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利用酿酒酵母转座子文库筛选线粒体镁代谢相关基因被引量：2: 2010年; 镁离子对于维持细胞正常功能十分重要,糖尿病、高血压、慢性呼吸道疾病、骨质疏松、心律失常等多种疾病都与镁代谢失衡有关.MRS2基因编码线粒体镁离子转运蛋白,MRS2缺失会导致酵母线粒体镁离子浓度下降、线粒体内Ⅱ型内含子剪接缺陷和非发酵碳源培养基上的生长缺陷.为了增进对线粒体镁离子代谢调控基因的了解,利用酿酒酵母mTn-lacZ/LEU2转座子文库筛选MRS2的抑制基因,发现线粒体载体家族成员YMR166C基因的缺失可以挽救MRS2基因缺失突变体的生长缺陷、Ⅱ型内含子剪接缺陷,并可以调节线粒体镁离子浓度,首次发现YMR166C是线粒体镁代谢相关基因.; 王娟范强旺周兵; 关键词：酵母线粒体

酿酒酵母全基因组范围内筛选MTM1基因的抑制基因被引量：1: 2010年; MTM1基因对于维持锰超氧化物歧化酶的活性和线粒体正常功能十分重要,MTM1基因的缺失会严重影响酵母锰超氧化物歧化酶活性,并损伤线粒体功能,因此在非发酵培养基上不能生长.利用MTM1基因缺失的突变体在非发酵培养基上的生长缺陷,转入酵母基因组文库筛选MTM1抑制基因,发现MTM1基因缺失造成的损伤一旦形成不可逆转,重新引入MTM1基因也无法挽救,直接筛选无法得到抑制基因.为了避免MTM1缺失造成的不可逆损伤,在野生型酵母中先转入带有MTM1基因的质粒,再敲除染色体上的MTM1基因,随后转入基因组文库,再利用药物5-氟乳清酸(5-FOA)迫使细胞丢失表达MTM1基因的外源质粒,再筛选能在非发酵培养基上生长的转化子,通过这种方法筛选发现,POR2等5个基因的过表达可以挽救MTM1基因缺失造成的非发酵培养基上的生长缺陷,为深入了解MTM1基因的功能提供了线索,对筛选其他造成不可逆损伤的突变基因的抑制基因提供了一条可行的研究思路.; 王娟张玟洁曾雅雪蔡颖周兵; 关键词：酵母抑制基因

利用酿酒酵母转座子文库筛选MTM1基因缺失表型相关基因被引量：3: 2010年; 【目的】MTM1基因对于维持锰超氧化物歧化酶的活性和线粒体正常功能十分重要,MTM1基因的缺失会严重影响锰超氧化物歧化酶活性,并损伤线粒体功能,使酵母在非发酵培养基上不能生长。为加深对MTM1基因功能及其相关基因的研究,尝试利用转座子文库筛选MTM1基因缺失表型相关基因,寻找哪些位置的转座子插入能挽救MTM1基因缺失导致的生长缺陷。【方法】因MTM1基因的缺失造成的损伤不可逆,直接转入文库无法筛选得到MTM1基因缺失表型相关基因,本研究利用外源MTM1基因菌株和mTn-lacZ/LEU2酿酒酵母转座子文库进行筛选,寻找能挽救mtm1突变体生长缺陷的转座子插入位点。【结果】发现转座子插入HSL1和TPS2基因能挽救mtm1突变体的生长缺陷。【结论】我们的结果为深入了解MTM1基因的功能提供了线索。; 王娟张玟洁曾雅雪蔡颖孙驰程周兵; 关键词：酵母

利用黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)研究微量金属元素代谢被引量：1: 2012年; 微量金属参与了生物体许多化学反应过程,同时也可作为蛋白质的辅基或辅因子起作用,对机体生长发育以及正常生物功能的维持具有重要作用;微量金属元素的代谢失衡与生物体许多疾病密切相关,如威尔森氏病、门克斯病、铁色素沉积、肠变性皮炎以及一些神经退行性疾病。黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)是遗传背景清楚、生活周期短、操作方便的模式生物,利用果蝇研究金属离子代谢以及金属离子代谢与疾病的联系具有独特的优势,近年来,随着果蝇基因组测序的完成以及许多转基因果蝇株的建立,果蝇也越来越多的用于金属离子代谢的研究。介绍了近年来果蝇在金属离子代谢研究领域的进展,以及其与神经退行性疾病关系研究上的一些应用。; 黄云鹏周兵; 关键词：微量金属元素铜锌神经退行性疾病

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国家自然科学基金(30871262)