国家自然科学基金(81172250)
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 相关作者：童向民范剑赵洪灿姚航平童茵更多>>
- 相关机构：浙江大学医学院附属第一医院杭州市第一人民医院浙江省人民医院更多>>
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- 杭白菊与阿克拉霉素联合应用增强白血病细胞凋亡及机制研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨杭白菊与阿克拉霉素联合应用对白血病HL-60细胞诱导凋亡作用及机制。方法实验分组:(1)空白对照组,(2-4)不同浓度阿克拉霉素(0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.25μg/ml)处理HL-60;(5)高浓度(500μM)的杭白菊处理;(6-8)不同浓度的杭白菊(10μM、100μM、500μM)与阿克拉霉素(0.1 g/ml)联合处理。20 h后流式细胞技术检测凋亡率,用Western blot分析COX-2、caspase 3、caspase 9和NF-κB蛋白表达。结果不同浓度阿克拉霉素诱导的凋亡率与空白组相似(P>0.05);不同浓度的杭白菊与阿克拉霉素联合处理,凋亡率明显增加(P<0.01)。杭白菊联合阿克拉霉素时caspase 3、caspase 9的表达明显升高,Cox-2和NF-κB的活性明显被抑制,与杭白菊浓度成正比(P<0.01)。结论杭白菊增强阿克拉霉素对HL-60细胞的诱导凋亡作用,以及抑制COX-2和增强caspase 3、caspase 9的表达,这是通过杭白菊增强对NF-κB活性的抑制作用而实现的。
- 陈刚王剑超赵洪灿姚航平范剑童向民
- 关键词：杭白菊白血病阿克拉霉素凋亡
- LIBSVM在急性髓细胞白血病流式细胞术残留病灶分析中的应用被引量：2
- 2015年
- 目的探讨利用支持向量机软件LIBSVM辅助流式细胞术,实现急性髓细胞白血病微小残留病灶(MRD)的自动化、客观化、标准化。方法从2010至2012年的流式数据库中选取36名急性髓细胞白血病患者,共计159例次MRD检测结果,分别导出其初发免疫分型和各次MRD复查的数据。以健康人骨髓数据和患者初发免疫分型数据为训练对象,利用LIBSVM优化参数并建立其对应的特异性预测模型,并与手工分析的MRD数据进行统计学比较。结果LIBSVM建立并优化了患者个体特异性的预测模型,基于此模型的MRD自动化分析结果与经验丰富的流式专业人员手工分析结果相似,相关性强。结论 LIBSVM结合流式细胞术有助于实现MRD分析的自动化、客观化和标准化。
- 倪万茂赵洪灿朱利芬童茵童向民
- 关键词：流式细胞术急性髓细胞白血病支持向量机微小残留病灶
- 原癌基因RON介导Raji细胞侵袭及药靶效应
- 2013年
- 目的研究原癌基因受体酪氨酸激酶（recepteurd’origine nantais，RON）对Burkitt淋巴瘤细胞株Raji侵袭性行为的影响及单克隆抗体Zt／f2（2F2）的靶向抑制效应。方法采用RON特异性配体巨噬细胞刺激蛋白（macrophage stimulating protein，MSP）（2．0nmol／L）和Zt／f2（2F2）（2．0nmol／L）处理Raji细胞24和72h，采用MTT比色法研究对Raji细胞增殖的作用；采用甲基纤维素半固体培养法研究对Raji细胞克隆形成的作用；通过Annexin V／PI双染流式细胞术检测对Raji细胞凋亡和细胞周期的影响；采用Westernblot法检测RON的表达和凋亡相关蛋白及周期蛋白的改变。结果与空白对照组细胞活性（1．00）和集落数（103．6±7．0）比较，MSP处理72h后Raft细胞活性为1．35±0．20，集落数为133．7±10．4，而Zt／f2（2F2）单抗处理组细胞活性为0．68±0．11，集落数为66．3±6．1，差异均有统计学意义（P值均〈0．05）；Zt／f2（2F2）单独处理组细胞凋亡率为（12．16±2．33）％，G0／G。期细胞所占比例为（54．96±3．70）％，与对照组细胞凋亡率[（2．89±1．03）％]、G0／G1期细胞所占比例[（39．10±2．30）％]比较差异均有统计学意义（P值均〈0．05）；Zt／f2（2F2）可以显著降低MSP刺激引起的RON磷酸化水平以及B—catenin蛋白的表达，且使凋亡蛋白caspase-3、-8、-9和多聚ADP核糖聚合酶表达水平增高，抗凋亡基因MCL-1和凋亡抑制蛋白XIAP表达水平下降，而且G．期周期蛋白相应改变。结论RON激活后促进Raji细胞恶性生物学行为；Zt／f2（2F2）可通过抑制Raji细胞RON磷酸化水平改变其G。期周期蛋白和相关凋亡蛋白的表达水平，实现抑制细胞增殖和诱导凋亡的目的。
- 詹碧翠董悦涵范剑姚航平金洁童向民
- 关键词：伯基特淋巴瘤受体蛋白质酪氨酸激酶类
- RON基因在淋巴瘤的表达及与EB病毒感染相关性研究
- 2013年
- 目的研究RON基因在不同淋巴瘤组织及其细胞株中的表达情况及与EB病毒感染的相关性。方法通过免疫组织化学染色法检测淋巴瘤患者以及正常和炎性淋巴组织RON的表达,计算RON阳性组织的比例及RON蛋白表达阳性标记强度特征;蛋白免疫印迹法检测淋巴瘤细胞株RON的表达情况;并且用原位杂交的方法检测EBV编码的小RNA(EBER)在伯基特淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤组织的表达情况。结果 RON在霍奇金淋巴瘤和伯基特淋巴瘤组织中阳性率分别为55.0%(11/20)、66.7%(8/12),高于其在良性淋巴组织(正常淋巴组织及炎性淋巴组织)中的表达(P均<0.05)。进一步发现霍奇金淋巴瘤和伯基特淋巴瘤组织芯片及其细胞株L428和Raji细胞株中RON表达水平远高于其他淋巴瘤。霍奇金淋巴瘤和伯基特淋巴瘤中EB病毒的阳性和RON过表达相关性密切。结论 RON在淋巴瘤中表达呈异质性,其中伯基特淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤中高表达,而且两者的RON过表达和EB病毒感染密切相关。
- 高相礼范剑姚航平童茵童向民金洁
- 关键词：淋巴瘤RON基因表达EB病毒
- 热休克蛋白96白血病抗原肽抗髓系白血病效应的研究被引量：1
- 2013年
- 目的研究热休克蛋白96(HSP-gp96)白血病抗原肽的抗白血病效应及相关机制。方法将不同的白血病细胞株(K562、HL-60、U937)分别分为A、B细胞株组,A组加预先构建的HSP-gp96重组腺病毒感染,B组不加以感染。将两组细胞株均制备为相应的抗原肽(分别设为A1、B1组),外周血单个核细胞诱导树突细胞(DC)后分别负载A1及B1组抗原肽以分别获取相应的DC复合物(分别设为A2、B2组)。用四甲基偶氮唑蓝反应比色法检测各组对T淋巴细胞增殖的影响,用乳酸脱氢酶释放法检测其在不同效靶比下的自然杀伤细胞(NK)活性和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)效应,并比较K562来源的A2组复合物对3种白血病细胞株杀伤效应的不同。结果与A、B及B1组相比,3种不同细胞株的A1、A2和B2组均可刺激T淋巴细胞的增殖,同时也能增强NK细胞活性和CTL效应(P均<0.05)。其中A1、A2组对NK活性和CTL效应的增强尤为显著。且随着效靶比的增加,A1、A2和B2组NK细胞活性和CTL效应也明显增强。另外,K562细胞株制备的A2组复合物的CTL效应在K562细胞中明显增强,与HL-60及U937细胞相比,差异有统计学意义。结论 HSP-gp96白血病抗原肽抗白血病效应明显,经DC诱导后其作用增强,且后者对同源细胞株的杀伤效应具有特异性。
- 方群张卫平赵洪灿范剑沈丹童向民
- 关键词：树突细胞
- 支气管哮喘患者Th17及Tc17细胞的表达及意义被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨外周血Th17细胞、Tc17细胞在支气管哮喘患者中的表达及临床意义。方法:选取37例轻度和23例中重度急性支气管哮喘患者及26例哮喘缓解患者作为研究对象,采用流式细胞术检测Th17细胞及Tc17细胞百分率、Treg细胞的百分率,ELISA方法测定IL-17的表达。结果:轻度、中重度急性哮喘组外周血中Th17及Tc17细胞百分率,IL-17的含量均高于缓解组及正常对照组(P<0.01),中重度哮喘组高于轻度哮喘组(P<0.01)。Tc17细胞在治疗缓解组中表达高于正常对照组(P<0.01)。结论:Tc17细胞及Th17/Tc17联合检测可能成为哮喘发作期的检测指标,并有望为哮喘的治疗提供新的靶点。
- 解晶张仙森范剑沈丹童向民
- 关键词：支气管哮喘TH17细胞
