湖北省科技计划项目(2010CDB10705)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 相关作者：柳长柏王琥张洁马节兰赵雪丽更多>>
- 相关机构：三峡大学更多>>
- 发文基金：湖北省科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 穿膜肽凋亡素融合蛋白诱导黑色素瘤细胞凋亡的实验研究
- 2017年
- 目的探讨新型细胞穿膜肽h PP10和凋亡素Apoptin融合蛋白介导小鼠黑色素瘤细胞B16凋亡的效应。方法构建p ET15b-h PP10-Apoptin、p ET15b-Apoptin原核表达质粒,经IPTG诱导和NI-NTA树脂纯化后得到融合蛋白;运用TUNEL法体外检测h PP10-Apoptin诱导B16细胞的凋亡效应;制备荷瘤小鼠模型,并在体内检测h PP10-Apoptin融合蛋白的抗肿瘤能力。结果融合蛋白h PP10-Apoptin经Western blot鉴定正确,且此融合蛋白能在体内外有效诱导B16黑色素瘤细胞凋亡。结论新型细胞穿膜肽h PP10可有效携带Apoptin穿透细胞膜并发挥抗肿瘤作用。
- 赵雪丽宋阳张明柳长柏王琥
- 关键词：蛋白转导凋亡素细胞凋亡
- 蛋白片段互补分析方法及其应用被引量：2
- 2013年
- 蛋白片段互补分析技术是近年发展起来的一种分析蛋白质-蛋白质相互作用的新方法。典型的蛋白片段互补分析技术已经成功地利用二氢叶酸还原酶,β-内酰胺酶,绿色荧光蛋白以及荧光素酶片段互补进行胞内蛋白分子相互作用研究。这一技术不仅可以动态、定位分析细胞内蛋白质分子相互作用、绘制细胞内信号传导、蛋白质生物化学网络,还可以应用到蛋白质文库、cDNA文库和高通量药物筛选等。综述了蛋白片段互补分析技术的原理、方法及其应用。
- 张洁柳长柏
- 关键词：蛋白相互作用高通量药物筛选
- 病毒入胞机制对载药多肽设计的启示被引量：1
- 2011年
- 目的了解病毒入胞、内含体逃逸等机制,从中得到启发为进一步设计开发高效智能、仿病毒载药工具提供帮助。方法纵观在长期的进化过程中病毒因宿主的杀伤压力,为生存、复制延续所形成的独特的跨膜、内含体逃逸以及亚细胞器定位等本领,揭示其给我们在仿病毒载药多肽设计开发方面的启示。结果与结论对病毒感染机制全面、深入的了解,有助于我们利用病毒逃避宿主杀伤机制,为设计、研发高效率非病毒载药多肽提供新思路。
- 马节兰柳长柏
- 关键词：病毒药物输送
- 绿色荧光蛋白-流感病毒血凝素蛋白-宫颈癌细胞特异性穿膜肽融合蛋白的表达及其体外穿膜活性分析
- 2016年
- 目的获得具备从内含体逃逸的宫颈癌特异性穿膜肽GFP-HA-PTP融合蛋白,探讨其在宫颈癌细胞中的靶向穿膜效应。方法构建p ET15b-GFP-HA-PTP融合原核表达质粒,并转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导和NI-NTA树脂纯化得到融合蛋白,经Western blotting分析确认后,于荧光显微镜下观察GFP-HA-PTP的靶向穿膜活性。结果大肠杆菌高效表达了经Western blot鉴定正确的FP-HA-PTP融合蛋白,且此融合蛋白能够靶向宫颈癌细胞株Siha和Caski,并高效地从内含体中逃逸进入胞浆。结论 GFP-HA-PTP融合蛋白能够高效靶向穿膜进入培养宫颈癌细胞。
- 王琥柳长柏
- 关键词：宫颈癌
