国家自然科学基金(81172244) 作品数:7 被引量:28 H指数:3 相关作者: 刘艳辉 徐方平 陈洁 张芬 骆新兰 更多>> 相关机构: 广东省人民医院 汕头大学 广东省人民医院(广东省医学科学院) 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家临床重点专科建设项目 广东省医学科学技术研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
荧光共振能量转移技术在肿瘤研究中的应用进展 被引量:1 2015年 近年来,肿瘤基因组学、靶向治疗等方面的研究进展显著扩大了蛋白质-蛋白质相互作用在肿瘤研究中的应用。荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)是一种非辐射的能量转移,可以定时、定量、定位、动态地观察活细胞内蛋白质与蛋白质之间的相互作用。随着荧光蛋白的发现及基于FRET原理设计的生物探针的发展,FRET已成为观察活细胞内生物大分子之间相互作用的重要方法。文中就目前FRET技术在肿瘤基础研究、早期诊断、预后评价及药物研发等领域中的应用进行综述。 陈玉 徐方平 刘艳辉关键词:荧光共振能量转移 荧光蛋白 蛋白质-蛋白质相互作用 肿瘤 MTX相关性原发中枢神经系统淋巴瘤1例并文献复习 被引量:1 2018年 目的探讨MTX相关淋巴增殖性疾病(methotrexateassociated lymphoproliferative disorders,MALD)的临床病理特征、鉴别诊断及预后。方法回顾性分析1例MTX相关原发中枢神经系统淋巴瘤(primary central nervous lymphomas,PCNSL)的临床病理资料并复习相关文献。结果患者男性,61岁。因行走不稳伴右下肢乏力半个月入院,银屑病7~8年,每天口服MTX 0.25 mg。头颅MR示左侧扣带回及胼胝体体部占位性病变。脑肿物病理结果:非霍奇金淋巴瘤,B细胞性;弥漫大B细胞淋巴瘤(非生发中心型)免疫亚型;老年性EBV^+弥漫大B细胞淋巴瘤。EBER检测阳性。免疫表型:CD20、CD79a、CD30、BCL-2、CD43均弥漫强阳性,MUM1(70%阳性),Ki-67(90%阳性),BCL-6(<10%阳性)。CD3、CD5、CD10、CD15、EMA、CD4、CD2、ALK、CD138、TDT、Cyclin D1、CD56、TIA-1、c-myc均阴性。BCR毛细管电泳法显示:Ig H基因可见克隆性重排;Ig K、Ig L基因未见克隆性重排。BCL-2/Ig H、BCL-6 BA、c-myc BA荧光原位杂交结果均阴性。结论 MALD临床少见,极易误诊。熟悉其临床病理表现及免疫表型特征,结合临床病史,有助于正确诊断。 葛岩 许洁 林兴滔 徐方平 刘艳辉关键词:原发中枢神经系统淋巴瘤 免疫组织化学 同时发生myc和bcl-2/IgH或bcl-6易位的B细胞淋巴瘤临床病理特征 被引量:12 2013年 目的观察同时发生mye和bcl-2/IgH或bcl-6易位的B细胞淋巴瘤(“双击”淋巴瘤)的临床病理学特点。方法收集145例经活检诊断的侵袭性成熟B细胞淋巴瘤病例石蜡包埋组织,其中包括弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)129例,具有介于DLBCL和伯基特淋巴瘤(BL)之间特征无法分类的B细胞淋巴瘤(BCLU)5例,BL7例和高级别滤泡淋巴瘤合并DLBCL4例,在组织芯片上进行myc、bcl-2/IgH和bcl-6系列探针的问期荧光原位杂交检测,记录基因易位情况、拷贝数变化和其他基因异常,同时收集病例的临床、病理学及随访资料。结果共检测出同时发生myc和bcl-2或bcl-6基因易位(“双击”淋巴瘤)病例5例,检出率5/145(3.4%);其中myc伴bcl-2易位2例(原形态学诊断1例是DLBCL,1例是BCLU);myc伴bcl-6易位3例,均为DLBCL。Ki-67阳性指数60%~100%。另发现3例bcl-2伴bcl-6易位,均为DLBCL。其余DLBCL病例中出现单个基因易位或拷贝数增加的占51.2%(66/129)。随访资料显示,5例“双击”淋巴瘤患者中3例在诊断后2年内死亡,1例失访,1例随访36个月无病生存。结论“双击”淋巴瘤属于罕见病例,主要根据基因检测手段来诊断,形态学上不完全等同于2008WHO分类中的BCLU这一亚型,还可表现为其他的形态学谱系。大部分患者预后差。 罗东兰 刘艳辉 张芬 徐方平 颜黎栩 陈洁 许洁 骆新兰 庄恒国人免疫缺陷病毒阴性的浆母细胞性淋巴瘤临床病理观察 被引量:6 2015年 目的探讨人免疫缺陷病毒(HIV)阴性的浆母细胞性淋巴瘤(PBL)的临床病理特征、免疫表型、分子遗传学特点及预后。方法回顾性分析2005至2014年间的可疑为PBL的病例,根据WHO(2008)造血与淋巴组织肿瘤新分类中PBL诊断标准,确诊并总结12例HIV阴性的PBL的临床病理特点、免疫表型,随访获取患者的预后信息,并复习相关文献。结果患者多为男性(11/12),中位年龄55.5岁,肿瘤细胞呈免疫母细胞或浆母细胞样特点,免疫组织化学表达浆细胞标记,不表达成熟B细胞标记,10/12的病例Ki-67阳性指数≥80%,7/10的病例EB病毒编码的小RNA(EBER)阳性。可伴有C-myc基因易位重排(2/5)。12例PBL患者中4例死亡。结论PBL是一类罕见的、高侵袭性的B细胞淋巴瘤,而HIV阴性的PBL则更为少见,侵犯口腔及EB病毒阳性的概率低于HIV阳性者,鉴别诊断存在很大挑战,预后更差。 陈玉 刘艳辉 罗东兰 张芬 徐方平 葛岩 骆新兰 陈洁关键词:淋巴瘤 疱疹病毒4型 预后 滤泡间树突样大B细胞淋巴瘤一例 2012年 患者男,22岁。因发热及咳嗽2个月于2009年6月入院。体检见双侧颈部、左侧腋窝及双侧腹股沟多个淋巴结肿大,最大径达2.5cm,双下肢多发红色皮疹。 刘艳辉 李旻 张芬 庄恒国 骆新兰关键词:大B细胞淋巴瘤 树突 淋巴结肿大 红色皮疹 腹股沟 侧腋窝 难转染悬浮细胞OCI-LY8慢病毒过表达稳定细胞株的构建 被引量:5 2014年 目的探讨难转染悬浮细胞慢病毒过表达稳定细胞株的构建方法。方法选用人弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞株OCI-LY8为研究对象,分别用Fbw7基因的慢病毒原液、慢病毒浓缩液、慢病毒浓缩液加入终浓度为5μg/mL的1,5-二甲基-1,5-二氮十一亚甲基聚甲溴化物(polybrene)、慢病毒浓缩液加入终浓度为10μg/mL的polybrene 4种方式进行感染。因慢病毒载体含有绿色荧光蛋白报告基因,故通过倒置荧光显微镜观察细胞内荧光的数量及强度来评判上述4种方式的感染效率,并用Real-time PCR和Western blot进行验证。结果慢病毒原液的感染效率极低,仅在少许细胞中看到极微弱的荧光;慢病毒浓缩液的感染效率尚可,约有60%的细胞可以观察到微弱的荧光;慢病毒浓缩液中加入5μg/mL polybrene的感染效率较高,约90%的细胞可以观察到较强的荧光;慢病毒浓缩液中加入10μg/mL polybrene的感染效率极高,几乎全部细胞均可以观察到很强的荧光。结论慢病毒浓缩液中加入合适浓度的polybrene是感染DLBCL细胞株OCI-LY8较为有效的方法。慢病毒的感染效率与细胞的状态、感染复数、polybrene的浓度密切相关。 黄会杰 葛岩 罗国兰 徐方平 许洁 陈洁 张科平 刘艳辉关键词:慢病毒载体 悬浮细胞 肿瘤抑制基因FBW7在肿瘤发病过程中的作用和机制 被引量:3 2013年 FBW7是定位于4q31的抑癌基因,其编码的蛋白FBW7是SCF(SKP1/CUL1/F.box)型泛素连接酶(E3)中介导底物识别的部分,常参与底物的泛素化。而后该泛素化的底物被26S的蛋白酶体降解。FBW7可介导包括癌蛋白在内的许多重要蛋白质的泛素化,如cyclinE、Notch、c—Jun、c—myc、mTOR和Mc1.1等许多在细胞周期、细胞增殖及分化过程中发挥重要作用的蛋白质。2004年Rajagopalan等发现FBW7失活可引起染色体不稳定,并和肿瘤的发生密切相关。 黄会杰 郑芳 徐方平 刘艳辉 庄恒国关键词:肿瘤抑制基因 发病过程 CYCLINE 染色体不稳定 蛋白酶体 泛素连接酶