国家自然科学基金(30570521)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：康向东吴蓉华蕾马艳春张隆更多>>
- 相关机构：上海中医药大学附属普陀医院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人源化甲状腺球蛋白单链抗体FR区突变对其抗原结合力的影响
- 2010年
- 筛选具有活性人源化甲状腺球蛋白单链抗体,并探索FR区基因突变对人源化甲状腺球蛋白单链抗体抗原结合力的影响。利用噬菌体展示技术克隆Tg人源化抗体基因,获得FR区基因突变的克隆,鉴定并分析其对单链抗体抗原结合力的影响。通过基因序列分析,突变类型共有3种:FR-3区Met91→Ile91、FR-4区Gln117→His117及两种突变同时存在。抗原结合力实验显示,突变单链抗体与抗原的结合活性显著降低。软件分析显示:突变造成了抗体的CDR区及FR区空间结构的细微变化,抗体疏水性、亲水性及电势也明显发生改变。获得了具有活性的人源化甲状腺球蛋白单链抗体,FR区的突变对人源化甲状腺球蛋白单链抗体的抗原结合力影响显著。
- 吴蓉胡玉娜孙健赵晓艳康向东
- 关键词：甲状腺球蛋白人源化抗体噬菌体展示技术
- 抗人甲状腺球蛋白人源化单克隆抗体的制备被引量：1
- 2009年
- 目的获得抗人甲状腺球蛋白(hTg)人源化单克隆抗体。方法从分泌抗人甲状腺球蛋白的杂交瘤细胞株hTg-60中提取总RNA,逆转录-酶链聚合反应(RT-PCR)扩增出鼠源性单克隆抗体hTg-60的VH及VL基因,经基因测序分析,设计出人源化抗体的基因引物,获得抗Tg单克隆抗体人源化VH及VL基因并将其克隆入真核表达载体,转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),表达人源化抗hTg抗体。结果成功获得了6株能稳定分泌抗hTg人源化抗体的细胞株。结论为进一步获得人源化的hTg抗体及临床应用奠定了基础。
- 康向东马艳春张隆吴蓉华蕾
- 关键词：甲状腺球蛋白人源化抗体单克隆抗体
