南通大学自然科学基金(08Z044)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：秦永伟陈金铃何兴新段义农易亮衡更多>>
- 相关机构：黄石市疾病预防控制中心南通大学更多>>
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- 大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达被引量：3
- 2010年
- 目的构建大鼠源肺孢子菌抗原p55基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达。方法以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入COS-7细胞,RT-PCR检测其基因转录情况,SDS-PAGE鉴定其表达相应的目的蛋白质情况。结果成功扩增了p55基因片段,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,RT-PCR和SDS-PAGE方法证实该片段能在COS-7细胞中有效表达目的蛋白质。结论成功构建了大鼠源肺孢子菌p55基因片段的真核表达质粒载体,并在COS-7细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究奠定了基础。
- 易亮衡秦永伟陈金铃朱丹丹何兴新段义农
- 关键词：真核表达
