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巴西橡胶树HbTCTP基因的克隆及表达被引量：19: 2009年; 在先前的研究中通过抑制缩减杂交获得了一个在巴西橡胶幼态无性系与老态无性系胶乳中差异表达的片段(HbSSH12),BlastX分析表明,由该片段编码的氨基酸与麻疯树(Jatropha curcasL.)翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)的同源性达到92%。本研究根据HbSSH12的序列信息设计引物,通过3'-RACE的方法获得了一个长832bp的cDNA(命名为Hb TCTP),序列分析表明Hb TCTP含有507bp的阅读框,68bp的5'-UTR和255bp的3'UTR,编码168个氨基酸,该氨基酸序列与麻疯树、油棕、花生、南瓜、番茄和拟南芥的TCTP同源性分别达到93.45%、90.48%、89.29%、85.12%、82.74%和79.76%。RT-PCR表明,Hb TCTP在巴西橡胶叶片、胶乳及树皮中都有表达,乙烯利处理可诱导Hb TCTP的表达,割胶抑制Hb TCTP的表达,表明Hb TCTP可能参与伤信号或乙烯信号传导。Hb TCTP的表达分析有助于解析橡胶树幼态无性系高产的分子机制。; 梁小莲李辉亮彭世清; 关键词：乙烯巴西橡胶树

巴西橡胶树HbHDR的原核表达及HbHDR在乳管细胞中的亚细胞定位: 2009年; 4-羟基-3-甲基-2-(E)-丁烯基-4-磷酸还原酶(4-hydroxy-3-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphate reductase,HDR)是异戊烯基焦磷酸合成途径之一甲基赤藓糖磷酸(methylerythritol phosphate,MEP)途径中的最后一个酶,催化4-羟基-3-甲基-(2E)-丁烯基-4-磷酸生成异戊烯基焦磷酸。根据笔者从橡胶树中克隆的HDR基因(命名为HbHDR,GenBank登录号:EU881977)序列,构建了HbHDR的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达获得融合表达蛋白。将融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备HbHDR的高效价特异的多克隆抗体。Western-blot分析表明,HbHDR存在于乳管细胞的橡胶粒子和C-乳清中。; 李辉亮雷美玉彭世清; 关键词：巴西橡胶树原核表达乳管细胞

巴西橡胶树HbCMK基因的克隆及表达被引量：6: 2009年; 根据植物CMK(4-Diphosphocytidyl-2C-methyl-D-erythritol Kinase,CMK)的同源序列设计引物,通过RT-PCR结合RACE的方法在橡胶树中获得了与其相应的CMK基因,命名为HbCMK.序列分析表明HbCMK长1415bp,编码388个氨基酸,该氨基酸序列与长春花(Catharanthus roseus)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)、甜菊(Stevia rebaudiana)、丹参(Salvia miltiorrhiza)、烟草(Nicotiana benthamiana)和水稻(Oryza sativa)的CMK相似性分别达到72.6%、72.5%、71.9%、70.9%、69.0%和66.9%.半定量RT-PCR结果显示,HbCMK的表达具有组织差异性,在愈伤组织中大量表达,在叶片和胶乳中微量表达,乙烯诱导胶乳HbCMK的表达,伤害对HbCMK的表达几乎没有影响.本实验结果为进一步了解MEP途径在橡胶树胶乳中的作用和天然橡胶生物合成的调控奠定了基础.; 陈洁雷美玉李辉亮彭世清; 关键词：巴西橡胶

巴西橡胶树HbCOI1基因5′调控序列的克隆及分析被引量：2: 2008年; 利用GenomeWalker方法获得了巴西橡胶树HbCOI1的5’调控序列。通过分析表明，在该序列中除了含有真核生物典型的核心启动子区域（879-928bp，TATAbox存在于886bp）外，一些与真核生物顺式调控元件相似的序列也存在其中，如在63、85和604bp等处具有CAAT序列；在212、385和427bp处有5’UTRPy-riehstretch元件；在96bp处有1个与茉莉酸应答相关的元件TGACG；在43bp处存在1个与水杨酸应答相关的TCA—element；在145bp处存在1个与抗性和胁迫应答相关的TC丰富重复序列。此外，在626、745、834和864bp处分别有ACGTT—box、GATA—box、ARRlAT和bbox等顺式作用元件。; 徐靖李辉亮田维敏彭世清; 关键词：巴西橡胶树克隆顺式作用元件

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国家自然科学基金(30760203)