江苏省高校自然科学研究项目(07KJD310244)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李国才王劲松季明春焦红梅朱立天更多>>
- 相关机构：扬州大学扬州工业职业技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 淋病奈瑟菌对hCD46基因转染COS-1细胞的黏附
- 2008年
- 为研究人CD46(hCD46)在菌毛介导的淋病奈瑟菌宿主特异性黏附过程中的作用。用连接PCR技术扩增出启动子与cDNA相连的hCD46小基因,并将其置换出pcDNA3.1载体中的CMV启动子,构建成重组真核表达载体pCD46。转染COS-1细胞后用间接免疫荧光法检测到hCD46cDNA在其自身启动子的指导下可在COS-1细胞膜表面有效表达,Western blotting检测表明表达产物的分子量正确,用流式细胞术分选表达hCD46的基因转染细胞COS-1-46。细菌黏附实验显示菌毛阳性淋病奈瑟菌临床分离株对COS-1-46细胞有较强的黏附性。提示hCD46是菌毛介导的淋病奈瑟菌特异性黏附于人黏膜细胞的一种重要受体,hCD46小基因可用于淋病奈瑟菌感染转基因小鼠模型的制备。
- 李国才王劲松朱立天王晓红焦红梅潘兴元季明春
- 关键词：淋病奈瑟菌
- 人CD46启动子真核表达载体的构建被引量：4
- 2007年
- 为了构建人CD46(hCD46)启动子指导目的基因表达的真核表达载体,提取HeLa细胞基因组DNA,用PCR扩增出hCD46基因的启动子区域,序列分析结果表明其与GenBank中hCD46基因5′端某片段的同源性为99.9%。用此启动子替换pcDNA3EGFP中的CMV启动子,并在hCD46启动子和EGFP基因之间插入兔β-球蛋白基因第二内含子(RGI),得到的重组表达载体转染CHO和SP2/0两种鼠源细胞,流式细胞术检测表明CHO细胞EGFP的表达量高于SP2/0细胞,表达特性与人体CD46相似;RGI可以增强EGFP的表达量,但不改变其表达的组织特异性,提示克隆的hCD46启动子可以用于研制模拟人体CD46基因表达特性的转基因小鼠。
- 李国才王劲松焦红梅朱立天潘兴元季明春
- 关键词：真核表达载体EGFP
- 人初乳中溶菌酶的理化特性及其抗菌活性
- 2010年
- 目的分析人初乳中溶菌酶(Lysozyme,LYZ)的理化特性及其抗菌活性。方法取产后3d内的产妇乳汁,根据人LYZ标准曲线,求得其中的LYZ活性。将人初乳分别置于60、72、85和100℃水浴中孵育0、1、3、5、10、15、20和30min后取样,检测其中LYZ的活性,分析其热稳定性;将经稀释的人初乳分别调pH值至2.0、4.0、5.0、7.4、9.0和10.0,37℃孵育30min,检测其中LYZ的活性,分析其对pH值的敏感性;将不同的金属离子加入人初乳中,使其终浓度为10mmol/L,测定不同金属离子对人初乳中LYZ活性的影响;采用平板扩散法检测人初乳中LYZ的抑菌谱,并挑选敏感菌株进行定量抑菌试验。结果人初乳中LYZ的活性为(9650±236)U/ml,在60℃～85℃和pH2.0～10.0的条件下均可保持较强的活性,对多种金属离子具有一定的耐受性。人初乳中LYZ对多种革兰阳性及阴性细菌具有不同程度的抑菌作用,但对白色念珠菌无抑制作用。结论人初乳中的LYZ稳定性强,抗菌谱广,具有广泛的应用价值。
- 李淑丽汪静解如山陈红菊李国才
- 关键词：人溶菌酶初乳理化特性抗菌活性
