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以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对人白血病K562细胞的抑制作用被引量：11: 2009年; 目的:探讨以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对白血病K562细胞的生长抑制效应及可能的作用机制。方法:依据与microRNA-21序列互补的原理,设计反义寡核苷酸,人工合成并全硫代修饰,在Lipo-fectamineTM2000介导下,转染K562细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选最佳作用浓度,台盼蓝拒染法检测其对细胞生长抑制的作用,姬姆萨染色观察细胞的形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的变化。利用荧光定量PCR技术检测反义寡核苷酸作用后细胞内microRNA-21表达水平的改变。结果:MTT结果显示反义寡核苷酸有效抑制细胞生长,分别与随机组、空白对照组进行比较有显著差异(P<0.05),反义寡核苷酸作用的最佳浓度是0.6μmol/L。台盼蓝拒染法结果显示从转染K562细胞24 h开始,反义寡核苷酸组细胞生长明显受到抑制,抑制效应持续到72 h。姬姆萨染色显示反义寡核苷酸作用K562细胞24 h后,可在细胞中见凋亡小体。流式细胞仪检测结果显示反义寡核苷酸组出现明显的亚二倍体峰,细胞周期无发生明显变化。荧光定量PCR结果显示,反义寡核苷酸可有效抑制细胞内microRNA-21的表达水平。结论:以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸可有效抑制人白血病K562细胞的生长,并显著促进细胞凋亡。; 郭敏李育敏费嘉张洹; 关键词：寡核苷酸类反义 K562细胞

MicroRNA与血液系统肿瘤发生、诊断和治疗: ＜正＞动植物中广泛存在着一种大小约19-24个碱基的非编码单链小分子RNA,即microRNA（miRNA）,随着生物信息学和基因克隆技术的迅猛发展,现已在人类发现541个miRNA,记录于miRNA数据库（http:/...; 李育敏费嘉; 关键词：MICRORNA 血液肿瘤; 文献传递

微RNA对K562细胞基因表达谱的影响被引量：3: 2006年; 目的应用基因芯片技术,研究微RNA(miR-181a)对人白血病K562细胞基因表达谱的影响。方法针对miR-181a成熟序列设计并合成miR-181aRNAduplexes,采用OligofectamineTM脂质体法转染K562细胞。应用AgilentHuman1A寡核苷酸基因芯片,检测和分析对照组与微RNA转染组间的基因表达谱差异。结果从20173个候选基因中,筛选出228个差异表达基因。与对照组K562细胞比较,表达上调的基因有59个,主要有代谢相关基因、抑癌基因、信号转导相关基因、免疫防御相关基因等;表达下调的有169个,主要有原癌基因、DNA结合与转录因子、代谢相关基因、信号转导相关基因、细胞周期及发育相关基因等。RT-PCR技术验证了CTCF、ZAP70、SEMA4C和RALA4个基因表达的变化。结论微RNA转染K562细胞48h后,影响了细胞内一系列基因的表达。这些基因可能与微RNA的功能相关,同时也是转录后水平上抑制基因表达的调控方式实现的基础。这为进一步深入研究微RNA的功能及其具体的作用机制提供了重要的线索和依据。; 周珏宇马文丽费嘉丁大鹏石嵘姜立郑文岭; 关键词：K562细胞微RNA 白血病基因表达谱基因芯片

MicroRNA与血液系统肿瘤发生、诊断和治疗被引量：8: 2009年; MicroRNA (miRNA) is a family of 19-24 nucleotides small non-coding RNA in eukaryotic organisms,which can regulate genes at the post-transcriptional level. miRNA has been shown to be involved in a variety of cellular processes such as development,proliferation,differentiation,apoptosis etc,and is closely related to the oncogenesis. Recent study indicates that several miRNAs play an important role in initiation and progression of hematological malignancies. miRNA expression profiling has identified signatures associated with diagnoses,prognoses and therapy of hematological malignancies. The review discusses miRNA and its biogenesis,functional mechanisms and potential role in the diagnosis,prognoses and therapy of hematological malignancies.; 李育敏费嘉; 关键词：MICRORNA 血液肿瘤

微R-181a对人白血病K562细胞株的抑制作用及其机制的初步探讨被引量：3: 2007年; 目的探讨miR-181a对白血病K562细胞生长的抑制作用及其机制。方法利用Oligofectamine脂质体法将化学合成的miR-181a转染K562细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法检测其对K562生长抑制的作用,结合基因芯片技术检测miR-181a对K562细胞基因表达谱的影响,筛选肿瘤相关差异基因。结果MTT法和台盼蓝拒染法结果显示,转染后各时间点转染组K562细胞的生长均受到了明显地抑制。瑞氏-吉姆萨染色显示,转染组细胞表现出典型的生长抑制的变化。基因芯片筛出肿瘤相关差异基因30个,其中20个表达下调,10个表达上调。结论miR-181a可能通过增强抑癌基因的表达,削弱癌基因的表达,从而抑制白血病细胞的增殖和生长。因此,其抗癌效应可应用于肿瘤的治疗。; 周珏宇马文丽费嘉丁大鹏石嵘姜立郑文岭; 关键词：微RNA 白血病癌基因抑癌基因基因芯片

一种MicroRNA duplex设计新技术研究: 2006年; 利用microRNA数据库,获取3种微RNAmir-181a、mir-124和mir-1的成熟序列信息.基于siRNAdu-plex在形成RNA诱导的沉默复合物(RNA-inducedsilencingcomplex,RISC)过程中的不对称性的特点,初步设计了针对上述3种微RNA的microRNAduplex.采用生物学软件Oligo6.0分别评价其热动力学特性,并通过改变反义链3'端个别碱基序列使其满足热动力学的需求,从而确定最终的设计序列.结果显示,利用RISC形成过程的不对称性,结合生物学软件Oligo6.0的热动力学分析来设计miRNAduplex,是一种简便可行、准确有效的方法.; 周珏宇马文丽丁大鹏石嵘郑文岭; 关键词：微RNA SIRNA 生物信息学分析热动力学性质

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广东省自然科学基金(5300488)

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