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辽宁省自然科学基金(201202053)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：孙文平罗红邹琴杨光宫晓红更多>>
相关机构：大连市中医医院大连医科大学更多>>
发文基金：辽宁省自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇球菌
  • 1篇自溶素
  • 1篇酶切
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫活性
  • 1篇活性
  • 1篇肺炎
  • 1篇肺炎链球菌

机构

  • 1篇大连医科大学
  • 1篇大连市中医医...

作者

  • 1篇宫晓红
  • 1篇杨光
  • 1篇邹琴
  • 1篇罗红
  • 1篇孙文平

传媒

  • 1篇微生物学杂志

年份

  • 1篇2014
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
肺炎链球菌自溶素LytA小片段免疫活性的研究被引量：1
2014年
通过对肺炎链球菌（ATCC49619）自溶素lytA全序列基因的克隆和表达，获得部分小片段蛋白，初步研究其免疫活性。根据GenBank中肺炎链球菌M66菌株lytA基因序列（FN549899.1）设计合成特异性引物，采用PCR技术从肺炎链球菌（ATCC49619）基因组中扩增lytA全序列片段，构建克隆载体PGM T/lytA, 测序后与M66菌株比对显示，肺炎链球菌ATCC49619株碱基序列内存在新酶切位点BamHⅠ。以BamHⅠ、HindⅢ双酶切后，目的基因出现2个小片度，以约500 bp小片段构建重组表达载体pET32a（＋）/lytA′，经IPTG诱导后等电点洗脱法获取纯化的目的蛋白LytA′。将LytA′免疫小鼠，测定抗体效价，同时进行Western blot鉴定。测序显示肺炎链球菌ATCC49619菌株与M66菌株的lytA全基因序列同源性为98%，具有高度保守性，碱基不同主要位于下游部分，在444～450 bp之间新出现BamHⅠ酶切位点。构建的小片段重组表达质粒pET32a（＋）/lytA′在BL21（DE3）中高效表达，获得纯化蛋白LytA′，免疫BALB/c小鼠产生的抗体效价为1：32，经Western blot证实该蛋白具有较好的抗体结合活性，为进一步应用于疫苗及药物等相关研究奠定基础。
邹琴杨光罗红宫晓红孙文平
关键词：肺炎链球菌自溶素酶切免疫活性
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