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国家自然科学基金(NSF30972603)
作品数:
3
被引量:3
H指数:1
相关作者:
杨桂林
李炜
姚红艳
刘威龙
周伯平
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相关机构:
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杨桂林
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1篇
2014
2篇
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利用巨大芽孢杆菌进行艰难杆菌肠毒素A表达、鉴定
2011年
艰难梭状芽孢杆菌(Clostridium difficile)是一种芽孢结构的革兰阳性厌氧杆菌,能引起抗生素相关性腹泻或伪膜性结肠炎,又称医院内相关性腹泻。肠毒素A(TcdA)是艰难梭状芽孢杆菌的主要毒力因子,也被认为是引起艰难芽孢杆菌性腹泻(CDAD)的主要因素。TcdA能使宿主肠上皮细胞的Rho—Rac家族中小GTPase上特定苏氨酸残基糖基化,导致肠壁细胞骨架肌动蛋白结构改变、肠道分泌物增多、急性炎症和结肠黏膜坏疽。
李炜
杨桂林
刘威龙
姚红艳
周伯平
冯汉平
关键词:
巨大芽孢杆菌
肠毒素A
抗生素相关性腹泻
伪膜性结肠炎
GTPASE
艰难梭状杆菌重组肠毒素A和B与对应天然肠毒素蛋白的功能活性比较
被引量:2
2014年
目的肠毒素A(TcdA)和肠毒素B(TcdB)是艰难芽孢梭状杆菌主要的毒力因子,我们对已经获得的纯化的重组蛋白TcdA和TcdB与对应的天然肠毒素蛋白的活性和功能进行了比较。方法通过光学显微镜观察重组肠毒素和对应的天然肠毒素对肠上皮细胞的细胞病变作用、蛋白印迹实验观察对Rac1蛋白的糖基化作用,以及激光共聚焦显微镜观察肠毒素对肠上皮细胞骨架的破坏作用。结果纯化得到重组蛋白肠毒素TcdA和rTcdB其分子量与天然的TcdA和TcdB蛋白大小接近,生物活性与天然的TcdB蛋白相似,TcdA和极微量TcdB具有使肠上皮细胞病变、Rac1蛋白的糖基、细胞骨架塌陷。结论艰难梭状芽孢杆菌肠毒素A和B重组蛋白具有良好的对应天然肠毒素相似的生物学功能活性。
李炜
杨桂林
李美忠
曾积兰
关键词:
艰难梭状芽胞杆菌
生物活性
艰难梭状杆菌肠毒素B在巨大芽孢杆菌中的表达和鉴定
被引量:1
2011年
目的获得高纯度和具有生物活性的重组肠毒素B(rTcdB)。方法以艰难梭状芽孢杆菌染色体DNA为模板,通过PCR方法扩增得到全长TedB基因并克隆至穿梭载体pHisl522。构建的质粒经直接测序验证无误后,转化巨大芽孢杆菌原生质体,在木糖的诱导作用下进行TcdB的表达、纯化及生物活性鉴定。结果从细菌培养液中纯化得到rTcdB,浓度达到5~10mg/L,其相对分子质量与天然的TcdB蛋白接近,生物活性与天然的TcdB蛋白相似。结论在巨大芽孢杆菌中成功表达了具有完整结构和活性的艰难梭状芽孢杆菌TcdB重组蛋白。
杨桂林
刘威龙
姚红艳
周伯平
冯汉平
关键词:
梭菌
肠毒素类
质粒
重组蛋白质类
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