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广东省科技计划工业攻关项目(201280318000290)
作品数:
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李欣
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2013
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激活自噬减轻心肺复苏后Wistar大鼠脑损伤
被引量:8
2013年
目的观察自噬(autophagy)在心肺复苏(CPR)后Wistar大鼠脑损伤中的作用。方法实验一:36只健康成年雄性Wistar大鼠通过体外交流电刺激诱发心室颤动(VF),VF(0)前和ROSC后1、2、4、8、12h取大脑皮层观察beclin-1和LC3Ⅱ的表达。实验二:60只Wistar大鼠随机(随机数字法)分为对照组(contr01)、自噬激活剂雷帕霉素组(Rapamycine)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(3-MA)。VF前1h分别向腹腔内注入生理盐水或雷帕霉素1mg/kg或3一甲基腺嘌呤30mg/kg。ROSC后2、4h取大脑皮层,用电镜和Westernblot方法观察神经元自噬的激活,免疫荧光观察LC3颗粒的形成;24、48、72h进行NDS评分;72h后取大脑皮层行HE染色和TUNEL染色计数顶叶皮层存活神经元细胞数和凋亡神经元细胞数。beclin-1、LC3Ⅱ表达和神经元计数用单因素方差分析,NDS比较用秩合检验。结果实验一中28只Wistar大鼠复苏成功。ROSC后2、4h自噬基因beclin-1和LC3Ⅱ的表达明显低于VF前(P〈0.05),而ROSC后8、12h的表达与VF前差异无统计学意义。Rapamycine组动物ROSC后2、4h大脑皮层beclin-1的表达和LC3Ⅱ的转换明显高于Control组和3-MA组,P〈0.05。ROSC后2、4hRapamycine组自噬泡数量明显多于Control组和3-MA组;ROSC后4hRapamycine组LC3颗粒数也明显多于Control组和3-MA组。ROSC后72hRapamycine组动物大脑皮层存活的神经元细胞数多于Control组和3-MA组(P〈0.05);凋亡神经元细胞数Rapamycine组少于Control组和3-MA组(P〈0.05)。ROSC后24、48、72hRapamycine组的NDS评分优于control组和3-MA组(P〈0.05)。结论ROSC后早期大脑皮层神经元beclin-1和LC3-Ⅱ表达下降,通过雷帕霉素促进beclin-1和LC3-Ⅱ表达可以保护神经元细胞和改善神经功能。
曾小云
熊海霞
李欣
夏金明
魏红艳
廖晓星
胡春林
荆小莉
关键词:
心肺复苏
脑损伤
自噬
BECLIN-1
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