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致病性犬瘟热病毒CDV-JT1株的分离与鉴定被引量：2: 2010年; 应用MDCK细胞从吉林某地犬瘟热（Canine distemper,CD）疑似发病犬肺脏组织中分离出1株病毒,该分离毒株经MDCK细胞传至第6代时出现典型的合胞体细胞病变（CPE）。经病毒形态观察、理化特性鉴定、RT-PCR和直接免疫荧光鉴定可知该分离毒株为犬瘟热病毒（CDV）,命名为CDV-JT1;动物试验表明,试验犬接种CDV-JT1后21 d内都出现典型的犬瘟热症状;H基因序列分析表明,CDV-JT1株的H基因与中国分离株CDTaiChung株、TN株、SHLJ（07）1株、日本Hamamatsu株、Ueno株、Yanaka株和KDK-1株在基因型上同属于Asia-1型。CDV-JT1株含有包括CDV野毒株特有的309~311位在内的8个潜在的N-连接天冬酰氨糖基化位点。CDV-JT1强毒株的分离成功,对进一步开展疫苗研发、流行病学调查以及致病机理等方面的研究具有重要意义。; 王秀东谭斌陈微晶陈立志武华; 关键词：犬瘟热病毒强毒株 H基因

高致病性PRRSV TJ株Nsp2蛋白的缺失及其二级结构预测被引量：2: 2011年; 根据GenBank上发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJ株F3代全基因序列(GenBank登录号为EU860248),结合多个PRRSV亚洲株Nsp2基因比对结果,设计合成引物,选择高致病性PRRSV TJ株噬斑克隆纯化前后14个不同代次,利用合成的引物扩增各代次Nsp2基因的高变区片段及F3代和F92代Nsp2全基因,并进行产物克隆和氨基酸序列分析及结构预测。测序结果表明:PRRSV TJ株在克隆传代过程中出现了序列整段缺失,共缺失120个氨基酸,并且从F18代噬斑克隆开始一直稳定存在。缺失高变区及Nsp2蛋白二级结构预测结果表明:缺失的氨基酸使Nsp2蛋白在空间结构上发生了较大的变化,推测这可能与PRRSV TJM–F92的毒力和致病力减弱有关。; 王凤雪冷雪李真光温永俊刘准武华; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白二级结构

表达PRRSV强弱毒Nsp2的Marc-145细胞系的建立及Nsp2蛋白对PRRSV复制的影响被引量：2: 2012年; 为探讨Nsp2蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的影响,采用体外克隆法构建表达高致病性PRRSV TJ株和其致弱毒TJM株Nsp2基因的真核表达质粒pEGFP-TJ Nsp2和pEGFP-TJMNsp2,含有增强式绿色荧光蛋白表达盒,瞬时转染重组质粒到Marc-145细胞系单层,利用G418抗性筛选建立细胞系,通过PCR和RT-PCR鉴定。PRRSV感染筛选的细胞系,检测病毒TCID50。结果建立稳定表达TJ株和TJM株Nsp2基因的猴肾细胞系Marc-145-TJ Nsp2和Marc-145-TJM Nsp2;在表达PRRSV TJ株和TJM株Nsp2蛋白的Marc-145细胞上感染PRRSV病毒,在复制早期病毒时增殖速度快,即Nsp2蛋白对PRRSV复制早期有正向调控作用,并且强毒的Nsp2此作用更明显。; 王凤雪刘准温永俊冷雪李真光武华; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞系

Prevention and Control Measures of Bovine Viral Diarrhea Virus in Developed Country and Its Inspiration to China: 2010年; Bovine viral diarrhea disease is an important disease in the world,which causes great economic loss and leads to serious clinical symptoms such as drop in milk and meat production,reproductive failure,growth retardation,and secondary infection increasing the mortality rate.The developed countries have made a series of measures in preventing the disease and made a great purpose.This paper summarizes those methods in order to make a reference for the control of the disease in China.; WANG Wei1,2,LU Wei1,2,WU Hua1,2 1.Institute of Special Economic Animal and Plant Science,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Jilin 132109,China; 关键词：牛病毒性腹泻病毒疾病控制经济损失临床症状肉类生产

欧美牛病毒性腹泻防控措施及对我国的启示被引量：5: 2010年; 牛病毒性腹泻是牛的重要疫病,导致产奶量下降、肉产量降低、繁殖障碍、生长迟缓、继发其他病原几率增加甚至死亡等,给养牛业造成较大的经济损失。欧美国家在牛病毒性腹泻防控方面形成了一套行之有效的方法,有效地控制并逐步根除了BVD。借鉴欧美牛病毒性腹泻防控策略可对我国该病的防制提供一定的指导。; 王炜武华; 关键词：牛病毒性腹泻防控措施

高致病性PRRSV TJ株和致弱毒TJM株Nsp2测序及结构分析被引量：8: 2011年; 参照GenBank中PRRSV VR-2332株全序列设计特异性引物,扩增高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Por-cine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)TJ株和其致弱毒株TJM株非结构蛋白2(Nonstructure pro-tein 2,Nsp2)编码区,经过基因的扩增、连接、转化、筛选阳性克隆进行核苷酸测序.结果表明,PRRSV TJ株Nsp2长2 850 bp,TJM株Nsp2长2 490 bp.通过序列比较分析,发现Nsp2编码区序列保守性差,TJ株和TJM株Nsp2与VR-2332核苷酸序列的同源性分别为83.6%和82.9%,运用RNAdraw软件对Nsp2编码区RNA的2级结构预测分析表明,分离的高致病性强毒株TJ株和细胞致弱毒株TJM株与经典毒株VR-2332有较大不同,PRRSVNsp2的1级序列的变化导致RNA的2级结构发生构象变化,推测这可能是3个PRRSV毒株致病力不同的原因之一.; 王凤雪温永俊刘准冷雪李真光武华; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒非编码区

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