国家林业公益性行业科研专项(201204605)
- 作品数：4 被引量：20H指数：3
- 相关作者：李煜杨秀平周玮王大玮王宏更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学宝鸡市林业科学研究所更多>>
- 发文基金：国家林业公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 杜仲Fls基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2014年
- 【目的】克隆杜仲黄酮醇合成酶基因(Fls)全长,对其开放阅读框(ORF)进行原核表达分析。【方法】以杜仲叶片为材料提取总RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆杜仲Fls基因;Fls基因的ORF经限制性内切酶酶切,构建其原核表达载体pET-28a-Fls;最后利用IPTG诱导Fls基因在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。【结果】获得了黄酮醇合成酶基因全长序列,长度为1 220bp,ORF为1 011bp,编码336个氨基酸;成功构建了原核表达载体pET-28a-Fls;利用IPTG诱导Fls在BL21(DE3)中表达,SDS-PAGE电泳结果显示,在约44ku处有特异性的蛋白条带出现。【结论】获得了杜仲Fls基因的全长和ORF,并成功对其进行了原核表达。
- 常立李周岐李煜魏军坤王淑惠
- 关键词：基因克隆原核表达
- HPLC同时测定杜仲叶中绿原酸和芦丁方法的建立及在杂种后代选择中的应用被引量：2
- 2014年
- 建立利用高效液相法（HPLC）同时测定杜仲叶中绿原酸和芦丁的方法。色谱柱为Aglient ZORBAX SB-C18（4.6mm×250mm,5μm）,流动相组成为甲醇-乙酸-水（体积比为50∶1∶49）,检验波长为340nm,流量为1mL/min,检测温度为32℃。在该色谱条件下,绿原酸和芦丁分别在0.060 0～2.000 0μg/mL和0.001 8～0.090 0μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.999 7和0.999 3。利用此方法对杜仲杂交后代中41株生长性状表现优良的个体进行了叶片中绿原酸和芦丁含量的测定,为杜仲优良无性系的选择提供依据。
- 魏军坤刘闵豪杨秀平李煜
- 关键词：HPLC绿原酸芦丁优良单株
- 杜仲无性系叶片解剖结构及抗旱性评价被引量：9
- 2016年
- 以9个杜仲无性系为材料,对其叶片组织结构进行了观察,应用压力室和P-V技术测定了5项水分生理参数,并应用模糊数学隶属函数进行了抗旱性综合评定。结果表明:在所观测的15个叶片组织结构指标中有14个指标在9个无性系之间存在显著差异,在5项水分生理参数中有2项参数(Ψ_π~0和Ψ_π^(100))在无性系之间存在明显差异。9个无性系的抗旱性由强到弱依次为:无性系8、无性系7、无性系3、无性系5、无性系4、无性系6、无性系1、无性系2、无性系9;可划分为3个等级,其中无性系8、无性系7、无性系3抗旱性较强,无性系5、无性系4、无性系6的抗旱性一般,无性系1、无性系2、无性系9抗旱性较弱。研究结果为杜仲抗旱无性系的选育提供了依据。
- 杨秀平周玮李煜王大玮
- 关键词：无性系水分参数抗旱性
- 杜仲优良品种及无性系DNA指纹图谱的构建被引量：6
- 2013年
- 选用3个杜仲无性系筛选出了32条随机扩增多态性DNA引物,用来评价这一技术在鉴定不同杜仲品种及无性系中的应用。32条引物共扩增出191条带,其中多态性条带数为117,多态性比率为61.26%。聚类分析结果表明,在相似系数为0.82时,可以将14个品种及无性系划分为5类。其中的3个引物可以完全区分所有14个品种及无性系。研究结果为杜仲优良品种及无性系的分子鉴定及遗传资源管理提供参考。
- 杨恩让王宏李煜
- 关键词：RAPD指纹图谱
