国家高技术研究发展计划(2006AA020103)
- 作品数：57 被引量：171H指数：7
- 相关作者：方慧英诸葛健饶志明方柏山沈微更多>>
- 相关机构：华侨大学江南大学抚顺石油化工研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程理学更多>>
- 温度对丁酸梭菌发酵废甘油生产1,3-丙二醇的影响及控制策略
- 在丁酸梭菌发酵废甘油生产1,3-丙二醇的过程中,温度对菌体生长和1,3-丙二醇的合成有重要的影响。考察了不同温度对1,3-丙二醇分批发酵动力学参数的影响。在恒温发酵中,较高的温度(37℃)能促进细胞快速进入对数生长期,加...
- 朱春杰方柏山
- 关键词：丁酸梭菌1,3-丙二醇温度控制策略
- 海洋微生物氧化还原酶系的挖掘
- ＜正＞海洋极端环境中孕育了独特的生物类群,尤其是微生物资源十分丰富。因此极端微生物在新基因、新酶、新蛋白开发等方面的应用潜力极大。源于海洋微生物酶类的开发和利用是海洋微生物研究的一个重要方向。通常海洋生物代谢过程中产生的...
- 方柏山温卫卫余晶梅周小芬王世珍
- 文献传递
- 吸附树脂在酶法制备1,3-丙二醇中的应用被引量：2
- 2008年
- 筛选出了对辅酶NAD、酶蛋白弱吸附(吸附率分别为10%,9%),对产物1,3-丙二醇(1,3-PD)与二羟基丙酮(DHA)强吸附(吸附率分别为30.5%,34.5%)的吸附树脂SIPI-40,并进行产物的吸附分离,达到酶与辅酶回流利用、反应连续进行的目的,并应用于伴有辅酶NADH再生的酶法催化甘油(Gly)制备1,3-PD的新型反应体系的构建;经单因素考察,确定较佳操作条件是:树脂质量与底产物浓度数值比大于1.4:1,吸附时间为2h;在此条件下进行反应操作,测得每批次反应中1,3-PD相对于甘油的产率稳定在20%左右(分别为22.5%,20.6%与19.3%);在连续催化反应中,1,3-PD总产率达45.3%。实验结果说明,吸附树脂分离产物可应用于1,3-PD酶法连续反应体系的构建。该研究工作的新颖性,已为厦门市科学技术情报研究所2006年12月11日出具的第2006581号《科技查新报告》所证实。
- 彭益强兰琳陈巍方柏山
- 关键词：吸附树脂辅酶再生3-丙二醇酶法生产
- 树脂分离技术在酶法制备1,3-丙二醇中的应用被引量：3
- 2008年
- 从几种吸附树脂中筛选出了树脂DA201。树脂DA201对酶、辅酶吸附较少(吸附率分别为13.13%,14.5%)且对酶活无较大破坏,对产物1,3-丙二醇(1,3-PD)与二羟基丙酮(DHA)吸附较多(吸附率分别为23%,27%)。利用树脂DA201进行产物的富集分离及酶、辅酶回流再利用,实现伴有辅酶NADH再生的1,3-PD酶法连续反应。在底物浓度为1 g/L时,树脂质量浓度为底物浓度的4.8倍、吸附时间为6 h,树脂DA201对底产物有较好的吸附分离效果。在此条件下进行1,3-PD的2个批次连续制备,第1、第2批次1,3-PD转化率分别为42.9%、35.5%,总转化率为39.72%。实验结果说明,吸附树脂对底产物、酶与辅酶具有一定的分离作用,利用树脂的分离作用可有效地实现伴有辅酶再生的酶催化反应的连续进行。
- 彭益强兰琳陈巍方柏山
- 关键词：酶法制备辅酶再生1,3-丙二醇
- 菌株Bacillus sp ST06-95转化植物甾醇为雄甾烯酮发酵条件的优化被引量：3
- 2008年
- 利用本研究室筛选获得的Bacillus sp ST06-95为出发菌株,对植物甾醇进行选择性侧链降解制备雄甾-4-烯-3,17-二酮(AD)和雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)。对转化条件如底物浓度、投料方法、投料时间进行了摸索,对发酵初始pH、转化时间、发酵温度、接种量、培养基组成等进行了优化。结果表明,用0.4%的Tween80配合超声波溶解、底物浓度为0.5%、菌体未生长时投加底物转化效果最佳。最佳发酵条件为:初始pH7.0、接种量12%、发酵温度30℃、发酵时间160h,发酵培养基中甘油与葡萄糖的含量为1∶4。在最佳转化条件下产物ADD与AD的得率从优化前的29.5%提高到42.5%,其中ADD与AD的含量比值大约为4∶1。
- 廖伟宏饶志明沈微方慧英诸葛健
- 关键词：植物甾醇微生物转化17-二酮17-二酮
- 利用荧光蛋白研究产甘油假丝酵母胞浆3-磷酸甘油脱氢酶基因CgGPD启动子被引量：7
- 2008年
- 【目的】克隆产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)胞浆3-磷酸甘油脱氢酶基因CgGPD的启动子(PCggpd),并通过报告基因gfp的差异表达来研究葡萄糖浓度对PCggpd在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中的诱导特性。【方法】采用PCR扩增的方法分别从产甘油假丝酵母基因组和pCAMBIA1302载体中克隆出CgGPD的启动序列PCggpd和绿色荧光蛋白基因gfp。将两个基因同时构建到酿酒酵母表达载体pYX212-zeocin中,构建时将绿色荧光蛋白基因gfp置于CgGPD的启动序列下游,获得重组质粒pYX212-zeocin-PCggpd-gfp。通过电击转化酿酒酵母W303-1A。将重组酿酒酵母S.cerevisiae W303-1A-GFP置于不同葡萄糖浓度培养基中进行培养,利用荧光显微技术对其进行荧光检测。【结果】重组酿酒酵母能产生稳定的荧光,当葡萄糖浓度为2%时,重组酿酒酵母在YEPD培养基中产生较弱的荧光,随着葡萄糖浓度的升高,荧光强度有明显的增强。【结论】PCggpd属于环境胁迫诱导型启动子,高浓度的葡萄糖能诱导PCggpd启动绿色荧光蛋白的高水平表达,这对完善产甘油假丝酵母的遗传背景研究,阐明其高产甘油的机理具有重要意义。
- 丁春生饶志明诸葛斌沈微陈献忠方慧英诸葛健
- 关键词：产甘油假丝酵母
- 离子交换在1,3-丙二醇发酵液脱盐中的应用被引量：9
- 2011年
- 针对1,3-丙二醇发酵液分离提取过程中的脱盐难点问题,采用离子交换方法对1,3-丙二醇发酵液的脱盐进行了研究。选用D001强酸性阳离子交换树脂及D354弱碱性阴离子交换树脂,进行了静态、动态及连续交换工艺的实验,并对阳、阴离子交换树脂交换顺序进行了考察。结果表明,离子交换方法用于发酵液的脱盐工艺具有良好的效果,阳、阴两种离子交换树脂的交换、再生性能稳定,交换后的料液完全能够满足后续工艺的要求,为生物法1,3-丙二醇发酵液分离提取提供了一个新的工艺手段。
- 谢小莉崔克娇王崇辉佟明友
- 关键词：1,3-丙二醇发酵离子交换
- 固定化Klebsiella penumonia制备3-羟基丙醛被引量：2
- 2007年
- 用溶胶-凝胶(sol-gel)法包埋克雷伯杆菌细胞转化甘油制备3-羟基丙醛(3-HPA),考察了凝胶制备中的反应前驱体、改性剂对固定化细胞发酵水平的影响。结果表明,前驱体采用硅酸钠(sodiumsilicate),3-HPA发酵水平较采用正硅酸乙酯(TEOS)的提高了57.14%;改性剂采用聚乙二醇、葡萄糖、麦芽糖,3-HPA发酵水平分别为不添加改性剂时的110%,98.12%和90.1%。以硅酸钠为前驱体,不添加改性剂和添加不同改性剂固定化克雷伯杆菌细胞后,连续发酵7个批次,前者3-HPA发酵水平维持在70%～80%,后者3-HPA发酵水平分别稳定在80%～93.5%,69%～78%,78%～83%。添加聚乙二醇的固定化细胞保持了较高的3-HPA发酵水平,在批次发酵中它的3-HPA总得率保持在0.480～0.561g/g。
- 彭益强林芳王园园方柏山
- 关键词：3-羟基丙醛克雷伯杆菌固定化溶胶-凝胶生物工程
- 腺苷钴胺素合成酶基因cobs的克隆及其在产1,3-丙二醇菌中的应用
- 2010年
- 甘油脱水酶是催化由甘油到1,3-丙二醇过程中的关键酶,它需要在辅酶B_(12)存在的情况下才能有效的进行催化;而在此催化过程中甘油脱水酶会出现失活现象,研究表明辅酶B_(12)可以有效的促使甘油脱水酶复活。因此,辅酶B_(12)在由甘油生物催化生产1,3-丙二醇过程中起到非常重要的作用。本研究利用PCR扩增技术,从Escherichia K-12菌株中扩增出产VB_(12)关键酶—腺苷钴胺素合成酶基因cobs,其序列与NCBI上已经公布的序列比对,同源性为99.6%,将基因cobs与产1,3-丙二醇关键酶基因dhaB、yqhD在Klebsiella pneumoniae中共表达,发酵结果显示重组菌所需额外添加的VB_(12)由原始菌株的0.01 g/L下降到0.004 g/L。
- 陈祥军诸葛斌方慧英诸葛健
- 关键词：1,3-丙二醇克雷伯氏菌
- 生物柴油副产物甘油发酵生产1,3-丙二醇的研究被引量：4
- 2010年
- 对利用不同生物柴油副产物粗甘油发酵生产1,3-丙二醇的试验条件进行了研究。批次发酵试验结果表明:精制甘油(纯度>98%)、生物柴油副产物粗甘油A(纯度83%)和B(纯度78%)及C(纯度68%)生成1,3-丙二醇的转化率分别为52.38%、48.08%、45.22%、39.95%;精制甘油、粗甘油A和B及C的流加补料发酵合成1,3-丙二醇的转化率分别为51.45%、44.63%、41.27%、35.39%。经济效益粗略评估分析表明,生物柴油副产物粗甘油A和B生产单位1,3-丙二醇较精制甘油成本低,生物柴油副产物粗甘油C却较精制甘油成本高。
- 胡秋龙郑宗明刘灿明刘德华刘祥华
- 关键词：1,3-丙二醇发酵
