国家自然科学基金(30871314)
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
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- 相关机构：潍坊医学院济宁医学院更多>>
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- 基因差异表达筛选技术在神经干细胞研究中的应用
- 2008年
- 石娟管英俊张炳强
- 关键词：神经干细胞基因差异表达多向分化潜能神经系统疾病NSCS
- 维甲酸、音猬因子对大鼠脊髓神经干细胞向运动神经元样细胞分化的影响被引量：2
- 2010年
- 目的：分离大鼠胚胎的脊髓神经干细胞进行体外培养，探讨维甲酸（RA）、音猬因子（Shh）诱导其向运动神经元样细胞分化。方法：应用无血清培养技术分离培养脊髓神经干细胞，通过5-溴-2-脱氧尿苷标记、免疫荧光显色检测细胞增殖、分化情况；培养液分组添加Shh、RA或shh＋RA，观察神经干细胞向运动神经元样细胞的分化情况。结果：大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞，分化后可表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原；诱导分化后结果显示Shh组未检测到胆碱乙酰转移酶阳性细胞，RA组为20．63％，shh＋RA组为66．84％，其差异具统计学意义。结论：从大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞，Shh、RA可不同程度地诱导脊髓神经干细胞分化为运动神经元样细胞。
- 杜红梅管英俊袁丽丽张皓云
- 关键词：神经干细胞脊髓运动神经元
- 星形胶质细胞在肌萎缩脊髓侧索硬化症发病中作用的研究进展
- 2011年
- 肌萎缩脊髓侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis,ALS）是中枢神经系统（central nervous system,CNS）运动神经元（motor neuron,MN）退化所致的一种慢性神经退行性疾病,其显著特征表现为选择性MN死亡,临床表现为进行性全身肌肉无力、萎缩,最终导致瘫痪甚至死亡[1-4]。目前其病因和发病机制尚不清楚,缺乏有效地治疗方法。研究表明,
- 王珊珊管英俊陈燕春吴欣
- 关键词：星形胶质细胞神经元
- 星形胶质细胞与运动神经元的相关关系被引量：3
- 2012年
- 星形胶质细胞作为中枢神经系统中最丰富的神经胶质细胞,是中枢神经系统最主要的支持细胞,为神经元提供营养支持和保护作用。在肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)发病过程中,退行性病变的神经元以及过度激活的胶质细胞将导致神经元所处微环境恶化,使神经元的损伤进行性加重。因此,研究星形胶质细胞与运动神经元的关系对探讨ALS的发病机制及其干预治疗具有非常重要的意义。
- 李晓琎管英俊史才兴王力张彩霞
- 关键词：星形胶质细胞运动神经元神经胶质细胞侧索硬化症退行性病变支持细胞
- Wnt抑制因子-1在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因小鼠中的表达变化被引量：10
- 2011年
- 目的检测Wnt抑制因子-1(Wif-1)在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型小鼠脊髓内的表达变化,进一步探讨Wif-1在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各54只,分别于鼠龄95d、108d、122d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固定、分离脊髓、制备冷冻切片,应用免疫荧光染色技术检测脊髓内Wif-1的分布及变化;部分鼠取出脊髓、匀浆,应用RT-PCR和Western blotting方法观察不同时间点Wif-1 mRNA及其蛋白表达水平变化。结果成年ALS转基因鼠和同窝野生型鼠脊髓的中央管、灰质、白质中均可检测到Wif-1阳性细胞,在灰质内,Wif-1阳性细胞主要分布于脊髓前角;在白质内,神经元的轴突呈阳性反应。与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠Wif-1阳性细胞显著增多,Wif-1 mRNA和蛋白表达在95d变化不明显,在108d、122d均有升高,差异具有统计学意义(P<0.05),其中108d升高最明显。结论在ALS转基因鼠发病过程中Wif-1阳性细胞明显增多,Wif-1 mRNA和蛋白表达升高,表明Wif-1与ALS的发生密切相关。
- 吴欣管英俊于丽陈燕春王珊珊
- 关键词：脊髓免疫荧光反转录-聚合酶链式反应免疫印迹法转基因小鼠
- 分泌型卷曲相关蛋白4在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓中的表达变化被引量：6
- 2012年
- 目的探讨分泌型卷曲相关蛋白4(sFRP4)在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内的表达变化,及sFRP4在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各30只,分别于鼠95d、108d和122d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固定,分离脊髓和制备冷冻切片,部分鼠分离脊髓,提取RNA和蛋白。分别应用免疫组织化学染色技术、RT-PCR和Western blotting检测sFRP4 mRNA和蛋白水平在不同时间点的变化情况。结果与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠sFRP4 mRNA和蛋白表达在95d、108d和122d均升高(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,sFRP4阳性细胞主要分布在脊髓灰质前角,白质轴突呈阳性反应,与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠sFRP4阳性细胞明显增多。免疫荧光双标结果显示,sFRP4标记的阳性细胞共表达胶质纤维酸性蛋白和β-tubulinⅢ,ALS转基因鼠sFRP4/GFAP双阳性细胞增多。结论在ALS转基因鼠发病脊髓中sFRP4阳性细胞明显增多,sFRP4 mRNA和蛋白表达升高,表明sFRP4与肌萎缩脊髓侧索硬化症的发生密切相关。
- 王珊珊陈燕春管英俊李晓琎于丽
- 关键词：WNT信号通路免疫组织化学免疫印迹转基因鼠
- 成年肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓增殖细胞的分化被引量：1
- 2009年
- 目的探讨成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内增殖细胞的类型及分化情况。方法对ALS转基因鼠发病期进行BrdU标记,分别于不同时间点取材,冷冻切片,应用免疫荧光双标及三标染色技术检测ALS转基因鼠病变进展过程中脊髓内增殖细胞的分化情况。结果成年ALS转基因鼠发病期脊髓的中央管、灰质、白质均未检测到BrdU/DCX双标记阳性细胞和BrdU/NeuN双标记阳性细胞。灰质、白质和中央管周围检测到大量NG2阳性细胞,阳性细胞数量随病变进展逐渐减少,NG2阳性细胞多呈BrdU阳性表达;可检测到少量BrdU/A2B5双标记阳性细胞;ALS转基因鼠发病期脊髓BrdU/GFAP双标记阳性细胞较多,部分双阳性细胞呈Nestin阳性,而野生型鼠脊髓内未检测到BrdU/GFAP双标记阳性细胞。结论神经退行性病变激活ALS转基因鼠脊髓内源性增殖细胞向神经胶质细胞方向分化,未检测到向神经元方向分化,内源性增殖细胞尚不能有效地促进退行性病变的修复。
- 于丽管英俊高海玲陈燕春赵春艳杜红梅张皓云岳炳德
- 关键词：脊髓分化免疫荧光转基因鼠
- 大鼠脊髓神经干细胞的鉴定及光镜和电镜观察被引量：4
- 2009年
- 本研究应用无血清培养技术对分离的大鼠胚胎脊髓神经干细胞进行体外培养,在倒置显微镜和电镜下观察细胞形态,应用BrdU标记、免疫荧光染色检测细胞增殖、分化情况。免疫荧光显示nestin、MAP2、GFAP以及BrdU/nestin、BrdU/MAP2、Br-dU/GFAP均有阳性表达,说明从大鼠胚胎脊髓可成功分离出神经干细胞,它们分化后可以表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原。脊髓神经干细胞具有自我更新能力,能分化为神经元和星型胶质细胞。
- 杜红梅管英俊袁丽丽张皓云
- 关键词：神经干细胞脊髓细胞培养
