国家自然科学基金(30570548)
- 作品数：10 被引量：16H指数：2
- 相关作者：周新文董玉金吴纪霞曹丽丽王兴丹更多>>
- 相关机构：苏州大学蚌埠市第一人民医院绍兴第二医院更多>>
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- lyGDI在HeLa细胞中的表达与辐射增敏研究被引量：8
- 2006年
- 目的将lyGDI和突变体D19lyGDI转入到不含内源性lyGDI的HeLa细胞中,探讨其是否有凋亡信号转导功能,并分析lyGDI的导入表达能否增加辐射诱导HeLa凋亡的敏感性。方法用脂质体转染的方法将构建于pCDNA3·1HisA载体上全长的LyGDI和D19lyGDI转入HeLa细胞,用Westernblot检测LyGDI的表达和Xpress标记物,同时,用细胞流式仪和AnnexinV-FITC双染色检测HeLa细胞瞬时转染诱导的细胞凋亡。用G418筛选稳定表达LyGDI的克隆,经12Gy的60Coγ射线辐射处理,Westernblot分析Caspase-3的活性及克隆形成试验来观察LyGDI的导入是否增加HeLa细胞的放射敏感性。结论IyGDI在HeLa细胞中的瞬时表达诱导了细胞的凋亡,LyGDI具有凋亡信号转导功能。其次,Westernblot检测Caspase-3和克隆形成试验的结果表明LyGDI的导入增加了HeLa细胞辐射凋亡的敏感性。
- 周新文许雅香
- 关键词：LYGDIHELA细胞辐射增敏
- ^60 Coγ射线辐射致LyGDI断裂对K562细胞的延迟性凋亡作用
- 2010年
- 目的 采用不同剂量的60 Coγ射线照射人红白血病细胞系K562,探究鸟苷酸解离抑制因子-2（LyGDI）在细胞延迟性死亡中的作用以及其调控机制.方法 细胞流式仪PI单染检测细胞周期,藻红B染色观察细胞的凋亡,Western blot分析LyGDI和Rac1蛋白的表达,免疫荧光检测Rac1蛋白在细胞内的分布.结果 K562细胞被阻滞在G2/M期的百分率为71.3%,K562细胞早期凋亡率较低,8 Gy60Co γ射线照射后24 h,凋亡率为14%,呈现出延迟性的细胞凋亡;K562细胞在4 Gy的γ射线照射24 h后,可见LyGDI发生断裂,总的Rac1蛋白表达未发生明显变化,但其在细胞内的分布发生改变,Rac1转移至细胞膜上与少量核内分布,Rac1脱离LyGDI而激活.结论 LyGDI具有增加细胞延迟性凋亡的作用,其断裂使Rac1转移至细胞膜上,诱导Rac1的激活,从而促进了细胞的凋亡.
- 孙华丽段卫明邵彦彦肖海楠周新文
- 关键词：RAC1凋亡
- 人肺癌组织中鸟苷酸解离抑制因子-2的表达和意义被引量：2
- 2009年
- 目的研究鸟苷酸解离抑制因子-2(LyGDI)在肺癌组织中的表达及临床意义。方法用蛋白免疫印迹法(WB)和免疫组织化学法检测分析肺癌、癌旁组织和正常肺组织中的LyGDI蛋白表达。结果46份配对组织标本中,LyGDI在35份肺癌组织中的表达明显高于癌旁组织和正常组织,11份表达差异不明显[R=76.1%(有差异例数/总例数)];肺癌组织中的SCLC与NSCLC表达差异无统计学意义(P>0.05)。在SCLC中,鳞癌与腺癌也没有显著差异,而淋巴结转移组织差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺癌组织中LyGDI蛋白的表达与淋巴结转移存在相关性,与临床病理类型无相关性。LyGDI可能与肺癌的发生、发展有关。
- 吴纪霞董玉金王兴丹陈雪松曹丽丽韩琴芳周新文
- 关键词：LYGDI蛋白表达肺癌
- LyGDI对肺癌A549细胞放射敏感性影响的观察被引量：1
- 2012年
- 目的:研究X射线对稳定转染鸟苷解离抑制因子(LyGDI)A549细胞株放射敏感性的影响及相关机制。方法:应用生长曲线观察细胞增殖能力,流式细胞术检测不同剂量照射后转染组和对照组细胞的周期分布及凋亡率,克隆形成试验观察转染组细胞放射敏感性。结果:转染组细胞相对于对照组增殖能力减弱,F=212.55,P<0.01;克隆形成能力减弱,放射敏感性增加,F=7.56,P<0.05;流式细胞术检测到辐射诱导凋亡增加,F=18.45,P<0.01;细胞周期检测提示转染组G2期阻滞受抑制,F=6.29,P<0.05。结论:过度表达的LyGDI上调A549细胞放射敏感性,其可能机制为抑制G2期阻滞促进凋亡。
- 董玉金吴纪霞周新文
- 关键词：细胞周期辐射耐受性
- LyGDI真核表达载体构建及稳定转染A549细胞株的建立被引量：2
- 2009年
- 目的构建Rho蛋白鸟苷解离抑制因子(LyGDI)真核表达载体并建立稳定转染A549细胞株。方法PCR扩增LyGDI基因片段,构建pEGFP-C1-LyGDI真核表达载体,经酶切、PCR、测序验证其正确性。脂质体法转染真核细胞A549,G418筛选建立稳定转染的细胞株,RT-PCR、免疫印迹检测稳定转染的细胞株。结果构建了真核表达载体并建立了稳定转染的A549细胞株,成功表达LyGDI蛋白。结论LyGDI真核表达载体成功构建及稳定转染A549细胞株的建立,为研究LyGDI过度表达对肿瘤侵袭性和转移的影响奠定了实验基础。
- 董玉金吴纪霞王兴丹曹丽丽韩琴芳周新文
- 关键词：LYGDI真核表达载体稳定转染
- LyGDI在肺癌组织中的表达及临床意义被引量：3
- 2009年
- 目的研究LyGDI在肺癌组织中的表达及临床意义。方法用免疫蛋白印迹法分析肺癌及癌旁正常组织中LyGDI蛋白的表达情况。结果37份配对组织标本中,LyGDI在29份肺癌组织中的表达明显高于其相应的癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。肺癌组织中的小细胞癌(SCLC)与非小细胞癌(NSCLC)LyGDI表达的差异无统计学意义(P>0.05)。在NSCLC中,LyGDI的表达与分化程度(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.05)有关,与性别(P>0.05)、年龄(P>0.05)、组织学分类(P>0.05)、分期(P>0.05)无关。结论肺癌组织中LyGDI蛋白的表达与组织分化程度及淋巴结转移存在相关性,与临床病理类型无相关性。LyGDI可能与肺癌的发生、发展有关。
- 吴纪霞董玉金王兴丹陈雪松曹丽丽韩琴芳周新文
- 关键词：LYGDI免疫蛋白印迹肺癌
- RhoGDI蛋白在肺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨RhoGDI(Rhoguanine nucleotide dissociation inhibitor)蛋白在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用Western blotting检测苏州大学两所附属医院于2007-2008年收治的39例肺癌及5例肺炎性假瘤患者组织标本中RhoGDI蛋白的表达,并分析RhoGDI蛋白表达与患者临床病理指标的相互关系。结果:小细胞肺癌组织中RhoGDI蛋白的表达水平显著高于非小细胞肺癌和炎性假瘤[(0.903±0.228)vs(0.522±0.152),(0.485±0.095);均P<0.05)]。非小细胞肺癌组织中,低分化癌RhoGDI蛋白的表达水平显著高于中、高分化癌和炎性假瘤[(0.649±0.123)vs(0.458±0.138),(0.485±0.095);均P<0.05]。RhoGDI的表达在鳞癌与腺癌中没有显著差别。非小细胞肺癌Ⅰ～Ⅲ期的RhoGDI蛋白表达水平有逐渐增高趋势,但无显著性差别(F=0.6,P>0.05)。RhoGDI蛋白的表达与原发肿瘤大小(t=1.15,P>0.05)和淋巴结转移无明显相关(t=1.648,P>0.05)。非小细胞肺癌组织RhoGDI的表达水平与血清乳酸脱氢酶水平呈正相关(r=0.46,P<0.01)。结论:肺癌组织中RhoGDI蛋白表达的明显升高与肺癌的病理类型和分化程度有关。
- 肖建军陶敏周新文
- 关键词：RHOGDI肺肿瘤乳酸脱氢酶
- LyGDI在非小细胞肺癌细胞A549中的辐射抗性机制研究被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨LyGDI的表达在非小细胞肺癌细胞A549中的辐射抗性机制.方法 A549和作为对照的H460细胞分别受到0、2、4和6 GyX射线照射后,克隆形成试验分析辐射抗性差异,Western blot分析LyGDI和辐射敏感性关键基因环氧合酶COX-2的表达.实时荧光定量PCR分析miR-34a以及miR-34b/c在A549和H460细胞中的表达.A549细胞中转染50 nmol/L的miR-34c成熟序列,观察其对A549细胞辐射抗性以及LyGDI和COX-2基因表达的影响.结果 LyGDI和COX-2在辐射抗性的A549细胞中的表达水平高于H460细胞,miR-34a以及miR-34b/c在两种非小细胞肺癌中低表达.转染miR-34c可抑制LyGDI、COX-2和Bcl-2以及激活p21的表达,增强A549细胞细胞的辐射敏感性（t=3.85、5.89、5.12,P＜0.05）.结论 LyGDI诱导的COX-2的上调表达以及电离辐射效应miR-34家族的下调表达,是A549细胞辐射抗性的一个主要原因.
- 俞辰逍段卫明周新文
- 关键词：LYGDI非小细胞肺癌A549细胞辐射抗性
- 肺癌组织中LyGDI基因的表达及其临床意义
- 2010年
- [目的]检测肺癌组织中LyGDI的mRNA和蛋白表达水平及其与临床参数的关系。[方法]运用逆转录—聚合酶链反应技术(RT-PCR)和Western blot免疫蛋白印迹法检测39例肺癌组织及其癌旁组织和正常肺组织中LyGD的mRNA和蛋白表达水平,并分析其与临床病理参数的关系。[结果]RT-PCR结果显示75.7%(28/37)肺癌组织中LyGDI的mRNA和蛋白表达水平显著高于癌旁肺组织。表达量的差异有统计学意义。在癌旁组织与正常肺组织表达接近。免疫蛋白印迹法检测结果与RT-PCR一致。[结论]LyGDI在肺癌组织中的高表达可能是肿瘤发生过程中的一个重要因素,其表达的蛋白产物可作为临床上肺癌诊断和治疗的一个重要指标。
- 吴纪霞董玉金秦华龙王兴丹曹丽丽韩秦芳周新文
- 关键词：肺癌RT-PCRWESTERNBLOTLYGDI
- 酸性核糖体蛋白P2在紫外线诱导的肿瘤细胞快速凋亡中的功能被引量：2
- 2010年
- 目的研究酸性核糖体蛋白P2在紫外线(UV)诱导的细胞快速凋亡中的分子信号功能。方法选取小鼠淋巴瘤细胞3SB、人白血病细胞Jurkat、人宫颈癌细胞HeLa S3和人乳腺癌细胞MCF-7来研究其对UV诱导细胞凋亡的差异性。UV照射后,荧光显微镜活细胞染色计数分别观察细胞的凋亡形态学变化和凋亡率;Western blot分析凋亡相关的标志性蛋白的表达。并分别提取细胞质蛋白和细胞总蛋白,利用小型二维电泳、Western blot技术分析细胞质中游离的酸性核糖体蛋白P2的变化和总的P2的表达。结果 3SB和Jurkat细胞在UV照射后,24 h的凋亡率达100%,并观察到PARP和P21的激活;而HeLa S3和MCF-7细胞出现延迟性细胞凋亡。在快速凋亡的Jurkat细胞中,发现酸性核糖体蛋白P2去磷酸化。总的P2表达降低,存在剂量效应,并伴随着凋亡蛋白PARP的激活。结论酸性核糖体蛋白P2的去磷酸化及其在细胞内总量降低与UV诱导的细胞快速凋亡相关。
- 段卫明孙华丽邵彦彦肖海楠周新文
- 关键词：去磷酸化紫外线细胞凋亡肿瘤
