国家自然科学基金(81160378)
- 作品数：6 被引量：19H指数：3
- 相关作者：丁剑冰吴晔华徐琦朱明李艳华更多>>
- 相关机构：新疆医科大学新疆医科大学第一附属医院更多>>
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- 细粒棘球蚴EgG1Y162基因进化分析、表达及鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的：克隆和鉴定细粒棘球蚴的Eg G1Y162基因,分析其蛋白表达和适应性进化并鉴定抗原性。方法：根据em Y162基因序列设计引物,分别从细粒棘球绦虫原头蚴、囊壁生发层、成虫和虫卵四个发育阶段,提取基因组DNA和总RNA,mRNA反转录为c DNA,利用PCR的方法以基因组DNA和c DNA为模板扩增Eg G1Y162基因;构建PUCm-T/Eg G1Y162重组质粒,经PCR、酶切及测序鉴定后,测序确定其正确性。利用DNAman软件与MEGA4软件对Eg G1Y162基因特点进行分析并构建Eg G1Y162核酸序列的进化树进一步探讨其同源性。荧光定量PCR检测Eg G1Y162基因在细粒棘球绦虫原头蚴、囊壁生发层、成虫和虫卵四个不同发育阶段的表达情况。利用定向克隆技术将Eg G1Y162抗原基因片段克隆至原核表达质粒PET-41a上,通过酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆,测序确定序列。IPTG初步诱导和表达Eg G1Y162-GST重组蛋白,通过SDS-PAGE电泳和Western blot试验分析鉴定。结果：从细粒棘球绦虫的两个不同发育阶段均克隆出Eg G1Y162基因,从总DNA克隆得到片段长度1 680bp,从c DNA克隆得到片段长度459bp。相似性比较表明,Eg G1Y162基因序列与em Y162相似性为91%,而Eg G1Y162基因c DNA与em Y162相似性为95%。进一步分析显示,Eg G1Y162基因序列由3个外显子和2个内含子组成,外显子区域分别为1～70,1 064～1 380和1 577～1 648。位于疏水端1～16位氨基酸构成Eg G1Y162信号肽序列,35～115位氨基酸形成一个大的纤黏连蛋白剪接体FN3,133～152位氨基酸构成羧基端跨膜区域。测序结果显示Eg G1Y162抗原基因长度为360bp,编码120个氨基酸。通过荧光定量PCR检测,发现Eg G1Y162在成虫、生发层阶段、原头蚴和虫卵阶段均有不同程度的表达。但是Eg G1Y162在成虫中的表达量最多,相对值为19.526,差异有统计学意义（P〈0.01）,其次生发层阶段,为5.122,再次在原头蚴阶段,相对值为5.083,而在虫卵阶段最�
- 祖力皮也·吐尔逊曹春宝温浩丁剑冰德力夏提·依米提
- 关键词：抗原进化树荧光定量PCR原核表达
- 共刺激分子OX40在抗感染免疫中的作用被引量：1
- 2013年
- 正性共刺激分子OX40与多种疾病(如肿瘤、自身免疫性疾病、移植排斥反应等)的发生、发展有关,能促进T细胞的活化和细胞因子的分泌。调节性T细胞通过免疫抑制与免疫耐受机制影响疾病的发展。本文主要就OX40/OX40L与调节性T细胞的关联性及其在病毒、细菌、真菌、寄生虫等病原体引起的感染性疾病中的调节机制的研究进展进行简要综述。
- 李艳华丁剑冰张韬张耀新
- 关键词：OX40TREG感染性疾病
- 新疆黑蜂胶体外抑制大肠杆菌生物膜的研究被引量：2
- 2013年
- 目的建立大肠杆菌生物膜(BF)体外模型,研究不同浓度新疆黑蜂胶对大肠杆菌体外培养BF形成及清除的影响。方法采用微孔板改良法复制大肠杆菌体外BF模型,采用试管二倍稀释法测定新疆黑蜂胶的最低抑菌浓度(MIC),并检测黑蜂胶不同浓度对大肠杆菌BF形成的影响,同时通过检测新疆黑蜂胶对成熟BF中活菌数的影响,评价其对成熟BF的清除作用。结果新疆黑蜂胶醇提物对大肠杆菌的MIC为12.50 g/L,当浓度为6.25 g/L时新疆黑蜂胶就可在早期干扰细菌BF的形成,作用呈剂量依赖性;当浓度达到50.00 g/L时,其抑制BF的作用与庆大霉素相比差异无统计学意义(P>0.05)。在对成熟BF的清除作用中的研究中,当黑蜂胶浓度达12.50 g/L时,能有效清除成熟BF,而当浓度达到50.00 g/L时,其清除成熟BF的作用与庆大霉素相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论新疆黑蜂胶醇提物在体外具有抑制大肠杆菌BF形成的作用,且能通过破坏已形成的BF起到抗菌作用,为临床辅助治疗耐药性感染,提供实验依据。
- 朱明徐琦吴晔华谢天宇李芳芳邵婷婷崔雅静赵姝月
- 关键词：最低抑菌浓度大肠杆菌生物膜
- PD-1与CTLA-4在泡球蚴感染小鼠肝脏中的动态变化研究被引量：5
- 2013年
- 目的研究负性协同刺激分子PD-1和CTLA-4表达水平在泡球蚴持续性感染小鼠肝脏中的变化特点,探讨其在泡球蚴感染中的免疫作用。方法将90只雌性Balb/c小鼠随机分为实验组和对照组,实验组通过腹腔接种原头蚴悬液制备泡球蚴感染小鼠模型,对照组腹腔注射等量生理盐水。分别在接种2、8、30、90、180和330 d收集标本。用HE染色观察肝脏病理变化;免疫组化法和实时荧光定量PCR检测PD-1和CTLA-4在肝脏的表达及分布。结果肝脏泡球蚴持续性感染中,PD-1和CTLA-4在感染早期少量表达;感染中晚期表达水平均明显升高,而且均维持一定的高水平。结论 PD-1与CTLA-4表达的增加可能促进泡球蚴感染病情的发展,参与泡球蚴的免疫逃避并利于泡球蚴在机体内的长期寄生。
- 李艳华张峰波赵慧周晓涛胡晓安马秀敏魏琴丁剑冰
- 关键词：PD-1CTLA-4多房棘球绦虫
- Effect of Different Types of Macrophages Re-infusion on Hepatic Fibrosis in Mice with Echinococcus Granulosus
- Background:Echinococcus Granulosus infections can lead to liver fibrosis.Liver fibrosis following various chro...
- Yan YiMa XiuminLiu YumeiPeng ShanshanJiang TaoLi HuijunLi BinYimiti DelixiatiWen HaoDing Jianbing
- 关键词：MACROPHAGE
- 文献传递
- 新疆黑蜂胶对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响被引量：6
- 2014年
- 目的研究新疆黑蜂胶提取物对金黄色葡萄球菌生物膜(bacterial biofilm,BF)形成的影响,为临床辅助治疗耐药性感染提供实验依据。方法用醇提法提取新疆黑蜂胶得到黑蜂胶提取物,采用试管二倍稀释法测定蜂胶的最低抑菌浓度(MIC),用微孔板改良法复制金黄色葡萄球菌BF模型,并检测新疆黑蜂胶不同MIC浓度对金黄色葡萄球菌BF形成的影响,同时通过检测蜂胶对成熟金黄色葡萄球菌BF中活菌数的影响评价其对成熟金黄色葡萄球菌BF的作用。结果新疆黑蜂胶提取物对金黄色葡萄球菌的MIC为6.25mg/ml,当浓度为3.125 mg/ml时新疆黑蜂胶就可干扰细菌BF的形成,致活菌数明显少于空白对照组;新疆黑蜂胶还可以抑制并破坏成熟金黄色葡萄球菌BF,高浓度蜂胶抗菌活性与青霉素相比无显著性差异。结论新疆黑蜂胶提取物在体外具有抑制金黄色葡萄球菌BF形成的作用,并能破坏已形成的BF,具备开发应用的潜力。
- 朱明于倩吴晔华雒云霄文昊王嘉颖徐琦
- 关键词：大肠杆菌金黄色葡萄球菌生物膜
- 包虫病基因重组疫苗的研究被引量：4
- 2013年
- 分子生物学技术的快速发展,使基因工程疫苗的研究更加深入。与此种新型疫苗相比传统疫苗已体现出预防效果不够理想,不容易保存,技术难度大,成本高等诸多缺陷。因此,对基因工程疫苗的开拓研究已成为当前疫苗领域的一个热点。本文简要概述了近年来包虫病基因工程疫苗研究现状及其发展前景。
- 德力夏提·依米提祖力皮也·吐尔逊张峰波曹春宝丁剑冰
- 关键词：包虫病基因工程疫苗
