用ECM培养基（不含血清）或96孔培养板,第4-9代细胞用于实验,采用随机数字表法分为2组（n=36）：对照组（C组）和肝肺综合征组（HPS组）,C组加入假手术大鼠血清,HPS组加入肝肺综合征大鼠血清,终浓度为10％.于孵育12、24和36 h（T1-3）时分别采用Western blot法检测PMVECscaveolin-1和VE-cadherin蛋白的表达,CKK-8法检测PMVECs间的粘附及增殖情况.结果 与C组比较,HPS组T1-3时caveolin-1和VE-cadherin蛋白表达下调,PMVECs间的粘附指数下降,PMVECs增殖能力增强（P＜0.05）.结论 肝肺综合征大鼠血清通过下调caveolin-1及VE-cadherin蛋白的表达诱发PMVECs接触性抑制减弱.
- 袁碧英易斌曾静陈林陈倩段家祥鲁开智
- 关键词：肝肺综合征内皮细胞钙黏着糖蛋白类
- 梗阻性黄疸患者血清对人肺微血管内皮细胞肌样分化的影响
- 2016年
- 目的评价梗阻性黄疸患者血清对人肺微血管内皮细胞（PMVECs）肌样分化的影响。
方法分离人PMVECs，并传代培养，将培养的人PMVECs分别采用梗阻性黄疸患者血清和健康志愿者血清孵育，于孵育24、48和72 h（T1～3）时在倒置显微镜下观察原代PMVECs形态，采用Western blot法检测PMVECs肌性蛋白（α-SMA、SM-MHC、capolnin）的表达。
结果健康志愿者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA蛋白表达阴性，出现少量SM-MHC表达，梗阻性黄疸患者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达阳性。与健康志愿者血清比较，梗阻性患者黄疸血清孵育PMVECs SM-MHC表达上调（P〈0.05）；与T1时比较，T2，3时梗阻性黄疸血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达上调（P〈0.05）；与T2时比较，T3时梗阻性黄疸患者血清孵育PMVECs calponin、α-SMA和SM-MHC表达上调（P〈0.05）。
结论梗阻性黄疸患者血清促进PMVECs肌样分化，可能是肺微血管扩张机制之一。
- 陈啟炜杨勇陈兵陈杨李胜王桂兰吴玉龙陈崇会祖宝利易斌鲁开智廖林
- 关键词：血清细胞分化
- 肺组织Akt1和Smad3在大鼠肝肺综合征形成中的作用
- 2013年
- 目的 探讨肺组织丝氨酸苏氨酸蛋白激酶-1（Akt1）、Smad3在大鼠肝肺综合征形成中的作用.方法 健康雄性SD大鼠72只,3～4月龄,体重200～ 250 g,采用随机数字表法,将其分为3组（n=24）：正常对照组（C组）、假手术组（S组）、胆总管结扎组（CBDL组）.S组打开腹腔暴露胆总管后关腹,CBDL组结扎并剪断胆总管后关腹.于术后第1、3和5周（T13）时,随机取8只大鼠,抽取腹主动脉血样后处死取肺脏.腹主动脉血样行血气分析,用RT-PCR法和Western blot法检测肺组织Akt1、Smad3的mRNA及蛋白表达水平；肺组织切片HE染色后观察肺组织微血管的病理学结果.结果 与C组和S组比较,CBDL组T2.3时肺组织Akt1、Smad3的mRNA及其蛋白表达上调,T3时肺泡-动脉血氧分压差增大（P＜0.05）.CBDL组T3时肺组织微血管明显扩张.结论 大鼠肺组织Akt1、Smad3表达上调参与了肝肺综合征的形成.
- 祖宝利陈杨陈兵杨勇易斌鲁开智
- 关键词：肝肺综合征蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
- 大鼠肺毛细血管周细胞的培养
- 2013年
- 目的 建立可靠、简便的肺毛细血管周细胞的培养方法.方法 选择健康雄性SD大鼠6只,6～7周龄,体重200 ～ 220 g,采用Ⅰ型胶原酶消化法和微孔过滤法分离肺毛细血管片段,用含10％胎牛血清和0.5％青霉素链霉素混合液的高糖DMEM/F12 1∶1培养基选择性培养肺毛细血管周细胞.倒置相差显微镜下观察细胞形态和生长状态,采用免疫荧光法计数α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结蛋白、神经元-胶质抗原2（NG2）、分化抗原31（CD31）的阳性细胞,计算阳性细胞百分比.结果 镜下细胞呈梭型或星芒状,单核,偶见双核,核卵圆形,细胞浆丰富,漩涡或栅栏状生长,无接触性抑制.免疫荧光测定α-SMA阳性细胞百分比为（99.0±1.2）％,结蛋白阳性细胞百分比为（96.0±2.1）％,NG2阳性细胞百分比为（99.0±0.7）％,CD31阳性细胞百分比为0.结论 成功建立了一种可靠、简便的大鼠肺毛细血管周细胞的培养方法.
- 陈兵易斌杨勇王芝陈杨祖宝利鲁开智
- 关键词：周细胞细胞培养技术微脉管
- 肝肺综合征患者血清对人肺成纤维细胞肌样分化、增殖与迁移的影响
- 2016年
- 目的 探讨肝肺综合征患者血清对人肺成纤维细胞肌样分化、增殖与迁移的影响.方法 人肺成纤维细胞接种于培养孔或培养瓶,采用随机数字表法分为2组（n=31）：肝肺综合征患者血清组和健康志愿者血清组,分别用含10％肝肺综合征患者血清的DMEM培养基或10％健康志愿者血清的DMEM培养基孵育.于孵育24、48和72 h（T1-T3）时,采用Western blot法检测人肺成纤维细胞平滑肌-α-肌动蛋白（SM-α-actin）和心肌肌凝蛋白（SM-MHC）的表达,采用3H-TDR法检测人肺成纤维细胞增殖能力,采用Transwell小室法检测人肺成纤维细胞迁移能力.结果 与健康志愿者血清组比较,肝肺综合征患者血清组各时点人肺成纤维细胞SM-α-actin和SM-MHC表达上调,T2,3时增殖和迁移能力增强（P＜0.05）;与T1时比较,肝肺综合征患者血清组T2,3时人肺成纤维细胞SM-α-actin和SM-MHC表达上调,增殖和迁移能力增强（P＜0.05）;与T2时比较,肝肺综合征患者血清组T3时人肺成纤维细胞SM-α-actin和SM-MHC表达上调,增殖和迁移能力增强（P＜0.05）.结论 肝肺综合征患者血清可促进人肺成纤维细胞肌样分化、增殖和迁移.
- 曾子洋高静陈林刘畅易斌
- 关键词：肝肺综合征成纤维细胞细胞运动细胞分化
- 右旋美托咪定复合帕瑞昔布对老年患者术后认知功能的影响被引量：4
- 2015年
- 目的观察右旋美托咪定复合帕瑞昔布对老年患者术后认知功能的影响。方法选取50例60～70岁择期行肺癌根治术的患者，随机平均分为2组：DP组（右旋美托咪定靶控输注＋帕瑞昔布40nlg静脉注射）和DN组（右旋美托咪定靶控输注＋生理盐水5mL静脉注射）。观察记录患者手术结束后自主呼吸恢复时间、轻唤睁眼时间及拔管时间，同时采用简易智力状态检查表（MMSE）评价认知功能，并分别测定患者手术前1d、术后1h和24h的血清S100β蛋白和炎性相关因子IL-6、TNF-α含量。结果2组患者手术后自主呼吸恢复时间、轻唤睁眼时间、拔管时间及术前MMSE评分值比较均无统计学差异（P〉0．05）。DN组术后1、3、5dMMSE评分较DP组低（P〈0．05），且DN组术后1、24hS10％蛋白及炎性因子IL-6、TNF-α测定值均较DP组高（P〈0．05）。结论右旋美托咪定复合帕瑞昔布能有效缓解老年患者胸部手术术后认知功能障碍（POCD），可能与降低炎性细胞的血清水平相关。
- 文欣荣刘畅陈林谌程程
- 关键词：帕瑞昔布术后认知功能障碍全身炎症反应综合征
- 肝肺综合征大鼠肺组织膜联蛋白A2表达的变化被引量：1
- 2013年
- 目的评价肝肺综合征（HPS）大鼠肺组织膜联蛋白A2（ANXA2）表达的变化。方法健康sD大鼠40只，雌雄不拘，3～4月龄，体重220～250g。采用随机数字表法，将其分为3组：对照组（c组，n=10）、假手术组（s组，n=10）和肝肺综合征组（HPS组，n=20）。HPS组采用胆总管结扎法建立肝肺综合征模型；c组不做任何处理；S组仅开腹暴露胆总管，但不结扎。术后5周时，处死大鼠，取肺组织，采用RT—PCR法检测ANXA2和平滑肌肌动蛋白α（SM-α-actin）的mRNA表达，采用Westernblot法检测ANXA2和SM—α—actin的蛋白表达。结果与C组比较，S组肺组织ANXA2和SM—α—actin的mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）；与s组比较，HPS组肺组织ANXA2和SM—α-ctin的mRNA及其蛋白表达上调（P〈0．05）。结论大鼠肝肺综合征时肺组织ANXA2表达上调。
- 陈杨易斌陈兵杨勇祖宝利鲁开智
- 关键词：肝肺综合征膜联蛋白A2
- 梗阻性黄疸患者血清对人PASMCs增殖、迁移及表型转换的影响
- 2014年
- 目的 探讨梗阻性黄疸患者血清对人肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）迁移、增殖及表型转换的影响.方法 分离人PASMCs,并传代培养,将培养的人PASMCs分别用梗阻性黄疸患者血清和健康志愿者血清孵育,于孵育24、48和72 h时采用CCK-8法和细胞划痕实验分别检测细胞增殖能力和迁移能力,采用Western blot法检测平滑肌-α-肌动蛋白（SM-α-actin）和钙调蛋白表达水平.结果 与健康志愿者血清孵育的人PASMCs比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育的PASMCs增殖能力和迁移能力增强,孵育24h时钙调蛋白表达上调,孵育48、72 h时SM-α-actin和钙调蛋白表达下调（P＜0.05）;与孵育24 h时比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育48 h时人PASMCs增殖能力和迁移能力增强,SM-α-actin表达上调,钙调蛋白表达下调（P＜0.05）;与孵育48 h时比较,经梗阻性黄疸患者血清孵育72 h时人PASMCs迁移能力增强（P＜0.05）,增殖能力、SM-α-actin和钙调蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 梗阻性黄疸患者血清可增强人PASMCs增殖和迁移能力,并促进其向合成表型的转换.
- 杨勇陈兵陈杨祖宝利易斌鲁开智
- 关键词：细胞增殖细胞运动细胞分化
- Smad蛋白家族调控细胞分化的研究进展被引量：16
- 2013年
- Smad蛋白家族是转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族下游最重要的细胞内信号传导蛋白,在调节细胞增殖、分化、迁移、凋亡中具有重要作用。其中Smad蛋白调节细胞分化的作用研究得最广泛,是细胞分化最重要的信号调节蛋白。文中就Smad蛋白家族调控细胞分化的研究进展作一综述。
- 陈兵易斌鲁开智
- 关键词：SMAD细胞分化信号转导
