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山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2004BS02012)
山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2004BS02012)
- 作品数：9 被引量：87H指数：5
- 相关作者：孙晋浩李振华暴丽华刘岳鹏高英茂更多>>
- 相关机构：山东大学山东省立医院中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 补阳还五汤提取液对Schwann细胞氧化损伤的保护作用被引量：30
- 2006年
- 本实验建立了Schwann细胞的体外氧化损伤模型,从对Schwann细胞的抗氧化损伤作用探讨补阳还五汤的疗效机制。用原代培养的Schwann细胞建立氧化损伤模型,将培养细胞分为氧化损伤组,补阳还五汤处理组及正常组:(1)应用MTT方法检测细胞的活性;(2)应用生化技术检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的含量;(3)采用荧光探针Fluo-3-AM标记细胞,用激光共聚焦显微镜观察H_2O_2对Schwann细胞内游离钙([Ca2+])抗氧化损伤的影响。结果显示:与对照组相比,H2O2处理组细胞活性降低(P<0.01),SOD含量明显减少(P<0.01),而补阳还五汤预处理后细胞内[Ca2+]i升高明显被减弱(P<0.01),细胞存活率明显升高(P<0.01)。以上结果表明补阳还五汤能通过抗过氧化损伤保护Schwann细胞。
- 邢三丽李振华孙晋浩刘岳鹏暴丽华
- 关键词：SCHWANN细胞抗氧化作用补阳还五汤
- 血清对联合培养神经上皮干细胞与Schwann细胞的影响被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨血清对联合培养神经上皮干细胞与Schwann细胞的影响,进一步寻求诱导神经上皮干细胞定向分化的影响因素。方法:采用不同浓度血清联合培养神经上皮干细胞与Schwann细胞,收集上清液作为条件培养液,免疫细胞化学染色观察条件培养液诱导神经上皮干细胞分化,统计分析分化为神经元与星形胶质细胞的比例;MTT检测条件培养液促Schwann细胞存活及增殖的作用。结果:Schwann细胞促进神经上皮干细胞存活和分化,随着血清浓度增加,神经上皮干细胞分化形成的神经元比例减少;神经上皮干细胞及血清均促进Schwann细胞存活和增殖,随血清浓度增加,存活及增殖率增加。结论:无血清或较低血清浓度有利于共培养的Schwann细胞存活和增殖,同时也有利于共培养神经上皮干细胞存活和向神经元方向分化。
- 暴丽华李振华孙晋浩丛丽刘文静高英茂
- 关键词：干细胞神经上皮分化雪旺细胞
- 恒定磁场对Schwann细胞氧化损伤的保护作用被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨恒定磁场对Schwann细胞氧化损伤保护作用的机制。方法:用体外传代纯化培养的Schwann细胞建立氧化损伤模型,将培养细胞分为氧化损伤组,恒定磁场(4 mT)保护组及正常组。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞的活性,用生化技术检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量,用免疫组织化学方法检测各组半胱氨酸天冬氨酸酶(Caspase-3)的表达。结果:与正常组及保护组相比,HB2BOB2B处理组细胞活性降低(P<0.01),SOD含量明显减少(P<0.01),MDA含量明显增加(P<0.01),Caspase-3表达呈强阳性,恒定磁场保护组细胞存活率明显升高(P<0.01),SOD含量较损伤组高(P<0.01),MDA含量明显减少(P<0.01),Caspase-3表达弱阳性。结论:4 mT恒定磁场能通过抗氧化损伤保护Schwann细胞。
- 张杰李振华孙晋浩暴丽华刘岳鹏
- 关键词：周围神经系统细胞凋亡
- 应用胶原-壳聚糖桥接管引导大鼠坐骨神经再生被引量：7
- 2008年
- 目的:观察胶原-壳聚糖桥接管促进大鼠坐骨神经损伤后再生与修复的作用。方法:用壳聚糖和胶原蛋白按1∶3的比例采用冷冻干燥法制成胶原-壳聚糖复合导管;将20只雄性Wistar大鼠随机分为2组,胶原-壳聚糖导管组和硅胶管组,切断坐骨神经,建立10mm的缺损动物模型;分别用胶原-壳聚糖导管和硅胶管进行桥接。于术后不同时间对2组动物进行大体观察,并于术后14周进行电生理、组织学及逆行示踪检测,比较2组大鼠坐骨神经的再生和功能恢复情况。结果:术后14周2组动物坐骨神经再生和功能恢复情况的各项检测指标显示,胶原-壳聚糖桥接组明显优于硅胶管桥接组。结论:胶原-壳聚糖导管可用来桥接损伤神经,在周围神经缺损修复方面具有良好的应用前景。
- 刘文静高英茂李振华暴利华王家增孙晋浩
- 关键词：胶原壳聚糖周围神经
- 胚胎神经上皮干细胞体外克隆增殖与分化的实验研究
- 2008年
- 目的观察胚胎神经上皮干细胞在体外克隆增殖和诱导分化的情况。方法取孕11 d大鼠的胚胎,经分离获得神经管上皮细胞,在无血清培养基内克隆、增殖、传代。取不同时期的神经球进行神经干细胞的鉴定和诱导分化,并通过免疫组织化学染色鉴定分化的结果。结果胚胎神经上皮干细胞在体外能够克隆、增殖,形成的神经球呈nestin阳性,在分化培养基内可分化为星型胶质细胞和神经元。结论胚胎神经上皮干细胞可在体外进行单细胞克隆和诱导分化。
- 王家增薛良华赵遵杭孙晋浩
- 关键词：胚胎神经上皮干细胞分化
- 壳聚糖导管复合雪旺细胞修复兔面神经缺损的实验研究被引量：12
- 2006年
- 目的:应用壳聚糖导管作为神经再生室,复合体外培养的雪旺细胞修复兔面神经缺损,观察神经再生的效果。方法:用壳聚糖和羧甲基壳聚按3:1的比例采用冷冻干燥法制成壳聚糖复合导管;取胎兔坐骨神经,经体外增殖培养获得雪旺细胞,复合于壳聚糖导管,修复兔面神经0.8 cm的缺损,并与单用壳聚糖导管作对照,观察修复后4、8、16周的神经电生理及组织学检查情况。结果:术后8周新生面神经纤维已沿管壁通过缺损到达远端,术后16周导管大部分降解,新生神经变粗变直,神经纤维排列整齐规则,神经电生理检查记录到复合动作电位,复合雪旺氏细胞的导管再生神经较粗,动作电位幅值较高。结论:壳聚糖导管可引导神经再生,复合雪旺细胞的壳聚糖导管神经再生效果较好。
- 郑培惠常青魏奉才林志勇孙晋浩卢凤琦刘克敬
- 关键词：壳聚糖雪旺氏细胞神经修复面神经
- 血清浓度对雪旺细胞诱导神经上皮干细胞分化的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨血清对雪旺细胞诱导神经上皮干细胞分化的影响。方法:从新生鼠坐骨神经及臂丛神经分离纯化雪旺细胞,从孕11.5 d大鼠胚胎分离培养神经上皮干细胞,含0%、1%、5%、10%胎牛血清的培养液联合培养雪旺细胞与神经上皮干细胞,收集上清作为条件培养液诱导神经上皮干细胞分化,1周后MAP-2和GFAP细胞免疫化学染色,显微镜下观察统计神经上皮干细胞分化为神经元与星形胶质细胞的比例。结果:条件培养液促进神经上皮干细胞存活和分化,分化形成的神经元大体形态与成熟神经元相似,0%、1%、5%、10%血清条件培养液组神经元与星形胶质细胞比例分别为1.53:1、1.13:1、1.03:1、0.75:1。结论:血清影响雪旺细胞诱导神经上皮干细胞向神经元分化,血清浓度增加,神经上皮干细胞分化形成的神经元减少。
- 暴丽华李振华孙晋浩王家增杨琳高英茂
- 关键词：神经上皮干细胞血清雪旺细胞细胞分化
- GFP转基因鼠神经上皮干细胞纹状体内移植的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的:观察GFP转基因鼠胚胎神经上皮干细胞的体外培养及脑内移植后的存活与分化状况。方法:将GFP转基因鼠的胚胎神经上皮干细胞置于无血清培养基内纯化扩增,用巢蛋白免疫组织化学染色鉴定神经干细胞,将扩增后的含GFP基因的神经干细胞在立体定位仪下,定向移植到大鼠的纹状体内。术后不同时期取材、切片,在荧光显微镜下观察移植细胞的存活状况,行微管相关蛋白(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色鉴定移植细胞的分化状况。结果:GFP转基因鼠神经管来源的神经上皮干细胞在无血清培养基内能增殖形成神经球,呈巢蛋白阳性。纹状体内移植2周、4周均可见明显的呈绿色荧光的移植细胞,显示细胞存活良好。免疫组织化学染色显示移植细胞在不同间隔时间可分化为MAP-2、GFAP及TH阳性细胞。结论:GFP转基因鼠来源的具有GFP标记的胚胎神经上皮干细胞可在体外培养扩增,移植到大鼠纹状体内存活良好并能分化成神经元、神经胶质细胞,且能定向分化为多巴胺能神经元。
- 王家增暴丽华孙晋浩李振华张静
- 关键词：神经上皮干细胞增殖
- 补阳还五汤的抗氧化作用被引量：30
- 2005年
- 目的:探讨复方中药制剂补阳还五汤的抗氧化机制。方法:用水煎醇沉法制备补阳还五汤提取液,从新生鼠坐骨神经分离纯化雪旺细胞,建立过氧化氢(H2O2)损伤模型。将培养细胞分为补阳还五汤处理组、氧化损伤组及正常组和空白对照组,培养12 h时,检测丙二醛(MDA)的含量,用免疫组化方法检测Caspase-3的表达,用RT-PCR技术检测胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的表达。结果:与氧化损伤组相比,补阳还五汤处理组的MDA含量明显减弱,Caspase-3呈弱阳性表达,GDNF mRNA的表达量减少不明显。结论:补阳还五汤具有良好的抗过氧化损伤效果,对H2O2引起雪旺细胞的损伤具有保护作用。
- 邢三丽李振华孙晋浩刘岳鹏暴丽华
- 关键词：补阳还五汤雪旺细胞丙二醛
