安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2010A025)
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
- 相关作者：查向东梁琳卢颖虎陈青峰刘扬更多>>
- 相关机构：安徽大学解放军电子工程学院中国科学技术大学更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 平末端DNA随机连接构建重组质粒
- 2012年
- 目的:拼接DNA片段并克隆。方法:用T4DNA连接酶将DNA片段以平末端随机连接,随后用限制性内切酶切割,琼脂糖电泳分离酶切产物,挑选特定片段纯化回收,与线性化的载体质粒连接,转化大肠杆菌感受态细胞。结果:通过以上步骤,成功拼接了不同DNA片段,构建了含有目的拼接片段的重组质粒。结论:该方法简便、易行、可靠,可作为拼接、克隆DNA的备选方案,在分子生物学研究和基因工程中应用。
- 查向东刘杨吴敌卢颖虎梁琳陈青峰
- 关键词：基因克隆
- 融合头的改变对抑制重组抗菌肽毒性的影响(英文)被引量：1
- 2010年
- 为进一步完善G13结构域的原核表达系统,人工合成编码G13的基因片段,PCR扩增后克隆于原核表达载体pET28a中,构建的重组质粒pET28a-G13转化于E.coli BL21(DE3)中。另外对pET28a-G13进行突变,改变其G13片段N端上游处的融合头的电荷数,转化于E.coli BL21(DE3)中。构建pThiohisA突变体并与pET28a-G13共转化于E.coli BL21(DE3)中。用诱导剂诱导所构建的各个工程菌,然后比较A600值变化及蛋白表达量,分析不同的融合头对G13毒性抑制效果,发现融合头对G13毒性抑制效果与其净负电荷数及酸性氨基酸的相对位置有关。
- 王作利查向东周鹏刘小强杨金环方红
- 关键词：阳离子抗菌肽共表达
- 阳离子抗菌肽及其对细菌内毒素的中和作用被引量：3
- 2010年
- 革兰氏阴性菌的内毒素是重要的致病因子,寻找新型内毒素拮抗剂是目前研究的热点和紧迫任务。针对该问题,对内毒素致病学,特别是阳离子抗菌肽对内毒素的中和作用机理等方面的相关背景及最新研究进展进行综述。
- 查向东彭霞刘扬梁琳卢颖虎
- 关键词：内毒素炎症反应阳离子抗菌肽免疫
- 颗粒裂解肽G13结构域引发细菌SOS反应被引量：1
- 2011年
- 目的利用自发光lux基因作为报告基因,检测颗粒裂解肽G13结构域对SOS启动子控制下的报告基因表达的影响。方法 pBAD-G13工程菌和鼠伤寒沙门菌Sal94混合培养,选取特定时间点测量混合菌液的光吸收值和A600值,通过公式运算,计算其单位细菌产生的平均光吸收值。结果重组G13结构域可诱导报告基因的表达,且诱导表达的水平具时间效应,呈现峰型图,在处理的开始阶段(4min左右)lux基因被强烈诱导表达并且达到峰值,随后lux基因表达水平逐渐平缓下降。结论重组G13结构域引起细菌内SOS操纵子阻遏蛋白LexA蛋白的降解,诱导发生SOS反应。
- 梁琳张萍萍刘兢查向东
- 关键词：LUX
- 口腔抗菌肽研究进展被引量：1
- 2015年
- 抗菌肽是机体天然免疫系统的重要成分,口腔抗菌肽在抑制口腔细菌生长、维持口腔健康方面起着重要作用.文中主要针对人体口腔抗菌肽种类、分布、功能、表达方式与表达水平、与疾病的相关性等方面的进展作一综述,并总结分析了将抗菌肽应用于口腔疾病临床防治、诊断的可能性以及存在的问题和对策.
- 孔小卫陈青峰查向东车媛媛徐雪娇马利娟
- 关键词：口腔疾病牙菌斑抗菌肽炎症反应口腔致病菌耐药性
