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人HSV-1 UL40基因重组质粒的构建及其在siRNA筛选中的应用被引量：2: 2007年; 目的:快速筛选出高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA,为进一步应用RNA干扰的相关研究奠定基础。方法:应用RT-PCR扩增人HSV-1F株UL40基因,将其连接到pEGFP-N1构建pEGFP-N1-UL40融合蛋白表达质粒。将化学合成的针对UL40基因的siRNA与重组质粒共转染Vero细胞,通过观察绿色荧光蛋白报告基因的表达筛选高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA。结果:倒置荧光显微镜观察发现设计的4对siRNA中siRNA3和siRNA4能明显降低绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测证明siRNA3和siRNA4对目的基因沉默效率分别达到76.99%和84.00%。结论:成功构建了人HSV-1 UL40基因融合表达载体pEGFP-N1-UL40,并利用该载体筛选出2对高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA。; 任哲张美英王一飞朱钦昌张春龙陆大祥胡巢凤李久香张佩琢杨志荣; 关键词：SIRNA

nm23-H1过表达对人白血病细胞系HL60细胞周期和分化的影响被引量：1: 2007年; 目的探讨nm23-H1基因过表达对人早幼粒白血病细胞株HL60细胞周期及分化的影响。方法构建nm23-H1cDNA的真核表达载体pEGFP-N1-nm23H1,脂质体介导瞬时转染HL60细胞;在荧光显微镜下观察nm23-H1-EGFP融合蛋白的表达情况;流式细胞术分析细胞周期变化;NBT还原比色法检测细胞的诱导分化能力。结果转染48hnm23-H1-EGFP融合蛋白在HL60细胞内表达量最高,此时细胞周期处于S期的细胞明显增多,对分化诱导剂DMSO的敏感性下降。结论nm23-H1基因的过表达能促进HL60细胞的增殖和抑制其分化。; 袁茵鲁欣张美英黄树林王一飞; 关键词：NM23-H1基因白血病细胞周期

siRNA分析nm23-H1基因与人慢性髓性白血病的关系被引量：3: 2006年; 设计并筛选靶向nm23-H1基因的siRNAs序列,探讨nm23-H1基因与人慢性髓性白血病之间的关系。依据siRNA设计原则,设计3条siRNA序列。将不同靶点的siRNA用lipofectamine2000转染人慢性髓性白血病细胞株K562。转染后24h RTPCR检测nm23-H1mRNA水平变化;转染后48h免疫细胞化学法检测nm23-H1蛋白表达。MTT法检测转染后24h、48h和72h有效siRNA对K562细胞生长的影响。3条siRNA中,siNM526能有效地抑制K562细胞nm23-H1基因表达,转染siNM526的K56细胞生长受到抑制。说明下调nm23-H1基因的表达有抑制K562细胞增殖的作用,即降低了K562细胞的恶性程度。nm23-H基因有可能成为白血病治疗潜在的分子靶点。; 陈宇霞张美英熊盛钱垂文王一飞; 关键词：K562细胞

蜈蚣藻多糖的提取分离及抗病毒活性的研究被引量：30: 2006年; 目的:提取分离蜈蚣藻多糖,在体外检测不同浓度蜈蚣藻对单纯疱疹病毒Ⅱ型的抑制作用。方法:用五种不同的提取分离方法从蜈蚣藻中提取硫酸多糖,再从药物对细胞的保护、对HSV-2增殖的影响及对HSV-2感染细胞的综合作用三个方面研究不同浓度的蜈蚣藻抑制HSV-2对Vero细胞的感染作用,细胞病变效应法(CPE)观察和MTT法测定蜈蚣藻粗多糖抗HSV-2活性。结果:蜈蚣藻粗多糖能明显抑制HSV-2对Vero细胞的致病变作用,其中水提醇沉法所得的蜈蚣藻多糖的IC50为5.80μg/m。l结论:蜈蚣藻有较显著的抗HSV-2活性,且初步推测其抗HSV-2活性是作用在HSV-2和受体结合、吸附、侵入Vero细胞阶段,是一种具有潜在开发前景的药物。; 朱艳梅王一飞张美英朱良康琰琰门晓媛岑颖洲; 关键词：MTF

裙带菜多糖的研究被引量：15: 2006年; 目的研究从裙带菜中提取的多糖组分。方法采用乙醇分级沉淀法提取粗多糖,采用DEAE—Cellulose离子交换柱色谱法和凝胶柱色谱法对粗多糖进行分离纯化,对纯多糖C11进行理化性质、结构及单糖组成分析。结果C11的产率为61.97%,其多糖、硫酸基、葡萄糖醛酸质量分数分别为43.20%、12.70%和9.78%,多糖C11的硫酸根连接在糖的C2或C3处于平伏键位置,且C11为以β-糖苷键为主的吡喃糖。其单糖组成及质量分数比为鼠李糖∶岩藻糖∶木糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.50∶570.00∶220.00∶257.00∶8.32。结论C11为单一纯净的酸性杂多糖。; 门晓媛王一飞朱艳梅康琰琰朱良; 关键词：裙带菜多糖分离纯化

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广东省工业攻关项目(2005A10904001)