国家自然科学基金(30570545)
- 作品数：15 被引量：29H指数：3
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- 相关机构：军事医学科学院解放军第307医院中国医学科学院放射医学研究所更多>>
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- 巨噬细胞和MMP-9对肺成纤维细胞增生及合成Ⅳ型胶原的作用被引量：1
- 2006年
- 目的探讨放射性肺纤维化早期启动的发生机制。方法灌洗收集经^60Coγ射线照射后的Wistar大鼠肺泡巨噬细胞制备条件培养液，刺激培养的人肺成纤维细胞增生，用MTT法检测细胞增生活力，Western blot检测细胞合成Ⅳ型胶原含量的改变，酶谱分析检测细胞基质金属蛋白酶-9的活性。结果经条件培养液刺激后，人肺成纤维细胞的增殖活力明显增加，在48～72h之内作用明显HLF合成Ⅳ型胶原增多，12h达高峰，随后有所下降；12h后基质金属蛋白酶．9活性开始增高，于48h达高峰，72h开始下降。结论20Gy^60Coγ射线能刺激AM分泌某些细胞因子促进肺间质成纤维细胞增生及合成Ⅳ型胶原，与此同时后者能激活基质金属蛋白酶-9，降解增多的Co Ⅳ，参与肺损伤早期的重建过程。
- 宋良文孙丽刁瑞英李杨张勇尹纪业
- 关键词：放射性肺损伤肺泡巨噬细胞基质金属蛋白酶-9
- 应用天青石蓝B染色及偏振光显微镜显示肺内Ⅳ型胶原的方法
- 2008年
- 王少霞刁瑞英尹纪业宋良文
- Ⅳ型胶原、MMPs和TIMPs在放射性肺损伤重建中的作用被引量：3
- 2007年
- 目的探讨Ⅳ型胶原、基质金属蛋白酶（MMPs）及其组织基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）在放射性肺损伤早期重建中的作用。方法用20研Gy^60Coγ射线照射大鼠右胸部，建立放射性肺损伤模型，1、2、4周后分别取材；用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法，从基因表达和蛋白质合成水平结合图像分析对肺组织Ⅳ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2 mRNA进行定量分析。结果实时定量PCR基因检测：Ⅳ型胶原表达于1周时升高，2周时下降；MMP-2在2周时达高峰，与Ⅳ型胶原成相反变化趋势；MMP-9呈明显的升高、下降、再升高趋势，与Ⅳ型胶原变化趋势相同；TIMP-1表达较低，各时间点之间无明显差异；TIMP-2呈现略升高、降低、升高趋势，与MMP-2表达相反。免疫组化-图像分析：肺组织Ⅳ型胶原含量于1周即明显增加，2周开始下降；MMP-2在2周时下降，随后升高，后期与Ⅳ型胶原呈相反趋势；MMP-9变化趋势同Ⅳ型胶原，但程度明显高于后者；TIMP-1于2周时轻度升高，与MMP-9趋势相反。结论Ⅳ型胶原、MMP-2和MMP-9及其组织抑制物参与放射性肺损伤早期的无效重建过程，MMP-2和MMP-9具有降解Ⅳ型胶原作用；Ⅳ型胶原降解障碍可能与肺纤维化启动有一定关系。
- 刁瑞英宋良文王少霞尹纪业
- 关键词：MMPTIMP
- TGF-β1在照射后肺损伤早期重建中的作用研究被引量：1
- 2007年
- 探讨TGF-β1在放射性肺损伤早期肺组织重建中的作用。用酶标记免疫吸附测定法(Enzyme-labeled immunosorbent assay,ELISA)检测照射后不同时期(1、2和4周)大鼠血清中TGF-β1的水平变化;用甲基噻唑基四唑比色法(Methyl thiazolyl tetrazolium colourimetry,MTT)检测照射后4周大鼠血清对人肺成纤维细胞(Human lung fibroblast,HLF)的促增殖作用;用ELISA检测HLF经大鼠血清刺激后合成分泌MMP-9(Matrix metalloproteinases-9,MMP-9)和Ⅳ型胶原的作用。照射后不同时间提取的大鼠血清中TGF-β1水平从2至4周逐渐增加;照射后大鼠血清能促进HLF增殖,10%血清浓度的培养液促细胞增殖的作用最强;受照后大鼠血清不但能促进Fb增生,而且能显著促进HLF合成释放IV型胶原和MMP-9。放射性肺损伤早期肺组织TGF-β1表达增加,进而促进肺成纤维细胞增生、合成和释放IV型胶原和MMP-9,参与早期肺损伤的组织重建过程。
- 刁瑞英宋良文王少霞李明徐新萍
- 关键词：TGF-Β1MMP-9成纤维细胞
- 吡啡尼酮对抗放射所致肺成纤维细胞转化的作用研究
- 2010年
- 目的探讨放射性肺损伤过程中吡啡尼酮对抗肺成纤维细胞（Fb）向肌成纤维细胞（MFb）转化的作用。方法将Wistar大鼠随机分为正常对照组、单纯照射组和照射＋给药组，照射前2d开始灌胃给予吡啡尼酮，用20Gy ^60Co γ射线进行全胸照射，于照射后2周应用图像分析测定肺组织放射性炎性反应范围的面密度；计算肺组织湿／于重比；免疫组化检测肺组织成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达。应用免疫细胞化学和四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法分别检测人肺成纤维细胞（HLF）表达TGF—β1和细胞异常增生的程度。结果和单纯照射组相比，照射＋给药组大鼠肺组织炎性病变区面密度、湿／于重比和OL-SMA含量较照射组分别减少14．0％、3．82％和52．8％。吡啡尼酮可抑制照射促进HLF表达TGF-β1和细胞增生的作用，且此种抑制作用和给药剂量呈明显的依赖关系。结论吡啡尼酮对放射性肺损伤早期的间质性肺炎具有明显的对抗作用，并且可显著抑制肺Fb异常增生、TGF-β1表达和向肌成纤维细胞方向转化，有利于放射性肺纤维化的有效防治。
- 李新春宋良文杨蕾蕾王少霞刁瑞英王晓民徐新萍
- 关键词：放射性肺损伤成纤维细胞
- IFN-γ拮抗^60Coγ射线刺激肺成纤维细胞增殖的机制研究
- 2008年
- 目的探讨IFN-γ拮抗^60Coγ射线刺激人肺成纤维细胞（HLF）增殖的机制。方法应用MTT比色法，观察TGF-β1、受照后大鼠血清促HLF增殖的时效和量效关系及IFN-γ对增殖的影响；用ELISA检测受照后大鼠血清、肺组织TGF-β1水平及IFN-γ对照后大鼠血清促HLF合成TGF-β1的影响。结果TGF-β1有促HLF增殖的作用；受照后大鼠血清能促HLF增殖并合成TGF-β1；IFN-γ显著拮抗血清的上述作用；受照后1—4周大鼠血清和肺组织TGF-β1水平逐渐增加。结论TGF-β1参与γ射线刺激HLF增殖的作用，而IFN-γ在一定程度上抑制HLF合成TGF-β1，并拮抗其促HLF增殖的作用。
- 刁瑞英宋良文王少霞尹纪业
- 关键词：人肺成纤维细胞增殖TGF-Β1IFN-Γ
- 定量比较不同抗原修复条件对免疫组化阳性表达的影响被引量：4
- 2009年
- 目的探讨抗原修复时抗原修复液pH值、修复温度和修复时间对免疫组化检测结果的影响。方法取扩张性心肌病人的心肌标本,经10%中性缓冲甲醛固定液固定,采用免疫组化二步法对心肌组织中结蛋白的表达进行染色。实验中对同一蜡块进行连续切片,微波修复时分别使用枸橼酸缓冲液、PBS、EDTA 3种不同pH的缓冲液进行抗原修复:枸橼酸缓冲液(pH 6.0)、PBS(pH 7.0)和EDTA(pH 9.0);每一种抗原修复液又分别采用100℃、97℃、80℃、70℃4个不同的修复温度;应用图像分析仪对比不同条件下心肌组织中结蛋白的表达情况。结果在EDTA缓冲液中修复100℃持续15 m in,阳性信号得到充分表达,抗原表达由强到弱依次为EDTA组、枸橼酸缓冲液组、PBS组。结论进行免疫组化检测时采用高pH值的EDTA进行抗原修复效果较理想。
- 王少霞尹纪业宋良文徐新萍王晓民王德文
- 关键词：抗原修复免疫组化
- MMP-12异常表达对放射性肺损伤大鼠肺内成纤维细胞转化的影响被引量：9
- 2009年
- 目的观察放射性肺损伤过程中基质金属蛋白酶12(MMP-12)过表达对肺成纤维细胞转化的作用。方法32只雄性Wistar大鼠,体重250～280g,随机分为正常对照组(n=8)和照射组(n=24)。照射组用20Gy60Coγ射线进行全胸照射,分别于照射后1、2、4周行肺组织取材,每时间点8只。应用明胶酶谱法检测MMP-12酶活性变化,组织特殊染色法观察肺泡壁弹力纤维降解情况,透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞与肺间质细胞间的"信号交流"(cross talking)现象,ELISA法检测肺组织中TGF-β1含量,免疫组化检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达情况。结果MMP-12酶活性在照射后1周开始增高,至照射后4周时有所下降;肺泡壁基底膜弹力纤维照射后1周开始出现降解断裂,4周时最为严重;肺组织TGF-β1含量和α-SMA免疫组化阳性信号在1～4周内随照后时间延长而逐渐升高。电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞与肺间质细胞间出现"信号交流"现象。结论照射后肺组织MMP-12酶活性增高,可能通过降解基底膜弹力纤维促进成纤维细胞转化,启动肺纤维化的发生。
- 李新春宋良文杨蕾蕾王少霞
- 关键词：辐射性肺炎基质金属蛋白酶12弹性蛋白成纤维细胞
- 两例极重度骨髓型放射病肺组织病变的病理学对比观察及分析被引量：2
- 2006年
- 目的对比观察不同吸收剂量、不同存活时间对极重度骨髓型放射病肺组织病变发生发展的影响。方法分别于病人死亡后从肺脏取材,每个尸检病例从不同部位取材数块,10%甲醛固定,石蜡包埋,病理组织切片,分别行HE和Gimsa染色,光学显微镜观察和分析。结果极重度骨髓型伴轻度肠型放射病尸检病例(107号)肺内主要病变为肺组织大面积坏死伴广泛性曲霉菌感染;另一极重度骨髓型放射病尸检病例(108号)肺内主要病变为广泛性卡氏肺孢子虫感染,虫体充满肺泡腔,肺泡间隔增宽,成纤维细胞活跃增生伴胶原纤维形成。结论放射病抢救治疗过程中肺内容易继发霉菌或卡氏肺孢子虫感染,可能与病人的呼吸衰竭和早期死亡有直接关系;极重度骨髓型放射病人的存活时间超过2个月,早期肺纤维化过程开始启动。
- 宋良文孙丽罗庆良彭瑞云黄海潇高亚兵马俊杰张勇尹纪业王晓民李小兵
- 关键词：照射肺损伤肺纤维化
- 雾化吸入γ-干扰素对放射性肺损伤重建的拮抗作用
- 2008年
- 目的观察超声雾化吸入弘干扰素（IFN-γ）对大鼠放射性肺损伤早期组织重建的拮抗作用，并初步探讨其作用机制。方法将动物分为照射对照组和照射＋IFN-γ拮抗组。于照前3d每日雾化吸入IFN-γ，分别于照后10、20和30d肺组织取材，制备石蜡切片，进行苏木素伊红（HE）、天狼猩红和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫组织化学染色；Western blot检测Ⅳ型胶原合成变化；ELISA检测MMP-2、-9和TIMP-1含量变化。结果照射＋IFN-γ组与照射对照组比较，肺泡隔增宽程度明显减轻，Ⅰ、Ⅲ型胶原合成和α—SMA表达明显减少；照射后Ⅳ型胶原表达呈上升趋势，但IFN-γ吸入组较对照组为低；吸入IFN-γ 10d可降低MMP-2和TIMP-1表达，而MMP-9表达升高；吸入30d三者表达均下降。结论IFN-γ对辐射引起的肺损伤具有明显的治疗作用，其可能的作用机制是IFN-γ降低TIMP—1表达，解除对MMP-9的抑制，进而降解Ⅳ型胶原，拮抗辐射引起的肺损伤后重建。
- 李明宋良文王少霞刁瑞英徐新萍罗庆良
- 关键词：Γ-干扰素放射性肺损伤基质金属蛋白酶
