河南省自然科学基金(0311032400) 作品数:8 被引量:37 H指数:4 相关作者: 宁长申 张龙现 菅复春 刘光辉 姚雷 更多>> 相关机构: 河南农业大学 中国农业大学 河南省动物疫病预防控制中心 更多>> 发文基金: 河南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
猪等孢球虫PCR诊断方法的建立 被引量:6 2007年 参照GenBank收录的Isospora suis 18SrRNA基因全序列(U97523),利用引物分析软件Oligo 6.57和Primer Premier 5.0设计了一对引物(上游引物:5'-tcctgcgagtactcatatgc-3';下游引物:5'-gttcagc-tacgcataccttg-3'),首次扩增出猪等孢球虫分离株的18SrRNA基因序列,结合GenBank上登录的相关原虫序列,用DNAstar4.0软件比较其同源性,经Clustalx1.81序列比对,Paup4.0、Treeview3.0、Phylip种系发育关系软件分析后,证实该分离株为猪等孢球虫,并且河南不同地区之间的猪等孢球虫没有明显遗传差异。 刘光辉 宁长申 张龙现 程俊贞 菅复春关键词:猪等孢球虫 PCR 仔猪感染猪等孢球虫排卵囊规律观察 被引量:2 2006年 为了进一步研究猪等孢球虫的排卵囊规律.本文验室通过对仔猪进行9次人工感染猪等孢球虫试验,对其进行研究。结果表明:①潜隐期集中出现在感染后5d,显露期为4~7d。②感染1万、5万及100万组在第1次排卵囊结束1~2d后出现第2次排卵囊高峰。③卵囊孢子化后出现厚壁型与薄壁型卵囊。④排卵囊后期薄壁型卵囊逐渐增多。 姚雷 宁长申 张龙现 菅复春 张敏 王芳 朱静 吕彪 孙彦平关键词:等孢球虫 mRNA差异显示技术及其在兽医科学领域的应用 被引量:1 2006年 传统mRNA差异显示技术针对真核细胞mRNA3′端poly(A)尾设计12种两个锚定碱基的Oligo(dT)引物(第1位碱基不为A),将不同的mRNA反转录成cDNA;同时在5′端设计20种10bp随机引物,这样构成的引物对可扩增出大体涵盖一定发育阶段某种细胞类型中所表达的全部mRNA,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,对比挑选差异表达片段。该技术具有简便、快速、RNA用量少、可同时比较多个样品、灵敏度高等优点,其主要不足是假阳性率较高。经不断优化反应条件,显著降低了假阳性的出现。目前该方法广泛应用于医学、动植物分子生物学等研究领域,用以检测差异表达基因和分离新基因、新特异性序列标签,研究动植物发育,检测遗传变异等。 张敏 宁长申 张龙现 菅复春关键词:MRNA差异显示 假阳性 猪等孢球虫纯种卵囊分离、扩增试验研究 应用单卵囊分离技术,获得纯种猪等孢球虫卵囊:然后感染仔猪,分别给每头猪感染30个纯种孢子化猪等孢球虫卵囊,观察了人工感染后的排卵囊规律,包括潜隐期、显露期及排卵囊高峰期,并收集到大量纯种猪等孢球虫卵囊;然后用收集到的纯种... 刘光辉 宁长申 张龙现 杨宇 程利锋文献传递 仔猪等孢球虫与等孢球虫病研究进展 被引量:8 2005年 仔猪等孢球虫病是由猪等孢球虫寄生在哺乳期及新近断奶仔猪小肠上皮细胞所引起的一种寄生性原虫病,呈世界性分布,给养猪场造成严重的经济损失。本文对猪等孢球虫病的病原分类、虫体形态和生活史、致病性、流行病学特点、临床症状、病理变化、诊断、防治等方面的目前研究状况进行了综述,为猪等孢球虫病的有效防制提供参考。 刘光辉 宁长申 张龙现 程俊贞 贺桂芬 闫文朝 史燕锋关键词:等孢球虫病 猪等孢球虫 寄生性原虫病 小肠上皮细胞 虫体形态 某种猪场猪疥螨感染情况调查及治疗试验 被引量:10 2006年 采用显微镜直接检查法和虫体浓集法,对河南某种猪场的保育猪、育肥猪和种母猪疥螨感染情况进行了调查,结果其感染率分别为55.0%、67.2%和40.0%,平均感染率为58.82%。分别应用1%伊力佳、阿力佳注射剂按0.3mg/kg体重1次皮下注射,或预混剂按1.5kg/t料混饲连喂1周或2周、或按2kg/t料混饲连喂1周对疥螨病猪进行治疗,用药后15d,螨虫转阴率均达100%,平均病变记分减少率为84.83%(81.6%~88.4%),表明上述2种药物不同剂型和用法、用量对猪疥螨病均具有良好疗效。建议规模化猪场使用1%阿力佳预混剂,按1.5kg/t料,混饲连喂1~2周防治猪疥螨病。 宁长申 臧为民 张龙现 菅复春 张志敏 刘红英 郭东春 康凯关键词:疥螨 伊力佳 感染率 猪等孢球虫致病性试验研究 国内外研究资料表明猪等孢球虫是引起仔猪球虫病的主要病原,为制定切实可行的预防措施提供依据,将30头1日龄长大二元仔猪随机分为五组,每组6头,除一个空白对照组外,其他5组每组每头仔猪分别一次经口感染1×104个、5×104... 刘光辉 宁长申 张龙现 程俊贞 贺桂芬 闫文朝 姚雷 赵光辉关键词:仔猪 猪等孢球虫 文献传递 等孢球虫细胞培养研究进展 被引量:3 2007年 等孢球虫病是畜禽的主要肠道原虫病,对畜牧业影响巨大。等孢球虫体外培养发展缓慢,严重制约着等孢球虫内生发育、药物筛选、虫株致弱等方面的研究。在此,从等孢球虫细胞培养的历史、意义、关键技术及支持细胞、培养基成份等方面综述了等孢球虫细胞培养近年来的研究进展,并提出了今后的研究展望。 姚雷 宁长申 张龙现 菅复春 杨飞鸽关键词:等孢球虫 细胞培养 培养基 猪等孢球虫PCR诊断方法的建立 参照GenBank收录的Isospora suis18SrRNA基因全序列(U97523),利用引物分析软件Oligo6.57和Primer Premier5.0设计了一对引物(上游引物:5’-tcctgcgagtact... 刘光辉 宁长申 张龙现 程俊贞 菅复春关键词:猪等孢球虫 PCR 文献传递 猪等孢球虫致病性试验研究 首先在用火焰高温消毒和百毒杀气雾熏蒸消毒过的无球虫环境中培育了30头2日龄的无球虫仔猪,随即分成5个试验组和1个对照组,使各组的体重趋于相近。应用卵囊纯化、浓集技术,获得一定浓度的猪等孢球虫纯种卵囊液,然后分五个剂量感染... 刘光辉 宁长申 闫文朝 贺桂芬 赵光辉 姚雷 李娜 张龙现文献传递