国家自然科学基金(30400353)
- 作品数：7 被引量：30H指数：5
- 相关作者：汪灏梁元姣郝群吴元赭李秋荣更多>>
- 相关机构：南京军区南京总医院南京大学医学院附属鼓楼医院复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划南京军区南京总医院科研基金更多>>
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- 二十碳五烯酸对人树突状细胞成熟过程中基因表达谱影响的研究被引量：6
- 2010年
- 目的研究二十碳五烯酸(EPA)对人树突状细胞成熟过程中基因表达谱的影响。方法采用GM-CSF及IL-4诱导人外周单核细胞获得非成熟树突状细胞,然后将细胞分为三组处理,A组,维持树突状细胞的未成熟状态;B组,LPS(100ng/ml)作用48h诱导树突状细胞的成熟;C组,经EPA(50μmol/L)预处理24h后再予以LPS(100ng/ml)诱导树突状细胞的成熟。用低通量的cDNA表达谱芯片检测三组细胞基因表达谱的情况。RT-PCR法验证相关差异表达基因的结果。结果在LPS诱导树突状细胞成熟的过程中共有29条基因表达增加,9条基因表达下降。但是经EPA孵育24h后再予以LPS诱导"成熟"的人树突状细胞其基因表达水平发生明显变化,与未经EPA处理的成熟树突状细胞比较,共有15条基因出现差异表达,其中在29条本该上调的基因中有11条基因表达出现下降,1条基因出现上调。在9条本该表达下调的基因中有1条基因出现上调,2条明显下调。RT-PCR验证了其中6条基因的芯片结果。结论 EPA对树突状细胞的成熟过程中多种基因的表达具有明显的抑制作用,其范围涉及细胞因子及抗原提呈分子等不同基因。
- 汪灏郑黎明陈刚李秋荣李幼生黎介寿
- 关键词：树突状细胞二十碳五烯酸基因表达
- 人卵巢癌细胞系SKOV3对树突细胞免疫功能及凋亡的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨人卵巢癌细胞系SKOV3对树突细胞(DC)免疫表型、细胞因子分泌及凋亡的影响。方法:采用外周血单个核细胞培养DC,以PBS溶液为对照,应用流式细胞仪检测人卵巢癌细胞系SKOV3培养上清液作用于DC后,其凋亡的发生率、免疫表型的表达,应用酶标记免疫吸附分析法(ELISA)检测DC白细胞介素-12(IL-12)的分泌情况。结果:人卵巢癌细胞系SKOV3培养上清液作用于DC后,可诱导DC发生凋亡,DC的CD80、CD83及人类白细胞(位点)DR抗原(HLA-DR)等表型明显下调,IL-12分泌明显下降,与对照组相比差异显著(P<0.05),且IL-12分泌随SKOV3作用时间的延长,其抑制作用更加明显。结论:人卵巢癌细胞系SKOV3可明显抑制DC的免疫功能,并诱导其凋亡。
- 郝群汪灏梁元姣吴元赭
- 关键词：树突细胞卵巢癌凋亡
- 脱氢表雄酮对血管内皮细胞损伤后单核细胞与内皮细胞相互作用的影响被引量：5
- 2012年
- 目的脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)是成人体内最为丰富的来源于肾上腺的甾体激素,文中探讨DHEA对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)所致血管内皮细胞损伤后单核细胞与内皮细胞相互作用的影响。方法以培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)作为靶细胞,在内皮细胞培养基中加入ox-LDL或在试验体系中加入不同浓度的DHEA,测定人单核细胞系U937与HUVEC的黏附,检测内皮细胞条件培养基中一氧化氮(nitric oxide,NO)及单个核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)的含量,应用流式细胞仪检测内皮细胞表面黏附分子细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascularcell adhesion molecule-1,VCAM-1)及E-选择素的表达。将内皮细胞条件培养基作用于U937细胞,应用RT-PCR检测U937细胞CCR2、LFA-1以及VLA-4 mRNA的表达。结果 DHEA可明显抑制单核U937细胞与内皮细胞之间的相互黏附,明显促进内皮细胞NO合成,抑制MCP-1分泌,降低内皮细胞表面ICAM-1、VCAM-1的表达,且经DHEA作用后的内皮细胞条件培养基可明显抑制单核U937细胞CCR2、淋巴细胞功能相关抗原(lymphocyte function-associated antigen,LFA)-1以及非常晚期抗原(very late antigen,VLA)-4 mRNA的表达。结论 DHEA可通过抑制内皮细胞分泌趋化因子、下调内皮细胞表面黏附分子的表达,抑制内皮细胞对单核细胞的趋化及相互黏附,据此认为DHEA可能对血管内皮细胞具有保护作用。
- 郝群梁元姣张承李大金汪灏
- 关键词：脱氢表雄酮内皮细胞趋化因子细胞黏附分子
- 二十二碳六烯酸对人树突状细胞基因表达谱的影响被引量：6
- 2005年
- 目的:研究二十二碳六烯酸(DHA)对人树突状细胞 (DCs)成熟过程中基因表达谱的影响。 方法:采用GM CSF及IL 4诱导人外周血单核细胞获得非成熟DCs,经DHA( 50μmol/L)孵育 24h后,再予以LPS(100ng/ml)作用 48h,用cDNA芯片检测人DCs基因表达谱。用RT PCR法验证相关差异表达基因的结果。分别将未经脂肪酸处理的DCs和硬脂酸(SA)处理的DCs作为对照。 结果:经DHA预处理后,成熟的DCs与未经脂肪酸处理的成熟DCs相比,共有 20条基因差异表达 ,约占芯片中基因总数的 29. 4%。其中 18条基因表达下降, 2条基因表达增加。在差异表达的基因中,涉及细胞因子、趋化因子 (受体)及其抗原呈递相关分子基因等。而采用饱和脂肪酸(SA)处理的DCs的表达谱未见明显变化。 结论: 50μmol/LDHA对DCs成熟过程中的基因表达具有显著的影响 ,涉及到细胞因子、趋化因子(受体)及其抗原呈递相关分子基因的调节。
- 汪灏李秋荣马健李幼生李宁黎介寿
- 关键词：人树突状细胞基因表达谱抗原呈递趋化因子DHA二十二碳六烯酸
- 肿瘤坏死因子α-863C／A多态性影响核因子-κB结合活力在脓毒症发病中的作用及机制被引量：2
- 2008年
- 目的探讨TNF—α．863C／A基因多态性对NF—gBp65．p50和p50．p50活化的调控，以及在脓毒症发病中的作用及机制。方法选择已知TNF-α-863C／A基因多态性的脓毒症患者30例，采集静脉血，用LPS刺激后，用ELISA法测定上清中TNF—α表达；用EMSA方法测定NF-κBp65-p50和p50-p50活化水平。结果外周血经LPS刺激后NF—κB活化和TNF-α表达存在时相性变化，1-2周明显低于0及第4周水平；具有-863A等位基因的患者其NF—gB活化模式以p50-p50为主，明显高于C／C组水平，p65-p50：p50-p50的比值明显低于C／C组（0．4±0．2）比（0．7±0．4），相应地TNF-α表达随NF-κB两种二聚体比值的降低而明显下降。结论不同的TNF-
α-863C／A基因型能调节NF—κBp65-p50和p50-p50二聚体活化后与DNA结合水平进而介导下游TNF-a表达的改变。
- 乔安意于宝军
- 关键词：脓毒症TNF-ΑNF-ΚB内毒素
- 雌激素与脱氢表雄酮改善去势雌兔动脉粥样硬化的对比研究被引量：6
- 2007年
- 目的:比较雌激素与普拉睾酮(脱氢表雄酮,DHEA)对卵巢切除(OVX)的去势雌兔动脉粥样硬化形成的影响。方法:将30只3月龄新西兰雌兔随机分为五组,即正常对照组、假手术+高脂饮食组、OVX+高脂饮食组、OVX+高脂饮食+苯甲酸雌二醇(E2)组和OVX+高脂饮食+DHEA组。喂养12周末采血,分别测定血脂以及血清一氧化氮(NO)、E2水平;取主动脉及子宫行组织形态学观察以及在光镜和扫描电镜下行病理学检查,利用图像分析仪计算动脉粥样硬化斑块内膜面积比和内膜中膜厚度比、面积比。结果:①12周末对照组兔血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)与其他各组相比均有显著性统计学意义(P<0.05),而对照组外的各组间差异均无统计学意义。②OVX+高脂饮食+苯甲酸E2组与OVX+高脂饮食组相比三酰甘油(TG)差异显著(P<0.05)。③OVX+高脂饮食+苯甲酸E2组与OVX+高脂饮食+DHEA组的血清NO水平与OVX+高脂饮食组相比差异非常显著(P<0.01)。④OVX+高脂饮食+苯甲酸E2组和OVX+高脂饮食+DHEA组的血清E2水平与OVX+高脂饮食组相比差异亦非常显著(P<0.01)。⑤OVX+高脂饮食+苯甲酸E2组和OVX+高脂饮食+DHEA组的主动脉硬化斑块面积与动脉内膜比值,内膜中膜厚度比、面积比显著低于OVX+高脂饮食组(P(0.01)。⑥OVX+高脂饮食+苯甲酸E2组子宫内膜增生明显,而OVX+高脂饮食+DHEA组无此现象。结论:雌激素和DHEA均可减轻动脉粥样硬化早期的病理改变,可预防和减少动脉粥样硬化的形成。
- 郝群汪灏梁元姣吴元赭
- 关键词：动脉粥样硬化去势雌二醇普拉睾酮
- 应用基因表达谱芯片研究内毒素诱导的人树突细胞成熟前后免疫相关基因的差异表达
- 2008年
- 目的研究人外周血来源的树突细胞(DCs)经内毒素诱导成熟过程中基因表达谱的改变。方法采用GM-CSF及IL-4诱导人外周血单核细胞获得非成熟DCs,以100ng/ml内毒素(LPS)作用48h获得成熟DCs,收集细胞提取总RNA,应用SuperArray低通量全长基因cDNA芯片筛选DCs成熟前后差异表达的基因。结果经LPS诱导后DCs高表达成熟DCs表面标志物。经LPS处理48h后诱导成熟的DCs与未经处理的非成熟DCs相比,共有50条基因出现差异表达,占芯片基因总数的30.3%。其中35条基因表达增加,15条基因表达下降。细胞因子/受体和趋化因子/受体基因中有12条表达上调,2条表达下调,抗原获取及提呈相关分子中有10条表达上调,5条表达下调,膜受体及信号转导分子中13条表达上调,8条表达下调。RT-PCR进一步证实了基因表达谱芯片的结果。结论LPS对DCs成熟过程中的基因表达具有显著影响,其范围涉及细胞因子、趋化因子及受体,抗原提呈相关分子及细胞内信号转导分子等。分析这些差异基因的表达,对进一步全面了解DCs成熟过程有重要意义。
- 郝群梁元姣吴元赭汪灏
- 关键词：树突细胞寡核苷酸序列分析内毒素类
