国家自然科学基金(30270423)
- 作品数：18 被引量：85H指数：7
- 相关作者：周平坤隋建丽徐勤枝吴德昌白贝更多>>
- 相关机构：军事医学科学院中国医学科学院放射医学研究所南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划军队杰出人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 5cGy γ射线照射正常人淋巴母细胞基因表达转录谱的变化被引量：10
- 2006年
- 应用基因芯片技术分析5 cGy低剂量60Coγ射线照射正常人淋巴母细胞(AHH-1)后基因转录产物水平变化,探讨低剂量辐射对基因表达的影响规律。5 cGy60Coγ射线照射AHH-1细胞后4 h,提取总RNA,用包含有14 112个基因探针的人类cDNA芯片分析基因转录谱,照射组与对照组细胞的基因表达量差异比值大于2或小于0.5,两次检测结果一致的基因点为有效差异表达基因;用RT-PCR进一步验证部分差异表达基因;Western blot分析蛋白表达变化。结果筛选出了11个表达上调基因,9个表达下降基因;RT-PCR检测结果与芯片结果相一致,包括Connexin43、BMPR2、NOL6、LOC51760、LYK5等基因;Westernblot证实Connexin43基因在翻译水平表达亦增加。实验结果表明所筛选出的差异表达基因有助于阐述低剂量辐射生物效应机理,部分基因有可能成为低剂量辐射暴露的生物标志物。
- 龙贤辉徐勤枝贺性鹏隋建丽安静白贝周平坤
- 关键词：基因表达电离辐射细胞周期调控
- 2Gy和10Gyγ射线照射正常人淋巴母细胞基因表达转录谱的比较被引量：8
- 2006年
- 目的了解中等剂量和大剂量辐照对基因表达影响的差异性,以此探讨不同剂量γ射线生物学效应的分子基础。方法正常人淋巴母细胞经2和10Gy60Coγ射线照射后培养4h(未照射为对照组),用包含有14022个基因的人类cDNA芯片分析基因转录谱,每个剂量点重复一次芯片检测,照射组与对照组细胞的差异表达基因表达量比值大于2或小于0.5,并且2次检测结果一致的基因点为有效差异表达基因。结果2Gy照射后共有32个基因表达下调,46个基因表达上调;10Gy照射后共有219个基因表达水平下降,26个基因表达水平上升,在两个剂量照射条件下都表达下调的基因至少有11个,同时上调的基因有9个,这些基因大多与细胞信号转导、细胞周期调控、DNA损伤修复、细胞凋亡等相关。结论观察到中等剂量和大剂量辐照的相同诱导表达变化基因,10Gy剂量照射使大量的基因表达抑制,将导致细胞多方面的生理功能障碍。
- 龙贤辉徐勤枝贺性鹏安静隋建丽白贝周平坤
- 关键词：基因表达细胞信号转导细胞周期调控电离辐射淋巴母细胞
- 吩噻嗪衍生物协同放射对HeLa细胞增殖的抑制效应比较研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨吩噻嗪衍生物对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用及与放射联合应用抑制肿瘤的协同效应。方法采用MTT法和细胞克隆形成法检测细胞的增殖活性和细胞辐射敏感性。结果比较了6种吩噻嗪衍生物对HeLa细胞增殖的抑制效应,发现化合物α氯N二甲胺基乙基吩噻嗪(PTZD2)、α三氟甲基N二甲胺基乙基吩噻嗪(PTZD3)和α氯N二乙胺基乙基吩噻嗪(PTZD5)的作用比较明显,在10μmol L浓度能产生出显著抑制效应,40～50μmol L浓度作用3和4d,细胞增殖完全被抑制而死亡。PTZD2或PTZD3与放射联合应用,显示出明显抗HeLa细胞增殖的协同效应,10μmol LPTZD3对2和4Gy照射细胞的增殖抑制的增强比分别为3.5和1.8。实验结果还表明,在照射前18h用药的协同作用更加显著。结论吩噻嗪衍生物具有程度不同的抑制HeLa细胞增殖的作用,与放射联合应用具有抗肿瘤的协同效应,而且照射前18h用药的效应最佳。
- 严雨倩闫宇邱王林彭涛隋建丽白贝孙伟建周平坤
- 关键词：电离辐射吩噻嗪细胞增殖HELA细胞增殖
- IER5基因对HeLa细胞辐射敏感性的影响被引量：8
- 2009年
- 为寻找放射敏感性基因,采用基因芯片技术筛选出辐射可诱导表达mRNA上调的基因,其中就有IER5.为探索IER5基因的生物学功能及其在宫颈癌放疗中的作用,采用RNA干扰技术构建IER5基因表达抑制的质粒载体并构建IER5-siRNA-HeLa细胞系.对该细胞系与HeLa细胞进行辐射,旨在了解IER5-siRNA-HeLa的细胞生长曲线、细胞周期等实验参数的变化,揭示了IER5基因在辐射诱导中的生物学功能.实验发现,IER5基因表达抑制可提高细胞分裂进入S期与G2-M期的比例,促进细胞分裂,促进细胞生长,提高细胞对辐射的拮抗性,同时发现IER5-siRNA-HeLa细胞在尺寸上大于HeLa细胞.研究表明,IER5基因表达抑制可促使细胞受辐射后发生S期与G2-M期的阻滞,IER5参与辐射细胞周期的调控,对临床宫颈癌放疗有一定的潜在应用价值.
- 李秀楠李莉杨川杰郝淳乔茶杨芬周平坤王佩袁增强李延玲鲁玮媛张为远丁库克
- 关键词：HELA细胞宫颈癌
- 肝胆肿瘤组织中DNA依赖蛋白激酶的表达及意义被引量：11
- 2004年
- 目的 通过检测不同类型肝胆肿瘤组织中DNA依赖蛋白激酶(DNA dependent protein kjnase,DNA—PK)及调节亚基Ku70的表达水平,探讨其与肿瘤恶性程度和侵袭性的关系。 方法 用免疫组化法检测47例肝胆肿瘤组织和部分癌旁组织中催化亚基DNA—PKcs和Ku70蛋白的表达情况。 结果 Ku70广泛表达于所检测的肿瘤组织中,其中腺癌和部分腺瘤表达量最高,但在不同恶性程度和侵袭性的肿瘤组织中的表达差异无显著性。而DNA-PKcs表达在不同类型肿瘤间存在明显差异,肝细胞癌阳性表达率为92.1％,显著高于胆管腺癌(65.3％)和胆曩腺癌(51.9％)(x2值分别为8.95、12.42,P值分别为0.016和0.013),乳头状腺瘤或胆管腺瘤不表达或弱表达。侵袭性腺瘤(癌)组织表达水平为61.2％,显著高于非侵袭性腺瘤(癌)(30.4％)(x2=16.23,P=0.004)。癌旁组织相对低表达DNA-PKcs。 结论 DNA—PKcs表达水平与肿瘤类型、恶性程度、转移或侵袭性有关,有可能成为肝胆肿瘤的一个新的生物标记物。
- 余子建隋建丽丁映钦曹珍山周平坤吴德昌
- 关键词：肝胆肿瘤DNA依赖蛋白激酶肿瘤组织KU70
- DNA依赖蛋白激酶在人支气管上皮细胞癌变株和肺癌组织中的异常表达被引量：17
- 2003年
- 目的:探讨辐射诱发人支气管上皮细胞癌变株和肺癌组织中DNA依赖蛋白激酶(DNA dependent protein kinase, DNA-PK)的激酶活性或表达变化。方法:用Western blot和p53蛋白为特异性底物的磷酸化反应分别检测癌变细胞中DNA-PKcs表达和激酶活性,用免疫组化结合病理图像定量分析技术检测肺癌组织和癌旁组织中DNA-PKcs蛋白的表达情况。结果:a粒子辐射诱发的人支气管上皮细胞癌变株BERP35T-1的DNA-PKcs表达水平比亲本细胞BEP2D提高30%,激酶活性显著提高。所检测的14例非小细胞肺癌组织中DNA-PKcs蛋白表达水平普遍高于相对应的癌旁组织,两组之间有显著性差异(P < 0.05)。结论:非小细胞肺癌组织中DNA-PKcs表达增加,可能成为肺癌的一个生物标记物。
- 隋建丽孙敬芬曹珍山周平坤吴德昌
- 关键词：肺癌
- 染色质重构因子CHD蛋白家族的研究进展被引量：4
- 2006年
- 染色质重构是DNA修复、基因表达调控过程中的一个重要环节。染色质重构使染色质组织结构发生一系列重要的变化,如染色质去凝集,核小体变成开放式的疏松结构,使转录因子等更易接近并结合核小体DNA,从而调控基因转录等。CHD蛋白是目前已知的染色质重构复合物之一。目前已鉴定了6个人类CHD蛋白成员,主要有3种功能结构域:N端的两个染色质调节域,位于中部的类SWI2／SNF2 ATP酶／解旋酶域,以及C端的DNA结合域。CHD基因突变或表达异常与人类某些疾病有关。
- 王会平徐勤枝周平坤
- 关键词：ATP酶CHD
- 抑制CHD6表达对A549细胞辐射敏感性的影响被引量：1
- 2006年
- 目的通过RNA干扰技术建立染色质重构蛋白CHD6基因表达抑制的细胞模型,研究CHD6对人肺腺癌细胞A549细胞增殖及辐射敏感性的影响。方法利用质粒介导的siRNA技术建立CHD6基因表达抑制细胞模型,RT-PCR检测CHD6mRNA的表达,细胞生长曲线和流式细胞技术分别检测A549细胞增殖及细胞周期的变化,荧光染色法检测细胞凋亡,细胞克隆形成率检测A549细胞辐射敏感性。结果通过本研究,成功构建了siRNA抑制CHD6表达的细胞模型;通过siRNA抑制CHD6的表达,A549细胞增殖能力明显增强,细胞对2Gy以内γ射线照射有明显辐射抗性;大剂量照射后的细胞凋亡率无明显改变。结论抑制CHD6基因表达将提高细胞增殖能力和细胞的辐射抗性。
- 王会平徐勤枝黄越承隋建丽白贝周平坤
- 关键词：SIRNA细胞周期细胞增殖
- 低剂量辐射效应——辐射防护的基础被引量：12
- 2005年
- 低剂量辐射对生物体效应展现出多样性,而且不同LET辐射源的效应差异明显, 很难通过大剂量效应中推导.低剂量辐射的健康危害主要是远期致癌风险性,而早期效应随辐射品质、剂量、剂量率以及受照个体的不同会有不同的表现形式,突出的有三个方面:1) 细胞在接受一次几个cGy低剂量预照射后,能够对随后大剂量辐照损伤产生一定的防护作用,这种作用被称为适应性反应,或单次低剂量整体照射产生的免疫刺激效应; 2) 单次低剂量辐照所产生的单位剂量的急性损伤效应比大剂量的更大,这被称为低剂量辐射超敏感性,其剂量大小通常在0.2～0.5 Gy的范围内;3) 旁效应,是指发生在照射细胞周围的未受照细胞中的生物效应,该效应会导致高于预测值的辐射损伤效应.低剂量辐射的这些多样性效应给辐射防护实践带来了新的思考.
- 周平坤
- 关键词：低剂量辐射旁效应
- HIV-1Tat对辐射后细胞周期、DNA损伤的基因表达和功能
- 目的在HIV-1编码的为数不多的蛋白中,Tat蛋白是影响宿主细胞对环境因素敏感性的重要潜在蛋白,是一个与宿主细胞多种蛋白/因子存在相互调节作用的功能蛋白。现试图探讨表达Tat蛋白的细胞在受到电离辐射时其细胞周期的变化及其...
- 孙薏周平坤
- 关键词：电离辐射细胞周期
- 文献传递
