四川省教育厅科学研究项目(07ZB110)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：杨志惠王丽刘晓燕李娟更多>>
- 相关机构：泸州医学院更多>>
- 发文基金：四川省教育厅科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 曲古抑菌素A对结肠癌细胞HCT116的作用及机制
- 2012年
- 目的通过组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDACs)抑制剂曲古抑菌素A(TSA)对人结肠癌细胞HCT116增殖与凋亡作用的研究,探讨TSA对结肠癌的作用机制。方法:应用四氮唑蓝(MTT)法、Hoechst染色法、Western blot法和光学显微镜观察经不同浓度TSA处理后的HCT116增殖、凋亡与相关蛋白的改变。结果:TSA可时间依赖性地抑制HCT116细胞生长,促进凋亡,但浓度依赖性不明显。与对照组相比,TSA作用时,脆性组氨酸三联体(FHIT)和Bax蛋白的表达均出现一定程度增加,而骨桥蛋白(OPN)的表达出现一定程度的降低,AKT蛋白表达变化不明显。结论:TSA可抑制结肠癌细胞HCT116增殖,促进其凋亡,其机制可能与上调FHIT和Bax的表达,下调OPN表达有关。
- 王丽刘晓燕李娟杨志惠
- 关键词：结肠癌脆性组氨酸三联体骨桥蛋白
- 骨桥蛋白抑制FHIT表达促进结肠癌细胞增殖存活被引量：2
- 2012年
- 目的构建骨桥蛋白(OPN)基因真核表达载体,转染人结肠癌细胞SW480,研究其对SW480细胞增殖及生存能力的作用机制。方法构建重组表达载体pEGFP-N1/OPN,转染人结肠癌SW480细胞。采用RT-PCR及免疫印迹法(Westernblotting)分别检测SW480细胞OPN基因及蛋白表达量;Cell Counting Kit-8(CCK-8)测定细胞增殖;软琼脂克隆形成实验观察细胞的锚定非依赖性生长能力。Western blotting检测脆性组氨酸三联体基因(FHIT)和蛋白激酶B(PKB/Akt)蛋白在SW480细胞中的表达。结果重组质粒pEGFP-N1/OPN转染SW480后,OPN基因获得很好转录,OPN蛋白表达增高,细胞增殖率(光吸收值)显著高于转染阴性组(P<0.05),细胞软琼脂克隆形成速度增快,数量明显多于对照组和空载体组(P<0.05);FHIT蛋白在实验组表达降低,Akt蛋白在各组中的表达无显著性差异。结论 OPN基因通过抑制FHIT基因表达,促进SW480细胞增殖、独立存活能力。
- 王丽刘晓燕李娟杨志惠
- 关键词：骨桥蛋白质结肠肿瘤脆性组氨酸三联体基因
- 骨桥蛋白基因真核表达载体构建及对结肠癌细胞的作用被引量：1
- 2012年
- 目的:构建骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)基因真核表达载体,转染人结肠癌细胞SW480,分析其对SW480细胞株增殖及生存能力的作用。方法:构建重组表达载体pEGFP-N1/OPN,经测序鉴定无误后,转染人结肠癌SW480细胞。RT-PCR检测SW480细胞转染后OPN mRNA表达;Western blot检测SW480细胞转染后OPN蛋白表达量;Cell Counting Kit-8(CCK-8)测定细胞增殖;软琼脂克隆形成实验观察细胞的锚定非依赖性生长能力。结果:pEGFP-N1/OPN转染SW480后,OPN基因获得很好转录,OPN蛋白表达增高,转染OPN后SW480细胞增殖率(光吸收值)显著高于转染阴性组(P<0.05),软琼脂克隆形成速度增快,数量明显多于对照组和空载体组(P<0.05)。结论:OPN基因真核表达载体pEGFP-N1/OPN构建成功,OPN具有促进SW480细胞增殖、存活的作用,为进一步研究OPN作用机制奠定了重要基础。
- 王丽刘晓燕李娟杨志惠
- 关键词：骨桥蛋白结肠癌增殖存活
