国家重点基础研究发展计划(2001CB10901)
- 作品数：5 被引量：80H指数：4
- 相关作者：朱祯曾千春吴茜冯德江周开达更多>>
- 相关机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所四川农业大学渥太华大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 转基因食品检测方法的现况与进展被引量：20
- 2004年
- 为给转基因食品检测提供参考 ,介绍包括除草剂生物分析法 (herbicidebioassays)、western印迹法 (Westernblot)、酶联免疫吸附试验法 (enzyme linkedimmunosorbentassay ,ELISA)、southern印迹法(Southernblot)、聚合酶链反应法 (PolymeraseChainReaction ,PCR)在内的蛋白质检测和DNA检测方法。一些新的方法如近红外光谱法 (near infraredspectroscopy)、DNA微阵列技术法 (Microarray)等略做介绍。对这些方法的基本原理、优缺点和应用范围以及存在的问题进行了分析 ,可供转基因食品检测研究选择分析方法时借鉴。
- 周萍萍吴永宁张建中
- 关键词：转基因食品印迹法酶联免疫吸附试验法聚合酶链反应法
- 有效去除农杆菌和籼稻转化系统优化被引量：19
- 2003年
- 为了提高根农杆菌籼稻转化效率 ,将修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck和潮霉素磷酸转移酶基因hpt分别置于紧密相连的 2个T -DNA上 ,构建载体 pCDMARUSCK -HPT ,电激法将表达载体转化农杆菌LBA4 40 4获得工程菌。比较了提门叮和国产噻孢霉素对工程菌LBA4 40 4的抑制效果 ,试验得出提门叮在 5 0 0mg/L以内比噻孢霉素能更有效地去除水稻细胞中的农杆菌 ,而且低浓度条件下 (2 5 0mg/L)就能有效地抑制工程菌LBA4 40 4 ,并且有利于水稻转化细胞成功地再生植株。确立了工程菌LBA4 40 4菌液浓度OD值 0 8,浸染时间 5min为明恢 86合适的转化参数。在此基础上 ,采用优化的农杆菌介导法转化杂交籼稻优良恢复系明恢 86 ,获得转基因植株 12 7个克隆 ,转化效率 4 5 %。
- 曾千春李旭刚马炳田陈松彪徐鸿林孟昆魏晓丽朱祯
- 关键词：籼稻农杆菌介导豇豆胰蛋白酶抑制剂基因
- 转基因作物中外源基因在体内代谢途径的研究进展被引量：4
- 2005年
- 为研究转基因食品中外源基因发生水平转移和其它危害的可能性,从而揭示转基因食品的安全性,综述了外源基因在体内代谢的途径及影响因素,外源基因在消化系统中的代谢降解,外源基因的水平转移以及外源基因在体内代谢途径的研究方法。
- 殷召雪徐海滨
- 关键词：外源基因代谢途径转基因作物转基因食品体内代谢
- 修饰的cry1Ac基因导入籼稻明恢81获得抗虫纯合系被引量：23
- 2002年
- 采用细胞内定位技术对cry1Ac基因进行修饰 ,其表达产物定位于内质网及衍生自内质网的蛋白体。通过基因枪法成功地将经过修饰的cry1Ac基因导入到优良杂交籼稻恢复系明恢 81中。对潮霉素抗性植株的PCR和Southern检测及ELISA分析证实 ,修饰的cry1Ac基因已整合到受体水稻品种中并得以表达 ,自交加代结合潮霉素筛选于T2 代获得转基因纯合系。抗虫性测试表明 ,部分转基因纯合系高抗二化螟 (Chilosuppressalis)。
- 曾千春吴茜周开达冯德江王锋苏军IAltosaar朱祯
- 关键词：基因导入籼稻抗虫基因转基因水稻基因枪法
- 转修饰cry1 Ac基因籼稻明恢81经花药培养获得抗虫DH系被引量：16
- 2002年
- 对基因枪法获得的明恢 81转修饰的cry1Ac基因当代植株进行花药培养 ,共接种花药 2 6 0 0枚 ,获得 83份花培植株 ,其中双倍体植株 43份 ,单倍体植株 40份。PCR结果表明含有cry1Ac基因的植株 5 5份 ,花培植株群体中转基因与非转基因植株的比值为 2∶1(5 5 2 8)。进一步结合Southernblot和ELISA分析 ,于花培植株当代筛选到转基因纯合株系 36份。外源蛋白表达量上 ,花药来源于同一克隆的DH系的不同植株之间基本一致 ,最高的Cry1Ac含量达 0 2 5 %。田间抗虫性试验表明 ,经花药培养纯合获得的部分转基因纯合系植株对二化螟 (Chilosuppressalis)表现出高抗 ,而且主要农艺性状保持不变。以上结果表明水稻花药培养可以加速转基因的纯合与育种利用。
- 曾千春吴茜冯德江周开达刘翔朱祯
- 关键词：籼稻花药培养转基因水稻生物检测二化螟
