黑龙江省科技攻关计划(20020101303)
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 相关作者：王维治孙威刘春华朱雨岚更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 头孢曲松神经保护作用及其与胶质细胞谷氨酸转运体1表达的关系
- 2007年
- 目的:研究头孢曲松对神经细胞的保护作用及其机制。方法:培养大鼠脑皮层神经细胞,加头孢曲松保护和谷氨酸损伤,光镜及四氮唑蓝(MTT)比色法观察细胞改变,逆转录-聚合酶链反应(RT- PCR)检测GLT1 mRNA、EAAC1 mRNA表达变化;激光共聚焦显微镜(LSCM)实时观测加或不加二氢红藻氨酸(DHK)后谷氨酸诱导钙超载时细胞内Ca^(2+)荧光强度变化。结果:头孢曲松组较对照组神经细胞损伤减轻,GLT1 mRNA表达增加(0.435±s 0.006,P<0.01);细胞内Ca^(2+)荧光强度在钙超载后上升缓慢但恢复迅速,加入DHK后,与对照组变化基本相同。结论:头孢曲松通过上调GLT1 mRNA表达,减轻谷氨酸细胞毒性和内钙超载,对神经细胞产生保护作用。
- 刘春华王维治
- 关键词：头孢曲松谷氨酸神经元谷氨酸转运体
- 海人酸致痫大鼠海马IL-1β、TNF-α的表达被引量：4
- 2007年
- 目的立体定向手术建立海人酸(KA)颞叶癫痫大鼠模型,检测海马内IL-1β、TNF-α蛋白及其mRNA的表达。方法大鼠随机分为空白对照组、生理盐水对照组和模型组。模型组大鼠一侧海马CA3区注射KA(生理盐水组注射生理盐水),观察其行为学特征,HE染色和Nissl染色以及电镜观察其病理学改变,免疫组化法检测大鼠海马内IL-1β、TNF-α蛋白的表达,原位杂交法检测TNF-αmRNA的动态表达。结果大鼠注射KA后出现湿狗样抖动、头面部肌阵挛、肢体阵挛及全面强直阵挛发作等,病理结果显示海马神经元变性、缺失及胶质细胞增生,模型组IL-1β在致痫后36、h表达水平明显增加并于12 h达高峰,之后逐渐下降,7 d后与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);TNF-α蛋白与mRNA表达时程基本一致,3 h出现,12 h达高峰,而后逐渐下降,7 d后回归至对照组表达水平,15、30 d又高于对照组(P<0.05)。结论(1)大鼠一侧海马注射KA是人类颞叶癫痫理想的动物模型;(2)内源性IL-1β、TNF-α参与了癫痫发病机制。
- 孙威王维治
- 关键词：IL-1ΒTNF-Α海人酸海马
- 海人酸癫痫大鼠模型的TNF-α及其mRNA表达特征被引量：1
- 2006年
- 目的立体定向手术建立海人酸颞叶癫痫模型,检测癫痫大鼠海马内TNF-α及其mRNA的表达, 评价其意义。方法大鼠一侧海马CA3区注射海人酸,观察其行为学特征及HE染色的病理学改变,免疫组化和原位杂交法检测大鼠海马内TNF—α蛋白和mRNA的动态表达。结果大鼠注射海人酸后出现湿狗样抖动、头面部肌阵挛、肢体阵挛及全面强直阵挛发作等,病理可见海马神经元变性、缺失及胶质细胞增生,海马内TNF-α蛋白与 mRNA表达时程基本一致,3h出现,12h达高峰,而后逐渐下降,7d后回归至对照组表达水平,15d,30d又高于对照组。结论在一侧海马注射海人酸的大鼠癫痫模型中,内源性TNF—α参与了癫痫的发病机制。
- 孙威王维治
- 关键词：TNF-Α海人酸海马
- 一侧海马注射海人酸建立颞叶癫痫模型大鼠的相关特征
- 2006年
- 目的:采用立体定向手术的方法建立海人酸颞叶癫痫大鼠模型,探讨其行为学表现,并观察海马各区病理学改变以及肿瘤坏死因子α的表达特点。方法:实验于2005-03/09在哈尔滨医科大学附属第二医院实验动物中心进行。①分组:健康雄性清洁级Wistar大鼠104只,分为空白对照组8只、生理盐水对照组32只和模型组64只,后两组每组又分3,6,12,24h,3,7,15,30d等8个时点,其中生理盐水对照组每时点4只,模型组每时点8只。②大鼠一侧海马CA3区注射海人酸1.0μL(生理盐水对照组抽取生理盐水1.0μL),缓慢注射,于10～15min内注射完毕,留针5min后拔出。③观察各组大鼠的行为学表现,苏木精-伊红染色法观察海马各区病理学改变,免疫组化法检测大鼠脑海马内肿瘤坏死因子α蛋白的动态表达。结果:①在行为学上,模型组大鼠注射海人酸后可出现湿狗样抖动、头面部肌肉阵挛、肢体阵挛及全面强直阵挛发作。空白对照组和生理盐水对照组未见癫痫发作。②病理学上,一侧海马注射可造成双侧损害,注射侧重以CA3和门区为主,对侧轻且以CA1和门区为主。③免疫组化结果:肿瘤坏死因子α蛋白在海马各区均有表达,神经元、胶质细胞均见表达。海马内肿瘤坏死因子α蛋白在3h出现,12h时达高峰,而后逐渐下降,7d后与生理盐水对照组表达水平相似,15,30d又稍高于生理盐水对照组。结论:大鼠一侧海马注射海人酸是理想的人类颞叶癫痫动物模型,内源性肿瘤坏死因子α可能通过各种方式影响脑内功能活动,参与癫痫发病过程。
- 孙威王维治朱雨岚
- 关键词：红藻氨酸肿瘤坏死因子
- 头孢曲松钠对谷氨酸诱导脑皮质神经元损伤的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨头孢曲松钠对谷氨酸诱导脑皮质神经元损伤的影响。方法体外培养的大鼠脑皮质神经元分为头孢曲松钠(A)组、谷氨酸(B)组、头孢曲松钠预处理(C)组和对照(D)组;观察各组细胞形态变化;四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞活性;激光共聚焦显微镜观察静息及短暂细胞内钙超载状态下细胞内Ca2+变化;逆转录-聚合酶链技术检测谷氨酸转运体1(GLT1)mRNA表达。结果与B组比较,C组神经元形态更接近正常;吸光度值A组、B组、C组、D组分别为0.795±0.010、0.624±0.028、0.738±0.021、0.813±0.023,B组及C组明显低于D组,但C组明显高于B组(均P<0.001);细胞Ca2+平均荧光强度静息状态下A组、B组、C组、D组分别为127.329±12.086、281.400±21.378、220.171±24.061、141.257±6.165,C组明显低于B组(P<0.001),短暂细胞内钙超载时C组较B组上升缓慢但恢复迅速,GLT1mRNA表达增加(P<0.001)。结论头孢曲松钠通过上调GLT1mRNA表达拮抗细胞内钙超载,减轻谷氨酸的神经毒性作。
- 刘春华王维治
- 关键词：头孢曲松钠谷氨酸细胞内钙谷氨酸转运体
- 头孢曲松钠对谷氨酸神经毒性的影响及其机制被引量：2
- 2007年
- 目的研究头孢曲松钠对谷氨酸神经毒性的影响及其机制。方法培养大鼠脑皮层神经细胞,加入谷氨酸损伤和头孢曲松钠保护作用,光镜及电镜观察细胞损伤程度,短暂谷氨酸诱导细胞内钙超载后,激光共聚焦显微镜实时观测细胞内Ca2+荧光强度变化,免疫组化、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胶质细胞性谷氨酸转运体1(GLT1)蛋白及GLT1mRNA表达变化。结果头孢曲松钠预处理组较谷氨酸组神经细胞光镜形态更接近正常,电镜超微结构损伤明显减轻,短暂细胞内钙超载后细胞内Ca2+相对荧光强度上升缓慢但恢复迅速,GLT1蛋白及GLT1mRNA表达增加(P<0.01)。结论头孢曲松钠通过上调GLT1mRNA表达,能减轻谷氨酸引起的细胞损伤和细胞内钙超载作用,对神经细胞产生保护作用。
- 刘春华王维治
- 关键词：头孢曲松钠谷氨酸谷氨酸转运体
