江苏省博士后科研资助计划项目(0702040C)
- 作品数：4 被引量：35H指数：4
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- 相关机构：南京军区南京总医院第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：江苏省博士后科研资助计划项目国家自然科学基金更多>>
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- 树突状细胞在角膜移植排斥反应中的免疫调节机制的探讨被引量：4
- 2008年
- 目的观察自体未成熟树突状细胞(iDC)对于小鼠同种异体角膜移植的免疫调节作用,探讨其作用机制。方法PBS或自体iDC尾静脉注射7d后,采用双色免疫荧光染色法及流式细胞术分析小鼠脾脏中CD4+CD28+及CD4+CTLA-4+ T细胞的表达。PBS或自体iDC尾静脉注射7d后进行小鼠同种异体角膜移植,临床观察两组植片的存活时间。结果iDC注射后,脾脏中CD4+CD28+ T细胞的比例下降(P<0.01),而CD4+CTLA-4+ T细胞比例明显升高(P<0.01)。iDC经尾静脉注射后明显延长了同种异体角膜移植片的存活时间(P<0.01)。结论iDC可诱导CD80/CD86-CTLA-4抑制型共刺激信号替代CD80/CD86-CD28信号通路,从而阻断协同刺激信号的传递及T细胞的活化,对于同种异体角膜移植排斥反应具有免疫抑制作用。
- 闫峰蔡莉黄振平丁莉莉惠延年
- 关键词：树突状细胞CD28免疫调节
- 小鼠角膜移植排斥反应中植片内细胞因子表达水平的变化被引量：6
- 2012年
- 背景研究表明细胞因子在角膜移植免疫调节中起重要的作用，但关于角膜移植术后角膜植片内细胞因子表达的变化报道较少。目的探讨角膜移植术后不同时间点细胞因子的表达变化。方法采用雌性6～8周龄BALB／c小鼠及C57BL／6小鼠分别建立小鼠自体角膜移植和同种异体角膜移植模型，每组各10只，自体角膜移植术组供体和受体同为BALB／c小鼠，同种异体角膜移植术组供体为C57BL／6小鼠，受体为BALB／c小鼠。于术后1d开始临床观察角膜植片并对炎症程度进行评分，当植片评分总和≥5分或植片混浊≥2分时为发生植片排斥反应。将BALB／c小鼠随机分为正常对照组3只和同种异体角膜移植术组15只，后者分别于术后6h及1、3、7、14d对角膜植片行逆转录PCR（RT—PCR）检测植片中细胞因子白细胞介素4（IL-4）、γ-干扰素（IFN-γ）、IL-10、肿瘤坏死因子α（TNF—α）表达的变化。结果在60d的观察期中，自体角膜移植术后小鼠角膜植片混浊评分均〈2分，植片的炎症评分之和均〈5分，植片存活率为100％，但同种异体角膜移植术后角膜植片水肿、混浊，伴有角膜新生血管形成，至术后24d角膜植片排斥反应评分之和均≥5分，植片混浊评分≥2分，全部发生排斥反应，角膜植片平均存活时间为（17．80±4．66）d。RT—PCR检测结果表明，正常角膜中IL-4和IFN-γ呈阳性表达，IL-10和TNF-α表达阴性。同种异体角膜移植术后6h可检测到IL-4呈阳性表达，IFN-γ和IL-10表达呈强阳性，而未检测到TNF—α的表达。术后1～3d角膜植片中IL-4呈强阳性表达，IFN-γ阳性表达，TNF—α表达增强，IL-10表达逐渐消失。角膜移植术后7d，可见IL-4表达阴性，而IFN-γ、IL-10和TNF—α仍呈强阳性表达。至术后14d，角膜植片中IL-4、IFN-γ和TNF—α．均未见表达，仅检测到IL-10呈阳性表达。结论TNF-α是角膜移植术后
- 闫峰石尧蔡莉
- 关键词：角膜移植排斥
- 小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分离纯化及鉴定被引量：8
- 2009年
- 目的:调节性T细胞(Treg)是近年来免疫学研究的热点。文中研究获取高纯度Treg的方法及其表型的鉴定。方法:流式细胞术(FACS)分析正常小鼠脾脏中CD4+、CD4+CD25+、CD4+CD25-3个细胞亚群的表型;采用二步磁性细胞分选法(MACS)纯化小鼠脾细胞中CD+CD25+Treg,并对分离后的细胞表型进行鉴定。结果:①依CD25表达水平不同将小鼠天然CD4+T细胞划分为3群,转录因子Foxp3、细胞毒T淋巴细胞相关分子-4(CTLA-4/CD152)、糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体(GITR)、CD69在CD4+CD25+细胞亚群呈显著性高表达(P<0.01),CD4+CD25+T细胞主要存在于CD45RB低表达细胞亚群,CD28的表达在CD4+CD25+细胞亚群明显下降(P<0.05)。②使用二步MACS法从正常小鼠脾脏中分离CD4+CD25+T淋巴细胞的得率为1%～1.2%,纯度为87.29%～92.04%。FACS分析结果显示,Foxp3优先表达于CD4+CD25+T细胞亚群,表达率为(66.60±1.03)%,而在CD4+和CD4+CD25-T细胞亚群呈低水平表达,分别为(23.97±2.00)%和(16.78±3.24%)。CTLA-4在CD4+CD25+T细胞亚群表达率为(77.37±1.67)%,明显高于在CD4+和CD4+CD25-T细胞亚群的表达[(21.97±2.39)%和(18.04±3.16)%]。纯化的CD4+CD25+T细胞亚群表现为CD127的低表达。结论:MACS阴性加阳性二步分选法避免激惹CD4分子,可获得高纯度且具有天然CD4+CD25+Treg细胞表型及功能特征的细胞。
- 闫峰黄振平蔡莉薛春艳丁莉莉
- 关键词：调节性T细胞流式细胞术分析
- 调节性T细胞与免疫耐受被引量：18
- 2009年
- 调节性T细胞(Treg)在诱发免疫耐受和治疗自身免疫性疾病中起重要作用。文中就Treg的分类、特性、作用机制及与免疫耐受的关系等方面的研究进展进行综述,旨在为治疗同种异体移植排斥反应和其他自身免疫性疾病提供理论依据。
- 闫峰黄振平
- 关键词：调节性T细胞免疫耐受
