转基因生物新品种培育专项(2008ZX08004-002)
- 作品数：9 被引量：109H指数：6
- 相关作者：李文滨柏锡纪巍才华朱延明更多>>
- 相关机构：东北农业大学黑龙江省农业科学院更多>>
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- 农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化技术流程及操作要点被引量：7
- 2011年
- 大豆遗传转化效率低,是大豆转基因育种亟待解决的重要问题。以大豆子叶节为外植体采用农杆菌介导法,系统地研究了大豆子叶节遗传转化各技术环节的操作要点,包括工程菌液制备、无菌苗获得及外植体制备、农杆菌的侵染及共培养、不定芽诱导、不定芽伸长、根诱导、驯化与移栽、抗性植株的获得及转基因植株的检测等,建立了一套较稳定、高效的大豆子叶节遗传转化体系。并利用该体系,将野生大豆耐盐碱相关基因A1对大豆品种绥农28、合丰50、合丰55、东农50进行遗传转化,系统地探讨了大豆基因型、影响T-DNA的转移效率的各环节、筛选剂浓度及不同基因型转化效率等几个重要因素。
- 赵晓雯吴芳芳狄少康柏锡纪巍李勇才华朱延明
- 关键词：大豆农杆菌介导子叶节
- 两种紫花苜蓿苗期耐盐生理特性的初步研究及其耐盐性比较被引量：49
- 2013年
- 为研究2种紫花苜蓿:肇东苜蓿和农菁1号苜蓿的耐盐程度及其在盐胁迫处理下的生理反应规律,在1/2Hogland营养液水培条件下,用0,50,100,200,300,400mmol/L NaCl溶液模拟盐胁迫处理2种紫花苜蓿幼苗,观察记录各处理的盐害情况,分别测定胁迫前和胁迫3,6,9,12,15,21d的丙二醛(MDA)、叶绿素(Chl)和脯氨酸(Pro)含量,分析了不同胁迫程度和胁迫时间下相关生理指标的变化情况,并采用隶属函数法对二者的耐盐性进行了综合评价。结果表明,低浓度盐胁迫对其生长无显著影响,2种苜蓿具有较强的耐盐性,能够抵抗一段时间较高浓度(200mmol/L)的盐胁迫。随着浓度的增加,MDA含量逐渐升高,但随胁迫时间的延长,在200,300mmol/L处理下,2种苜蓿的MDA含量表现出先增加,后下降,然后又上升的动态变化趋势。随着胁迫浓度的增加和时间的延长,二者受到的盐害逐渐增大,Chl含量逐渐降低,Pro含量大量累积,但二者的Pro累积程度与它们的耐盐表现并不完全一致。综合评价结果表明,在100,200mmol/L NaCl胁迫下,农菁1号苜蓿比肇东苜蓿更耐盐;而300,400mmol/L NaCl处理时,肇东苜蓿的耐盐性大于农菁1号苜蓿。
- 刘晶才华刘莹朱延明纪巍柏锡
- 关键词：肇东苜蓿耐盐性综合评价
- 乙酰丁香酮浓度和共培养pH对大豆再生频率的影响被引量：8
- 2010年
- 农杆菌介导方法是较成熟的遗传转化方法,由于大豆的特殊性使其在转化过程中受很多因素的影响,为了提高大豆的转化频率,对影响农杆菌介导方法转化大豆转化率最大的乙酰丁香酮(AS)和pH两个重要因子进行了研究。结果表明,在农杆菌侵染和共培养阶段的乙酰丁香酮浓度和pH均对大豆转化频率有明显影响,pH5.4～5.6为宜;乙酰丁香酮能显著提高大豆的转化频率,但浓度不宜过高,浓度过高反而降低转化效率,最佳浓度为100μmol·L-1。
- 武小霞李静王志坤刘珊珊李海燕马永李文滨
- 关键词：大豆PH
- 碱胁迫应答GsGASA1及GsGASA2基因表达特性研究被引量：5
- 2012年
- 野生大豆具有很强的抗逆性和适应能力,是利用基因工程手段进行作物抗逆分子育种的重要基因来源供体材料。为了获得具有自主知识产权、在植物渗透胁反应中起关键作用的功能基因,利用前期构建的野生大豆碱胁迫基因芯片表达谱,从中选取两个碱胁迫处理下显著上调表达,经分析预测属于GASA基因家族的基因(probesets分别为Gma.15958.1.S1_at;GmaAffx.90343.1.S1_at),分别命名为GsGASA1、GsGASA2。对上述两个基因进行了芯片结果的sqRT-PCR验证,并分析了其在野生大豆中经盐、干旱、冷胁迫处理下的表达特性。结果表明,GsGASA1、GsGASA2基因对这三种胁迫处理均表现出应答反应,虽然在不同胁迫条件下表达高峰出现的时间和表达强度上存在差异,但均呈现出在短期内显著上调表达的表达模式,推测GsGASA1、GsGASA2基因在非生物胁迫中将起到一定作用。另外,GsGASA1、GsGASA2基因的表达受GA诱导及PAC、ABA的抑制。研究将为下一步GsGASA1、GsGASA2全长基因的克隆及其在非生物胁迫中的功能研究奠定基础,也为研究GA和ABA信号通路的相互作用提供线索。
- 李昆仑柏锡卢姗袁悦李勇纪巍才华季佐军朱延明
- 关键词：野生大豆非生物胁迫
- GsCRCK基因转化农菁1号苜蓿及其耐盐性分析被引量：6
- 2013年
- GsCRCK基因是参与胁迫早期应答的钙/钙调素调控的受体类蛋白激酶基因,研究发现GsCRCK正向调控拟南芥对NaCl和ABA胁迫的耐性,将耐盐蛋白激酶基因GsCRCK转化苜蓿,对于增强苜蓿的耐盐性具有重要的现实意义。本研究采用农杆菌介导法将其转入农菁1号苜蓿,获得大量抗性植株。经PCR和RT-PCR检测证明GsCRCK基因已整合到农菁1号苜蓿基因组中并在转基因植株中转录表达。对获得的2个转基因株系进行耐盐性分析,在300mmol/L NaCl条件下进行胁迫处理,测定处理0,3,6,9,12,15d后的质膜透性、丙二醛(MDA)和叶绿素(Chl)含量,以及胁迫15d时的SOD活性;并统计400mmol/L NaCl处理15d时各株系的死亡率。结果显示,300mmol/L高盐胁迫15d后转基因苜蓿仍能正常生长,而野生型苜蓿则遭受盐害严重;转基因苜蓿的相对电导率极显著低于野生型,MDA含量也显著低于野生型,而Chl含量和SOD活性都显著高于野生型;在400mmol/LNaCl处理下,2个转基因株系的死亡率分别为13.33%和10.00%,明显低于野生型植株(63.33%)。表明GsCRCK基因的导入提高了转基因苜蓿的耐盐性。
- 刘莹才华刘晶柏锡纪巍朱延明
- 关键词：耐盐性
- 大豆农杆菌子叶节转化菌株适宜生长时期及浸染浓度的研究被引量：10
- 2010年
- 在大豆子叶节转化过程中,农杆菌侵染受体材料受多种因素的影响。文章对农杆菌侵染受体的菌株生长时期和浸染浓度进行了探讨。结果表明,菌株生长时期OD600=0.6和菌液的浸染浓度为OD600=0.5时,子叶节抗性芽率最高,利用此结果筛选出对农杆菌具有高度的易感性大豆品种3个,为大豆转化效率的提高奠定了基础。
- 武小霞李静刘伟婷刘珊珊王志坤李文滨
- 关键词：大豆子叶节农杆菌
- 转TaDREB3基因大豆基因漂流距离及频率的研究被引量：1
- 2011年
- 为明确转基因大豆的种植及生态安全性,将导入抗逆基因TaDREB3的转基因大豆T4代播种于大田,周围种植非转基因对照,收获转基因大豆周围不同距离的非转基因大豆种子。经过连续2 a的田间及盆栽试验,通过除草剂草丁膦的筛选和分子检测等手段,研究了转TaDREB3基因大豆的基因漂流距离及漂流频率。结果表明:在三叶期整株喷洒75 mg·L-1的草丁膦是较适宜的抗性植株筛选浓度;在自然条件下漂流距离为1 m的非转基因大豆中检测到1条阳性带,漂流距离为3、5和8 m的非转基因大豆均未检测到阳性带,确定转TaDREB3基因大豆基因漂流距离为1 m,基因漂流频率为0.0348%。
- 张彬彬李永光盖江南李文滨
- 关键词：转基因大豆基因漂流
- 利用花粉管通道法将抗虫基因(cryV)转入大豆的研究被引量：12
- 2010年
- 利用花粉管通道法,在大豆的盛花期将外源抗虫基因(cry V)转入到大豆中,转化成活率达43.88%,成荚率达33.6%。将收获的的种子种植在大豆所温室中,通过卡那霉素筛选、PCR鉴定,Southern-blot检测和RT-PCR检测,共检测出5株阳性植株,确定外源抗虫基因(cry V)已转入到大豆中,转化率达1.8‰。
- 武小霞刘伟婷刘琦李静马永李文滨
- 关键词：大豆花粉管通道法
- 转基因作物的生物安全性管理及安全评价被引量：14
- 2010年
- 随着转基因技术的发展,国内外大量的转基因植物及其产品已进入商业化阶段,中国作为农业大国建立了完善的管理条例和法规等管理体系,以保障人类和环境的安全。本文介绍了国内转基因管理的相关法规、转基因农作物安全评价原则、转基因生物安全评价及转基因植物的食品安全性评价的内容。
- 武小霞张彬彬王志坤姜成涛李文滨
- 关键词：转基因作物安全性管理安全评价
