国家重点基础研究发展计划(2011CB964701)
- 作品数：18 被引量：61H指数：5
- 相关作者：张波陈鹏张连阳李磊翁土军更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院第三军医大学成都军区总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 成纤维细胞生长因子受体2持续增强对骨髓间充质干细胞软骨成骨的影响被引量：4
- 2012年
- 目的利用基因敲人技术建立模拟人Apert综合征的成纤维细胞生长因子受体2（FGFR2）$252W小鼠模型，探讨FGFR2功能持续增强的小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）成软骨诱导分化后表达特征。方法于出生后6周获取BMSCs增殖进行检测。取生长良好的第2代细胞成软骨诱导，对诱导后14d进行阿利新蓝、茜素红染色，对成软骨、成骨基因进行定量分析，并对信号通路细胞外信号调节激酶（Erk）1／2磷酸化观察。结果FGFR2功能突变小鼠BMSCs增殖速度减慢。体外成软骨诱导条件下，突变组BMSCs阿利新蓝和茜素红染色程度下降。定量分析突变组成软骨相关基因是野生组80％（Colx）、88％（ColⅡ）（P〈0．05），成骨表达基因是野生型1．23（OC）、1．38（OP）倍（P〈0．05）。FGFR2功能持续增强使BMSCsErkl／2磷酸化增强。结论FGFR2可能不仅具有调控成骨细胞株发育的功能，还具有调控软骨细胞株发育的重要功能。FGFR2功能持续增强导致小鼠BMSCs增殖减慢，成软骨发育障碍，虽对成骨分化增强，却抑制矿化过程，这其中机制可能与Erk1／2通路增强有关。
- 陈鹏张波张莉张连阳
- 关键词：成纤维细胞生长因子受体2骨髓间充质干细胞软骨细胞分化细胞外信号
- FGFR2功能获得性突变对长骨发育过程的影响被引量：6
- 2013年
- 目的对比观察Fgfr2+/S252W突变型小鼠和同窝野生型小鼠长骨的生长发育情况,探讨FGFR2功能持续增强对软骨内成骨过程的影响。方法采用经基因敲入技术建立的模拟人Apert综合征的Fgfr2+/S252W小鼠模型,经繁殖、鉴定后分为Fgfr2+/S252W功能获得突变型和同窝野生型。于出生后7、10、14、28d分别处死突变型和野生型小鼠各3只,对长骨进行长度测量、X线检查及Micro CT检查,另取部分长骨标本进行HE染色和免疫组化染色观察。结果 Fgfr2+/S252W突变小鼠呈典型Apert综合征圆颅和短颅畸形,体形发育缓慢,体长、四肢长度明显小于同窝野生小鼠,且长骨发育障碍,第二骨化中心延迟出现,骨密度及骨小梁数量低于同窝野生型小鼠。组织学观察可见突变小鼠胫骨近端生长板软骨细胞增殖区和肥大区厚度缩短,细胞排列不及野生型整齐,肥大软骨细胞体积小,免疫组化检测显示软骨相关增殖、分化基因表达均减弱。结论 FGFR2功能持续增强可导致小鼠长骨发育障碍。FGFR2可能具有调控成骨细胞系及软骨细胞系发育的功能,在骨骼发育等方面发挥重要作用。
- 陈鹏张波张莉张连阳
- 关键词：骨生成
- 趋化因子及其受体在神经干/祖细胞迁移中的作用
- 2011年
- 近年来的研究发现，在胚胎和成年的中枢神经系统及外周神经系统中都存在神经干／祖细胞（NSCs／NPCs）。这类神经干细胞具有多向分化的潜能，并表现出相应的形态和电生理特征。神经干细胞的研究使人们对神经系统的发育、神经元的再生及神经干细胞在神经系统疾病或损伤的修复中所起的作用等方面有了新的认识。
- 石丹李磊
- 关键词：神经干细胞细胞迁移趋化因子外周神经系统受体
- 急进高海拔地区血氧饱和度和心率变化的研究被引量：10
- 2015年
- 目的观察平原人员急进高海拔地区后血氧饱和度、心率的变化,为高原地区医学救援提供参考。方法受试者从平原地区（海拔400m）出发,出发前测定血氧饱和度、心率,乘飞机到达海拔4 300m地区时测定血氧饱和度、心率;之后乘车到达海拔3 200m目的地后动态连续监测血氧饱和度、心率,分别在到达后第1~7天测定血氧饱和度、心率;受试者在海拔3 200m地区适应1周后乘车复返海拔4 300m地区,再次测定血氧饱和度、心率。结果进入海拔4 300、3 200m地区后血氧饱和度明显下降,与平原地区血氧饱和度差异有统计学意义（P〈0.05）。进入海拔3 200m地区后第6、7天血氧饱和度与第1天比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。受试者乘飞机到达海拔4 300 m地区和乘车复返海拔4 300 m地区的氧饱和度差异有统计学意义（P〈0.05）,心率间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论随着海拔的增高,动脉血氧饱和度随之下降,平原人员急进海拔3 200m地区第6天能初步适应,在较低海拔地区短时间适应后再进入高海拔地区人体能更好地适应。
- 彭翠翠王劲金婕钟前进童卫东周林
- 关键词：心率血氧饱和度急进高原
- p38信号通路在成纤维细胞生长因子受体2持续增强对软骨内成骨过程的影响被引量：3
- 2014年
- 目的基因敲入技术建立成纤维细胞生长因子受体2（FGFR2）功能持续增强小鼠模型（FGFR2S252W/＋），观察p38信号通路在FGFR2功能持续增强对软骨内成骨过程的影响。方法获取出生后6周小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）进行体外培养并进行成软骨诱导。Westernblot检测p38信号蛋白，逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）比较野生型及突变型Ⅱ型胶原（Col2）、X型胶原（Col10）、OC、OP基因表达，加入p38信号通路阻滞剂SB203580后再次比较相关基因表达。体外胚胎骨培养观察p38信号通路在FGFR2功能持续增强对软骨内成骨过程的影响。结果体外BMSCs成软骨诱导后，FGFR2功能突变小鼠BMSCs表达p38蛋白磷酸化增强，表达Col2、Col10减弱，但OC、OP基因表达强于野生型；加入p38信号通路阻滞剂SB203580后，BMSCs基因表达量明显增高，表达c012、Col10为原来1．30±0．07、1．94±0．13，表达OC、OP为原来1．97±0．17、1．50±0．10。胚胎骨体外培养可见SB203580治疗能纠正软骨内成骨发育障碍，使胫骨的总长度及钙化组织长度明显增长。结论FGFR2下游p38信号通路对软骨内成骨过程影响巨大，其信号通路阻滞剂对软骨内成骨发育障碍有救治作用。
- 陈鹏张凡喜周玉峰张波
- 关键词：成纤维细胞生长因子受体2P38信号通路骨髓间充质干细胞
- 大鼠早期骨关节炎软骨下骨结构与骨改建相关基因表达研究被引量：4
- 2016年
- 目的考察创伤性关节炎早期软骨下骨的微结构变化和基因表达变化,探索软骨下骨的骨重建特点及其在关节软骨退变中的作用。方法选择13只SD大鼠,利用内侧半月板撕裂(MMT)模型模拟创伤性骨关节炎,右侧膝关节行MMT手术,左侧行假手术,术后3周处死大鼠并取膝关节组织标本4%PFA固定。取10只SD大鼠的造模侧及对照侧胫骨关节,利用microCT扫描并重建分析软骨下骨的微结构变化。标本脱钙后石蜡包埋切片,番红O固绿染色,普通光学显微镜观察摄片。另取3只SD大鼠,提取软骨下骨的组织RNA,RT-PCR检测两组之间骨形成标志基因(ALP、RUNX2、OCN)与骨吸收相关基因(TRAP、CTSK、MMP9)mRNA水平的表达变化。结果 MMT术后3周,胫骨关节micro-CT扫描显示模型组软骨下骨的小梁骨结构紊乱,软骨下骨小梁骨的骨体积分数(BV/TV)、骨小梁连接密度(Conn.D)、骨小梁厚度(Tb.Th)降低(P<0.05),骨小梁间隔(Tb.Sp)增大(P<0.05)。组织病理结果显示,模型组关节软骨未发生明显结构变化、软骨下骨骨小梁结构稀疏。与对照组比较,模型组骨形成标记基因mRNA表达水平降低(P<0.05),骨吸收相关基因mRNA表达水平升高(P<0.05)。结论大鼠膝关节内侧MMT诱导的创伤性骨关节模型早期,软骨下骨体积分数降低、骨小梁厚度变薄,成骨细胞的标志基因表达下降,破骨细胞的功能基因表达增加。
- 兰贵华张波刘苹翁土军邓蔓菁
- 关键词：骨关节炎软骨下骨MICRO-CT
- 间充质干细胞在肾损伤修复中的作用被引量：1
- 2011年
- 综观全球，肾功能衰竭是最主要的健康问题之一，它具有较高的发生率和病死率。文献报道，预计到2015年，美国终末期肾病的发生率很有可能继续增加。仅2007年，美国投人到终末期肾病的医疗费用是20．8亿美元，占其医药总预算的5．8％。虽然在过去几年里肾移植治疗已取得显著进展，但供体的严重缺乏以及移植后出现的免疫排斥问题一直都很难取得实质性突破。因此，寻求有效的治疗方法是肾脏疾病研究的重点。
- 李凤麒韩莹李磊
- 关键词：肾功能衰竭间充质干细胞终末期肾病免疫排斥
- 脂肪来源干细胞膜片与支持材料结合能力的初步探讨被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨大鼠脂肪来源干细胞体外构建细胞膜片方法,并分析其同牙本质磨片和CBB(ceramic bovine bone,CBB)颗粒的结合能力和增殖影响。方法:从出生7d大鼠体内提取脂肪组织并获得纯化的脂肪来源干细胞(ADSCs,adipose-derived mesenchymal stem cell),采用四唑盐(MTT)比色法检测ADSCs增殖能力的变化;ADSCs经多向诱导分化后检测其向成骨细胞、脂肪细胞、成软骨细胞分化能力;ADSCs体外构建细胞膜片后,电镜下观察ADSCs膜片与CBB颗粒和牙本质磨片的结合能力,MTT比色法检测ADSCs和ADSCs膜片在材料上的增殖能力。结果:纯化的ADSCs具有良好的增殖能力,经体外诱导培养后向成骨细胞、脂肪细胞、成软骨细胞分化,电镜结果表明ADSCs膜片与牙本质磨片结合能力优于CBB颗粒,ADSCs膜片在牙本质磨片上的增殖能力优于CBB颗粒。结论:体外培养的大鼠脂肪来源干细胞具有种子细胞的特性,体外构建细胞膜片后与牙本质磨片的结合能力和增殖能力高于CBB颗粒,为细胞膜片治疗牙周缺损奠定基础。
- 李芳菲刘娜杨曦兰贵华邓蔓菁
- 关键词：脂肪来源干细胞牙周组织再生
- BMSCs膜受体CXCR4和CXCR7表达及其在骨创伤修复中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨BMSCs膜表面受体CXCR4和CXCR7的表达及其在BMSCs迁移中的作用,为骨创伤修复提供理论依据.方法 选择C57BL/6小鼠经贴壁法培养获得第2代BMSCs,免疫荧光染色法和流式细胞技术检测BMSCs膜表面受体CXCR4和CXCR7的表达.趋化因子CXCL12诱导BMSCs迁移实验分为对照组（无血清培养基诱导BMSCs迁移）、CXCL12组（含CXCL12无血清培养基诱导BMSCs迁移）和CXCR4阻断组（含CXCL12无血清培养基诱导阻断膜受体CXCR4后BMSCs迁移）,统计BMSCs迁移数量,观察CXCR4和CXCR7趋化BMSCs迁移的作用.采用Western blot检测阻断膜表面受体CXCR4后CXCR7蛋白的表达.结果 免疫荧光结果显示大量BMSCs膜表面表达CXCR4和CXCR7.流式细胞仪检测结果显示BMSCs膜表面分子CXCR4的阳性率为96.4％,CXCR7的阳性率为97.3％.细胞迁移结果显示,CXCL12组BMSCs迁移量最高,CXCR4阻断组BMSCs迁移量显著低于CXCL12组但迁移量仍高于对照组（P＜0.01）,而阻断XCCR4后CXCR7蛋白表达升高.结论 CXCR4和CXCR7受体均表达于BMSCs膜表面,在CXCL12调节BMSCs迁移至骨创伤创面过程中CXCR4发挥主要作用.
- 李芳菲张波刘苹翁土军罗刚邓蔓菁
- 关键词：间质干细胞
- FGFR2功能增强对小鼠下颌骨髁突发育影响被引量：1
- 2015年
- 成纤维细胞生长因子受体2(Fibroblast growth factor receptor,FGFR2)是参与调控骨骼发育的重要分子,在调控软骨内成骨过程中发挥着重要作用。为了探讨FGFR2功能增强对小鼠下颌骨髁突生长发育的影响,文章以FGFR2功能增强型点突变(Fgfr2+/S252W)小鼠为研究对象,采用番红固绿染色研究Fgfr2+/S252W小鼠下颌骨髁突不同生长发育阶段的组织形态;利用免疫细胞化学染色和实时荧光定量PCR方法检测X型胶原(Col X)在3周龄小鼠髁突肥大软骨细胞中的表达。结果显示,1周龄、3周龄和6周龄突变型小鼠下颌骨髁突的软骨细胞层宽度都比同窝野生型窄,钙化软骨细胞层退化时间早,骨小梁钙化绿染程度深;Col X在突变型小鼠下颌骨髁突的表达高于同窝野生型小鼠(P<0.001)。结果表明,FGFR2功能增强可导致小鼠下颌骨髁突软骨层组织形态异常,抑制髁突软骨内成骨,从而导致下颌骨髁突发育畸形。
- 梁鑫张波刘苹翁土军张莉贺龙珠李芳菲屈晨王萍
- 关键词：下颌骨髁突成纤维细胞生长因子受体2
