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2009—2010年南京地区腹泻婴幼儿中人类杯状病毒感染流行病学特点分析被引量：6: 2012年; 目的研究南京地区5岁及以下腹泻患儿人类杯状病毒感染的分子流行病学特点。方法2009年7月至2010年6月在南京儿童医院共采集1-59个月的腹泻患儿粪便标本300份，采用多重RT-PCR方法检测人类杯状病毒（诺如病毒、札如病毒）。结果300份标本中71份检出人杯状病毒，检出率23．67％。其中，诺如病毒67份，其中58份为GⅡ／4基因型（2006b亚型），8份为GⅡ／3基因型，1份为GⅡ／12基因型；扎如病毒4份，其中2份为GⅠ／1基因型，GⅠ／2和GⅡ／1基因型各1份。结论人类杯状病毒是南京地区腹泻婴幼儿中的主要病原体之一，主要的流行优势株是诺如病毒GⅡ／4基因型（2006b亚型）; 林谦程卫霞金玉李玫练敏周进苏陆芬段招军; 关键词：腹泻人类杯状病毒流行病学基因型

南京地区婴幼儿杯状病毒感染的分子流行病学研究被引量：4: 2012年; 目的了解南京地区婴幼儿杯状病毒腹泻的感染状况、临床表现以及分子流行病学特征。方法采集2010年7月至2011年6月南京医科大学附属南京儿童医院5岁以下腹泻患儿粪便标本及儿童保健中心健康婴幼儿粪便标本各428份。采用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测杯状病毒，测序确定其基因型别。结果428份腹泻样本中有63份为杯状病毒阳性，检出率为14．72％。其中诺如病毒GⅡ型58例，未检出诺如病毒GI型，札如病毒5例，以诺如病毒GⅡ-42006b型为主要流行株。428份健康对照组标本杯状病毒检出19例，诺如病毒6例，札如病毒11例，2例为诺如病毒GⅡ型和札如病毒混合感染。结论南京地区婴幼儿中存在不同基因型杯状病毒感染，流行毒株以GⅡ-2006b为主。; 李晓乐李丹地程卫霞谢广成高小倩孔桂平金玉段招军; 关键词：腹泻

人博卡病毒VP2蛋白的原核表达及血清学检测方法的建立被引量：3: 2012年; 目的获得高表达量的人博卡病毒（HBoV1、HBoV2）VP2蛋白，建立血清学检测方法。方法按照大肠埃希菌密码子使用偏性，对HBoV1、HBoV2VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化合成。将合成的目的基因克隆至表达载体pET30a，构建重组表达质粒pET30a-VP2，转化大肠埃希菌BL21（DE3），使用IPTG诱导表达并摸索最佳表达条件；粗提取蛋白进行Ni亲和层析纯化后建立间接酶联免疫吸附试验（ELISA），进行临床血清标本筛查，分析人群HBoV1、HBoV2感染情况。结果优化合成的HBoV1、HBoV2VP2基因正确连接至pET30a载体，开放阅读框正确，用1mmol／LIPTG过夜诱导表达（25℃）得到高表达量的VP2蛋白，目的蛋白主要以包涵体的形式存在。粗提取蛋白经Ni—NTA亲和层析，在pH4．5时获得较理想的纯化蛋白，以其为抗原建立ELISA检查方法，筛查临床血清标本IgG抗体水平，结果显示健康儿童HBoV1阳性率为62．2％，HBoV2阳性率为55．5％，混合感染率为37％。结论本研究成功将H-BoV1、HBoV2VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化，得到了较高的蛋白表达量，所建立的ELISA法可以应用于HBoV1、HBoV2人群血清流行病学调查。; 蒿叶霞高基民金玉李晓乐李金松谢志萍敖元云陈惜倩陈克娜段招军; 关键词：人博卡病毒密码子酶联免疫吸附试验

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南京市医学科技发展项目(ZKX09008)

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