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国家自然科学基金(30760134)

作品数:11 被引量:37H指数:4
相关作者:周鹏沈文涛言普李亚丽黎小瑛更多>>
相关机构:中国热带农业科学院海南大学海南医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 8篇农业科学
  • 6篇生物学

主题

  • 8篇番木瓜
  • 6篇木瓜
  • 5篇PRSV
  • 3篇基因
  • 2篇性别
  • 2篇诱饵
  • 2篇酵母
  • 2篇酵母双杂交
  • 2篇环斑病毒
  • 2篇番木瓜环斑病
  • 2篇番木瓜环斑病...
  • 2篇斑病
  • 2篇CP基因
  • 1篇蛋白
  • 1篇性别鉴定
  • 1篇性别决定
  • 1篇性别研究
  • 1篇性染色体
  • 1篇诱饵载体
  • 1篇植物

机构

  • 11篇中国热带农业...
  • 5篇海南大学
  • 1篇茂名学院
  • 1篇海南医学院

作者

  • 11篇周鹏
  • 10篇沈文涛
  • 6篇言普
  • 3篇李亚丽
  • 2篇黎小瑛
  • 2篇王明钦
  • 2篇胡正龙
  • 2篇肖旭倩
  • 1篇唐清杰
  • 1篇蔡群芳
  • 1篇熊建平
  • 1篇高新征
  • 1篇魏军亚
  • 1篇王树昌
  • 1篇吴金燕
  • 1篇卢雅薇
  • 1篇何尧声
  • 1篇言谱
  • 1篇牛艳梅

传媒

  • 5篇热带作物学报
  • 2篇生命科学研究
  • 1篇广西农业科学
  • 1篇病毒学报
  • 1篇园艺学报
  • 1篇热带生物学报

年份

  • 1篇2010
  • 7篇2009
  • 3篇2008
11 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
建立番木瓜性别研究的cDNA-AFLP分析体系被引量:3
2009年
以番木瓜幼苗为材料,利用多重PCR技术快速鉴定其性别,建立适合番木瓜性别研究的cDNA-AFLP分析体系,分析影响cDNA-AFLP分析体系的各种可能因素(RNA提取、酶切与连接效率、预扩增效果等),并对影响选择性扩增反应的各因子进行优化。结果表明,选择性扩增的最佳体系,即在反应体系中,各因素终浓度分别为:Tap酶0.06U/μL;Mg2+2.4mmol/L;dNTP2.0mmol/L;引物0.48μmol/L。通过优化体系得到的选择性扩增产物,银染检测后条带清晰稳定。表明成功建立了适合番木瓜性别研究的cDNA-AFLP分析体系。
李亚丽沈文涛言普熊建平周鹏
关键词:番木瓜性别
番木瓜环斑病毒海南分离株全基因组序列分析被引量:5
2008年
Total RNA was extracted from infected papaya(Carica papaya L.) leaves in Hainan Province, and the full-length sequences of papaya ringspot virus were amplified by RT-PCR and RACE, and its complete genomic sequence was assembled,named Hainan-P isolate.The RNA genome sequence of Hainan-P isolate was 10323 nucleotides (nts)in length,excluding the 3’-terminal poly(A) tail. And it was composed of a single open reading frame encoding a polyprotein of 3343 amino acids. The result of homology analysis with twelve GenBank PRSV isolates showed that the polyprotein identity of Hainan-P ranged from 89.8% to 93.2%, that was higher than the complete nt homology of 82.3% to 89.1%. The P1 amino acid was the least conserved( sharing homology only between 65.4% and 80.1%), whereas HC-Pro,CI and CP were the most conserved. Phylogenetic tree were constructed by the Neighbor-joining method in MEGA 3.1, which showed that PRSV isolates were obviously relevant to geographical origin,and it was impossible to delineate host-specific (P type and W type)evolution.
卢雅薇沈文涛唐清杰牛艳梅周鹏
关键词:番木瓜环斑病毒全基因组同源性系统进化树
花粉管通道技术转化番木瓜的初步研究被引量:3
2009年
以番木瓜"solo Ⅱ"号植株为受体材料,用花粉管通道法进行了番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因(PRSV-CP)278bp片段的遗传转化.采用质粒DNA和农杆菌菌液两种导入液,分别处理花187和232朵,收获成熟番木瓜105和30个,座果率分别为56.15%和12.93%,随机选择每种载体的种子100粒播种,成株率分别为61%和60%.对T1幼苗(除含空载体外)全部进行PCR检测.检测结果为质粒DNA和农杆菌菌液两种导入液转化所得的幼苗阳性率分别为50.54%和51.22%.
蔡群芳魏军亚周鹏
关键词:番木瓜花粉管通道法PCR检测
番木瓜eIF4E和eIFiso4E酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测被引量:5
2010年
通过RT-PCR获得番木瓜eIF4E和eIFiso4E基因的编码区,将其分别克隆到pBD-GAL4载体中,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pBD-GAL4-eIF4E,pBD-GAL4-eIFiso4E。测序正确后,将重组质粒导入YRG-2酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明,获得了正确的番木瓜eIF4E,eIFiso4E基因编码区,并成功克隆到pBD-GAL4诱饵载体中,且转化有诱饵载体的YRG-2在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,在SD/-His-Trp营养缺陷平板上不能生长,说明表达产物对酵母细胞无毒性,对报告基因也无自激活作用,这为下一步利用酵母双杂交系统检测番木瓜eIF4E,eIFiso4E蛋白与病毒的相互作用奠定了基础。
吴金燕言普沈文涛周鹏
关键词:番木瓜EIF4E酵母双杂交
番木瓜性别决定的研究进展被引量:4
2009年
番木瓜具有3种性别类型,性别遗传机制较复杂。对番木瓜性别决定、性染色体、性别紧密连锁的DNA分子标记、基因组高密度遗传连锁图谱、性别决定位点物理图谱等方面进行了综述分析,指出研究番木瓜的性别遗传及性别表达机理在定向改良番木瓜的性别方面具有重要意义。
李亚丽沈文涛言谱周鹏
关键词:番木瓜性染色体MSY性别决定
P型PRSV-VPg蛋白与寄主eIF4E蛋白的互作被引量:3
2009年
为研究番木瓜环斑病毒P型株系(PRSV-P)的病毒基因组连接蛋白(VPg)与寄主eIF4E蛋白的互作,采用双分子荧光互补技术(BiFc),通过基因枪转化法轰击洋葱表皮,在荧光显微镜下观察两者间的互作结果。结果表明:番木瓜eIF4E与P型PRSV-VPg,西瓜eIF4E与P型PRSV-VPg蛋白均发生互作。eIF4E与VPg的互作为研究通过转基因方法抑制或过量表达突变关键位点的寄主因子,阻断关键因子互作获得抗病植株提供了可行性依据。
胡正龙肖旭倩沈文涛言普黎小瑛周鹏
关键词:番木瓜环斑病毒
PRSV NIa-pro、NIa-vpg、NIb酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测被引量:1
2008年
用PCR技术获得NIa-pro、NIa-vpg、NIb基因片段,将这些基因分别克隆到pBD-GAL4载体中,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pBD-GAL4-NIa-pro、pBD-GAL4-NIa-vpg和pBD-GAL4-NIb。测序正确后,将重组质粒导入YRG-2酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明,获得了正确的NIa-pro、NIa-vpg、NIb基因片段,并成功克隆到pBD-GAL4诱饵载体中,且转化有诱饵载体的YRG-2在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,说明表达产物对酵母细胞无毒性,对报告基因也无自激活作用,为下一步利用酵母双杂交系统检测与NIa-pro、NIa-vpg、NIb蛋白相互作用的蛋白奠定基础。
王明钦沈文涛周鹏
关键词:PRSV酵母双杂交诱饵载体
利用多重PCR技术快速鉴定番木瓜性别被引量:7
2008年
利用鉴定番木瓜雄性性别的特异基因片段(1001bp)的引物和鉴定番木瓜雄性、两性性别的特异基因片段(225bp)的引物,分别以5个品种番木瓜的3种性别植株的总DNA为模板进行多重PCR扩增,结果表明:以雄株总DNA为模板得到1个1001bp和1个225bp的扩增产物,以雌株总DNA为模板没有得到扩增产物,以两性株总DNA为模板得到1个225bp的扩增产物,根据多重PCR扩增结果,可以将番木瓜3种性别植株一次性鉴定出来。
何尧声沈文涛黎小瑛王明钦周鹏
关键词:番木瓜多重PCR性别鉴定
番木瓜eIF(iso)4E基因克隆及其结构和表达分析被引量:3
2009年
eIF4E(eukaryotic translation initiation factor4E)家族基因在多种病毒侵染植物过程中起重要作用。应用RT-PCR和RACE方法在番木瓜中克隆了cDNA全长为995bp的eIF4E异构体基因,命名为CP-eIF(iso)4E(GenBank登录号为FJ595992)。其编码的蛋白含有206个氨基酸,蛋白一级结构中的活性部位位点高度保守,三维结构中可能的抗性位点位于帽结合区域(cap-binding pocket)表面。半定量RT-PCR结果表明,CP-eIF(iso)4E在番木瓜叶片中表达较弱,在花瓣中表达最强。
言普沈文涛高新征李亚丽周鹏
关键词:番木瓜基因表达
PRSV-CP基因小hpRNA植物表达载体的构建被引量:2
2009年
将获自海南(prsv-cp hno1~4)、云南(prsv-cp yunnan)和广西(prsv-cp guangxi)的番木瓜环斑病毒株系外壳蛋白(PRSV-CP)基因序列与DQ340771、X97251(来自中国台湾的PRSV株系)以及AY162218、AY231130、DQ374153、S46722、X97251(分别来自泰国、墨西哥、巴西、美国的PRSV株系)等外壳蛋白(CP)基因序列进行比对,在CP基因高保守区设计靶向目标序列进行亚克隆,获得长度为50bp的DNA片段,并通过一步套叠PCR把50bp正向片段和反向片段与拟南芥内含子拼接,成功构建了小hpRNA结构的植物表达载体,为进一步培育安全性好、抗谱广的番木瓜转基因新种质奠定了基础。
王树昌言普沈文涛周鹏
关键词:PRSVCP基因HPRNA植物表达载体
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